羟苯磺酸钙对6种酶法游离脂肪酸检测的干扰及对临床的影响

羟苯磺酸钙对6种酶法游离脂肪酸检测的干扰及对临床的影响

游离脂肪酸（ffa）是脂肪代谢的中间产物，主要由皮下和内脏的脂肪体组成。FFA既是细胞膜脂质结构和前列腺素合成的供体,也是人体的重要能源物质之一羟苯磺酸钙是一种微血管保护剂,广泛应用于糖尿病合并眼底病变的治疗。该药在人体内以基本原型存在,通过肾脏和肠道排泄材料和方法一、研究主题1.志愿者选取的志愿者与国秀芝等2.服用氨基丙烯酸钙的患者通过医院信息系统查询并选取北京协和医院住院患者中服用羟苯磺酸钙患者40例,收集其临床检验后的剩余血清样本。3.ep7-2c文件参考美国临床实验室标准化协会(theClinicalandLaboratoryStandardsInstitute,CLSI)EP7-A2文件二、仪器和试剂1.acs酶法试剂盒2.实验药物三、方法1.临床用药方法服药前采集10名志愿者静脉血,离心分离血清,作为基础空白血清,随后连续3d按临床常规用药方式,每天3次,每次500mg口服羟苯磺酸钙。按药代动力学信息,第4天药物浓度可达稳态2.血清药物浓度的评估3.外部干扰试验根据羟苯磺酸钙的药代动力学信息,单次口服500mg后,约6h达峰浓度(8μg/mL左右)四、统计方法应用MedCalcv13.3.3软件进行统计分析和绘图。计量资料以中位数(范围)表示。结果一、细胞系10名志愿者第4天羟苯磺酸钙药物浓度达稳态后的谷浓度(0h)为6.64(2.66~8.33)μg/mL;服药500mg后,药物浓度在2~3h达峰值,峰浓度为15.00(12.83~23.15)μg/mL,随后逐渐下降。见图1。二、血清药物在临床患者中的浓度40例服药患者血清中羟苯磺酸钙平均浓度为11.92(1.27~63.35)μg/mL。三、ffa的干扰程度外源添加药物羟苯磺酸钙,对FFA的检测产生负干扰。随着血清中羟苯磺酸钙浓度的增加,对FFA检测结果的干扰程度亦相应增大。当血清中羟苯磺酸钙浓度为8μg/mL时,B试剂盒和D试剂盒检测低(550μmol/L)、高浓度(1200μmol/L)FFA的干扰程度分别为-9.50%、-5.87%和-15.44%、-7.74%,均高于干扰可接受范围,其他4种试剂盒的干扰程度均在可接受范围内。当血清中的羟苯磺酸钙浓度为16μg/mL时,A试剂盒检测低浓度、高浓度FFA的结果与空白血清的偏差分别为-1.68%和-1.81%,均在可接受范围内;C试剂盒检测低浓度、高浓度FFA的结果与空白血清的偏差分别为-5.63%和-4.40%,低浓度FFA的干扰程度超出了可接受范围,而高浓度FFA的干扰程度仍在可接受范围内;其他4种试剂盒的检测结果均明显超出了干扰可接受范围。当血清中羟苯磺酸钙浓度为64μg/mL时,低浓度、高浓度FFA检测干扰最大可达到-65.11%和-52.33%。干扰程度也与基础血清的FFA浓度有关,在同一药物浓度下,FFA浓度越低,干扰越明显。见表1、图2。结果与质控品、仪器羟苯磺酸钙作为一种微血管保护剂,对临床检验项目的干扰早在1986年就已被报道本研究通过体外干扰实验证实羟苯磺酸钙对ACS酶法检测FFA存在负干扰。当血清中的羟苯磺酸钙浓度为16μg/mL时,FFA的检测结果仅A试剂盒和C试剂盒(高浓度FFA)在可接受范围内,其他试剂盒的检测结果均受到较大程度干扰。基础FFA浓度越低,受干扰程度越大,并且随药物浓度的增高,干扰程度逐渐增强。该药物干扰经初步分析,可能是Trinder反应过程中产生的过氧化氢与羟苯磺酸钙结构中所含的对苯二酚环反应,导致过氧化氢被消耗因FFA受饮食等多种因素的影响,在人体内的生理变异较大,本研究实验设计上要考虑因素过多,并且FFA检测无参考方法,无法得知临床患者服药后体内真实的FFA水平,因此本研究未做体内干扰实验,但可通过志愿者和患者药物浓度以及体外干扰实验的结果来推测体内干扰的严重程度。本研究测定了志愿者和临床患者血清中羟苯磺酸钙浓度,10名志愿者药物浓度达稳态后的血药峰浓度为12.83~23.15μg/mL。40例服药患者血清中羟苯磺酸钙浓度最高可达63.35μg/mL。由体外干扰实验结果推测,临床患者服药期间采用ACS酶法检测FFA将产生明显的负干扰,并且不同的采血时间和不同的检测系统会使FFA的检测结果产生很大波动。而这种由药物干扰造成的波动容易被当成饮食等因素的影响而被临床医生忽视,应当引起重视。羟苯磺酸钙对ACS酶法检测FFA的负干扰具有重要的临床价值,应当引起检验技术人员的重视。临床医师也应对服用羟苯磺酸钙的患者选择合适的时间采血,肾脏病患者应适当延长服药与采血之间的时间间隔,并对FFA检测结果谨慎判断,以免影响治疗。(1)德赛诊断系统(上海)有限公司(简称德赛)提供的FFA酶法试剂盒及校准品,批号为20717/00002360;(2)宁波美康生物科技股份有限公司(简称美康)提供的FFA酶法试剂盒及校准品,批号为15062301;(3)北京九强生物技术股份有限公司(简称九强)提供的FFA酶法检测试剂盒及校准品,批号为15-0616;(4)北京利德曼生化股份有限公司(简称利德曼)提供的FFA酶法试剂盒及校准品,批号为508171H;(5)日本和光纯药工业株式会社(简称和光)提供的FFA酶法试剂盒及校准品,批号为EL140;(6)日本积水医疗株式会社(简称积水)提供的FFA酶法试剂和校准品,批号为813RAM。以上6种ACS酶法试剂盒以A、B、C、D、E、F随机顺序编号。质控品使用Bio-Rad公司生产的LiquidAssayedMultiqual化学质控品(694/696两水平,批号为45681/45683)。仪器为BECKMAN-COULTERAU5800