紫外线对枯草芽孢杆菌诱变剖析课件整理

紫外线诱导枯草芽孢杆菌突变第六组小组成员紫外线诱导枯草芽孢杆1实验目的:学习微生物诱变育种的基本操作方法实验内容:1:对枯草芽孢杆菌出发菌株进行处理制备菌悬液。2:对紫外线进行诱变处理。实验目的:2实验材料和用具菌种:枯草芽孢杆菌。2培养基:淀粉掊养基。3主要药品:牛肉膏、蛋白胨Nac、可溶性淀粉、碘液,生理盐水4主要器皿:试管、移液管、锥形瓶量筒、烧杯、紫外灯、离心机、培养皿等实验材料和用具3技术路线:材料器具准备菌悬液制备紫外线诱变处理平板制作稀释菌悬液稀释涂平板计算存活率及致死率3rian技术路线:4操作步骤1.菌悬液制备将枯草芽孢杆菌接种在牛肉膏蛋白胨培养基上37℃培养20h,使其活化,取已培养20h的活化枯草芽孢杆菌斜面一支,用10mL生理盐水将菌苔洗下,倒入离心管中,离心(3000r/min)15min,弃上清液,将菌体用无菌生理盐水洗涤2次,最后制成菌悬液,用血球计数板在显微镜下直接计数。调整细胞浓度为108/mL2.平板制作将培养基熔化后,冷至45℃C左右倒平板。www,3lian,oom操作步骤53诱变处理用物理方法或化学方法,所用诱变剂种类及剂量的选择可视具体情况决定,有时还可采用复合处理,可获得更好的结果。本实验用紫外线照射的诱变方法。(1).紫外线处理打开紫外灯预热20min。取5mL菌悬液放在无菌的培养皿中,同时制作5份。逐一操作将培养皿平放在离紫外灯30cm(垂直距离)处,照射min后打开培养皿盖,开始照射,与照射处理开始进行搅拌,即时计算时间,照射时间分别为15s、30min、2min、5min。照射后,诱变菌液在黑暗中保」存1~2h然后稀释涂菌进行初筛(2).稀释菌悬液按10倍稀释至10-6,从10-5和10◆6中各取出0.lmL加入到酪素培养基平板中(每个稀释度均做3个重复),然后涂菌并静置,待菌液渗入培养基后倒置,于30℃恒温培养2~3d。儿的简笔画3诱变处理64稀释涂平板取未照射的菌悬液(作为对照)和照射过的菌悬液各0.5m进行不同程度的稀释。取最后3个稀释度的稀释液涂于淀粉培养基平板上,每个平板加稀释液0.1mL,用无菌玻璃刮棒涂匀,培养48h(用报纸包好平板)。注意在每个平板背后要标明处理时间、稀释度。注:枯草芽孢杆菌诱变前:稀释至10-8,10-7,10-6,生理盐水枯草芽孢杆菌照射1min稀释至10-8,107,10-6,生理盐水枯草芽孢杆菌照射2min稀释至10-8,10-7,10-6,生理盐水枯草芽孢杆菌照射3min稀释至10-8,104稀释涂平板7菌落透明圈直径HC值菌落直径正突变菌落数正突变率x100%突变菌落数致死率对照菌落数-处理后菌落数100%对照菌落数菌落透明圈直径8王1:紫外线照射时注意保护眼睛和皮肤。意2:诱变过程及诱变后的稀释操作在无菌下进行并暗中培养。事页王9实验结果分析实验结论实验失败实验结果分析10紫外线对枯草芽孢杆菌诱变剖析课件整理11紫外线对枯草芽孢杆菌诱变剖析课件整理12紫外线对枯草芽孢杆菌诱变剖析课件整理13紫外线对枯草芽孢杆菌诱变剖析课件整理14紫外线对枯草芽孢杆菌诱变剖析课件整理15紫外线对枯草芽孢杆菌诱变