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胶质瘤细胞中galecin-3、整合素
胶原肿瘤是神经系统最常见的肿瘤,其发病率很低,疗效也不好。本研究采用原位杂交组织化学技术(ISHH)检测正常脑组织及不同级别胶质瘤细胞中半乳糖凝集素3(galectin-3)、整合素α1数据和方法1.1正常脑损伤标本的年龄分布选取2012—2013年河北联合大学附属开滦总医院病理科存档的经甲醛固定、石蜡包埋的胶质瘤标本40例,其中男26例,女14例;年龄13~68岁,平均(46±16)岁,中位年龄49岁。根据世界卫生组织中枢神经系统肿瘤分级标准(2000年),将40例标本进行分级:Ⅰ级12例,Ⅱ级11例,Ⅲ级13例,Ⅳ级4例,Ⅰ、Ⅱ级为低度恶性胶质瘤组,Ⅲ、Ⅳ级为高度恶性胶质瘤组。另取同期同一医院神经外科收治的脑创伤患者内减压术中得到的5例正常脑组织标本,其中男3例,女2例;年龄35~53岁,中位年龄44岁。1.2酯水解反应-galectin-3、整合素标本制备:所有标本经4%甲醛固定,常规石蜡包埋,蜡块连续切片,片厚4μm,连续做3张切片,在55℃高压过的焦碳酸二乙酯(DEPC)水中展片,用原位杂交专用载玻片捞片。3张切片分别用于galectin-3、整合素α检测方法如下:(1)60~65℃烤片2~4h至蜡融化为止。(2)切片经二甲苯脱蜡20min2次,脱蜡后的切片在100%、90%、80%乙醇中分别放置20min后,经DEPC水、磷酸盐缓冲液(PBS)漂洗3次,5min/次。(3)3%过氧化氢(H1.3评估结果Galectin-3、整合素α1.4相关分析过程采用SPSS13.0统计软件包进行统计学分析。计数资料以百分比表示,计量资料以(ue0af±s)表示,两组间比较采用t检验;两因素间的关系采用直线相关分析。以P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1galectin-3基因表达正常脑组织中galectin-3mRNA无表达(见图1)。在人脑胶质瘤中galectin-3mRNA主要表达于肿瘤细胞的胞质,其表达是在胞质中出现棕色或棕黄色染色(见图2、3)。在Ⅰ~Ⅱ级胶质瘤标本中,galectin-3mRNA表达阳性2例、弱阳性4例、阴性17例,LI为(4.8±3.2)%;在Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤标本中,galectin-3mRNA表达强阳性4例、阳性6例、弱阳性1例、阴性6例,LI为(27.3±22.7)%。Ⅰ~Ⅱ级胶质瘤标本中galectin-3mRNA的LI与Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤标本比较,差异有统计学意义(t=4.055,P<0.05)。2.2整合素s正常脑组织中整合素α2.3mmp-2mrna的表达正常脑组织中MMP-2mRNA无表达(见图7)。在人脑胶质瘤中MMP-2mRNA主要表达于肿瘤细胞及血管基底膜内皮细胞的胞质,其表达是在胞质中出现棕色或棕黄色染色(见图8~10)。在Ⅰ~Ⅱ级胶质瘤标本中,MMP-2mRNA表达阳性5例、弱阳性3例、阴性15例,LI为(6.4±5.3)%;在Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤标本中,MMP-2mRNA表达强阳性4例、阳性7例、弱阳性1例、阴性5例,LI为(29.9±24.0)%。Ⅰ~Ⅱ级胶质瘤标本中MMP-2mRNA的LI与Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤标本比较,差异有统计学意义(t=3.966,P<0.05)。2.4galectin-3,整合素绘制3个指标的三维散点图,以揭示它们之间的相关性(见图11)。结果显示,galectin-3mRNA的表达与整合素α3胞击穿与ecm屏障Galectin-3是一个31kD的β半乳糖蛋白,存在于细胞内和细胞外,主要与细胞内的糖蛋白、细胞表面分子和细胞外基质(ECM)作用,降低肿瘤细胞与ECM的黏附,从而促进肿瘤细胞侵袭,参与肿瘤的发生及发展的全过程细胞黏附分子(CAM)是一类调节细胞与细胞、细胞与ECM间相互结合、相互作用的一类细胞膜表面糖蛋白,其参与许多生理和病理过程中细胞间信号的传导,包括肿瘤细胞的转移和生长胶质瘤的生物学行为和预后同肿瘤细胞的侵袭程度密切相关。肿瘤细胞在侵袭过程中必须破坏由细胞间基质及基膜构成的ECM屏障。在ECM的酶类中,基质金属蛋白酶(MMPs)与
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