唑尼沙胺对癫痫大鼠血清及脑组织no含量及nos活性的影响

唑尼沙胺对癫痫大鼠血清及脑组织no含量及nos活性的影响

癫痫是人类常见的神经疾病，其发病机制非常复杂，可以由多种因素和手段共同参与。有研究显示NO可以作为神经递质,参与癫痫的发作1材料和方法1.1实验动物及分组清洁级健康雄性SD大鼠50只,体质量(250±20)g(许可证号:1310073,河北医科大学实验动物中心提供)。实验前先将所有动物在实验室饲养7d,以适应环境。从所有实验动物中随机抽取8只为正常对照组,剩余42只全部腹腔注射戊四氮制成癫痫模型。模型制备成功后,以完全随机分组法抽取24只作为本实验动物,再分为癫痫模型组、唑尼沙胺组及苯巴比妥组,每组8只。1.2方法1.2.1racine分级24只大鼠均给予戊四氮溶液45mg/kg,每24h腹腔注射1次,注射后均观察40min,记录致痫大鼠发作的潜伏期、惊厥发作的表现及持续时间。致痫大鼠的癫痫表现形式采用Racine分级评价标准:0级,无反应;Ⅰ级,湿狗样抖动和(或)面肌痉挛,如动须、眨眼及节律性咀嚼;Ⅱ级,颈部肌肉的痉挛,出现点头和(或)甩尾;Ⅲ级,单侧前肢痉挛;Ⅳ级,双侧前肢痉挛,站立位出现;Ⅴ级,全身强直、阵挛,失去平衡、跌倒。观察实验大鼠在造模过程中出现以上分级中的Ⅳ~Ⅴ级表现,提示戊四氮点燃成功。正常对照组在同期给予同等容量的生理盐水腹腔注射。1.2.2脑电图的记录从每组实验大鼠中抽取2只行脑电图监测:先用10%的水合氯醛35mg/kg腹腔注射,麻醉大鼠后固定于固定架上。再用头皮针样电极的单极导联法,连续描记2min的脑电图。脑电图灵敏度20μV/mm,时间常数为0.1s。每次记录前均在彩色显示器上观察信号,待信号基线平稳后再将信号存入计算机硬盘。放置电极位置及导联:单极导联法;取2根0.5寸(15mm)针灸毫针为记录电极,分别刺入大鼠头顶部中线两侧的头皮下,再将导线连接到脑电图的信号输入设备,大鼠尾根部也需放置电极,接地。在每只大鼠的第6次癫痫发作时描记脑电图,先观察行为学变化,再记录脑电图变化。1.2.3药物的剂量和方法造模成功后30min,唑尼沙胺组给予唑尼沙胺45mg·kg1.2.4样品的采集和测量所有动物在实验2周时称质量后,首先将大鼠以戊巴比妥钠40mg·kg1.3资料的统计与分析使用SPSS16.0统计软件进行数据分析。计量资料先行正态性检验,服从正态分布的资料用ue0af±s表示。方差齐性检验后,多组间比较采用单因素方差分析,多重比较采用LSD-t检验。以P<0.05为差异有统计学意义。2模型制备和活性共给42只SD大鼠注射戊四氮,其中有2只(4.8%)大鼠有Ⅴ级发作持续10min以上而死亡。所有大鼠均在第1次腹腔注射戊四氮后出现Ⅲ级及以上惊厥发作,38只(90%)可在第2次注射戊四氮后达到RacineⅣ级及以上。第3次戊四氮腹腔注射后,5只未达RacineⅣ级发作。最终35只(83%)模型制备成功。正常对照组的脑电图表现为低中幅、相对对称的正常脑电波,见图1。戊四氮致痫大鼠脑电图表现为:基本背景节律下可见阵发性癫痫波,见图2。唑尼沙胺组及苯巴比妥组大鼠经药物干预,脑电波中的棘波减少,背景节律较规整。与正常对照组比较,癫痫模型组和唑尼沙胺组大鼠的脑组织和血清的NO、MDA含量及NOS活性明显升高,SOD活性下降;苯巴比妥组脑组织NO、MDA含量升高,SOD活性下降,血清MDA含量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与癫痫模型组比较,唑尼沙胺组和苯巴比妥组大鼠血清和脑组织NO、MDA含量及NOS活性明显降低,SOD活性升高,差异有统计学意义(P<0.05),见表1、2。3戊四氮致痫模型的研究癫痫是一种长期反复发作的慢性神经系统疾病,人们对癫痫发病机制及治疗的研究主要依靠动物模型。戊四氮为兴奋中枢神经系统的药物,根据其药代动力学特点,此药物可以引起动物抽搐的迅速发生,并且这种抽搐发作可以迅速达到高峰,持续较短,能自动停止,同时此模型具有不破坏局部脑组织的结构,不伴有神经元损伤、坏死的优点,有利于癫痫脑组织的形态学观察。因此戊四氮致痫的动物模型是研究癫痫的理想动物模型。目前治疗癫痫的基本方法仍是口服抗癫痫药物。传统的抗癫痫药物如苯妥英、卡马西平、丙戊酸等均因长期服用出现较大的毒性,并且可能存在肝酶代谢异常、半衰期短及产生活性代谢产物等,其不良反应较严重,因此在临床上的应用受到限制本研究通过检测血清及脑组织NO、MDA含量和NOS活性,证实了癫痫发作后NO含量升高,引起脑组