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文档简介
重组子导入、表达与筛选
找找看……重组DNA导入的目的是什么?请简单描述需要被纯化掉的对象转化率是什么?该怎么计算表达?影响转化率的因素是什么?一、重组DNA分子导入宿主细胞什么是转化(transformation)?将重组DNA分子引入细菌(原核细胞),使其在细菌体内扩增及表达的过程。什么是转染(transfection)?将噬菌体、病毒或以它们为载体构建的DNA重组体导入真核细胞的过程。基从因拔重台组转犁染体爷外怎包弊装噬饥菌猜体噬芝菌减体徒体罪外偏包拢装1粪原程核蠢细竹胞糕的宾转靠化合(易细漏菌酸转溜化昂)1角)魂受伟体社细磁胞舰的脚选粘择限稿制编缺枪陷巧型资:避责免适修楼饰负和突降往解重焦组材缺序陷走型怕:避外免验重掌组接整宅合转贪化约亲医和巨型滔:较走高垃的支可语转瓜化巩性遗属传雄互妖补奖型条:利咐于宽筛虫选感届染围缺卡陷伶型杨:防滤止遭感乔染宿症主剧细揉胞踏原毅核失细家胞掠:毫大附肠庸杆要菌污真固核滨细羊胞享:冰哺亲乳钥类猜动跟物御细忽胞殃、邻酵钥母迁和唉昆洒虫正细瘦胞重扣组品体晃分泽子真导茄入慨原旬核风细芹胞感卧受烛态锄细叙菌派:购细鉴菌弹表搜面慈正攀电略荷词增烫加京,育细逗胞蜓壁任和钞膜炒的狠通佳透蔬性辨增错加讨,赵利蚂于浪D汤N华A尿分斩子里的排吸少附被和奖吸蒙收(订1土)炭C授a学C炎l2转蒸化面:细道菌舞处返于士0纱度许,葡二弦价梅阳烧离晓子蹲存罢在狠的罗低蛇渗挡溶瓶液庄中毯,运细此菌井膨键胀朝成秃球夸形兄,切处泻于镇感朴受昂态雷。此放时机加棉热融在巡寿4掩2当度唯的恩热股冲嫌击涨下蒙进众入拉细建胞董,角在牵培浅养掩基偏上蹈生互长嗓数亚小够时工后锋球适形蚀细低胞遮恢宅复络原福状请并偶繁辆殖盛。转晌化楚效亲率墨为辞1替05~饿1丘06/红u甜g(慈2稳)助电患击码法早(脖e雅l遮e车c作t杆r经o术p虹o陈r雪a棋t慨i坑o哈n止)威:在酬高鸦压旦脉悄冲座下虚,惯细垦菌志细佣胞概表积面竟形且成爆暂由时级性弃微欢孔该,傍重柔组铁D则N顺A端进喷入猜微酱孔蚕后扛,泛脉奥冲惑结芝束己,吓细愧胞概恢精复风。实括验桶简牌单乒,折不绢需后要切制太备歪感虑受茶态赶菌肉,史转笑化肝效苗率莫高霉1站09~反1赏01乖0/蛙u阔g[劣原词理弃]便利弄用赠高刊压直脉麻冲糠,晃在砖细慕菌慢细顶胞弯表贯面值形锯成遣暂蓄时稍性吓的胆微书孔恩,蹦重匠组趋D控N则A仔从苗微插孔杂中迹进比入敞,槐脉饲冲启过朱后戚,哲微柏孔缝复稠原傻,份在鼻丰壮富亩培傍养烂基喘中苹生丢长搂数春小恩时懒后僚,耕细公胞愉增狮殖在,曲重揭组幅D峡N离A寄得秒到核大累量边复赶制匀。3盘)融转逮化深率臭:D劲N涨A梦分驰子母转眉化稍宿每主码细世胞享获锹得怜转喇化桶子刘的盒效顶率什符么宝叫捧转克化缴子竿?导气入烘外誓源剪D偶N葡A摔分辨子蕉后则能蔽稳珍定浴存通在沾的寸宿扭主池细荣胞什态么妄叫远重保组乒子傻?导月入心的似外现源汽D显N晴A聚为朗重贞组抖D方N字A傅的辱转经化岂子表情达货方正式五:A生、嫩转晴化饿子女数隶/库用胆于垦转锐化阴的迷D苏N嗓A非分组子捎总涂数B戴、羽转素化碰子侮数慢/喇宿者主言细映胞国总沉数计剑算同示箱例筋,亏见兰书井1序3索2协页影壤响貌因戏素任:重早组弟D属N堡A宿:分侮子血量愿小欲,亏转退化与率旬高储;亲普和冠性壶强挑的构质六粒岛载遗体鸦转撑化故率反高聪;c僚c核c熄质白粒羊D承N讨A课载考体误转拆化勒率颤高受册体追细病胞转镰化品方欣法障:电原击戚法沸转摇化捆率笼最机高枯;举氯栋化花钙宅法典次恰之(寺1裹)隆农哨杆滚菌隙转我化菜法2好、吩导灾入伸植洪物溜细筒胞基片因顽枪附法基除因猫枪很法鞠(酷g掀e皆n奋e侄g撕u垮n变)否是真依倾赖荷高吃速奋的案金设属糠微抗粒挥将出外未源韵基咐因嫁导作入蝇活筑细米胞续的扔一顶种娘转古化逗技拐术需。(本二攻)衬基奋因穗枪饰介陪法优嫌点:(定1男)无溉宿腥主猪限吃制贱。傅可俯以悉对向任软何疑基下因顶型膀材骆料非进螺行胶转激化虏研颂究殖;桨(主2顶)悦靶灵受他体馅几妨乎抬包左括握所角有左具丸有燥潜号在际分扁化女能长力售的授组近织岛或句细抹胞弦。梨(为3桃)裤易弊于蜻操勿作何。缺况点桨:如怪转粥化祖频进率汽低绍、寸结疮果首的最重宴复礼性卸差御,坐易弓导介致拼基蚕因虹沉攻默钥,拿实世验每成服本提较恳高垄等倾。(阻二秤)叹基童因迷枪花法3统、悄导禽入衔动锻物拍细琴胞显匙微缴注档射砖技养术含超目将的叹基嚷因征的灾表拆达绵载巾体动监物债受蓬精样卵含乳目抖的恐基说因卡的胶受偶精孝卵早船期吗胚吊胎雌让性龟动急物惨输炉卵烟管花或血子凝宫转悔基灭因织动抗物显腥微注筋射分余裂分搏化移蹦植发育脂种质猛体讨法重努组怜体脂简质万体受腾体植细速胞含更有覆目翻的张基秒因躺的代重善组叨宿古主枪细贸胞棵(教如筝细卸菌巷)框可滴以寇通免过规首模胡化茧的悲基拐因溜工诊程茂生处产绸目乓的虫蛋仍白雹(骡如洁激旋素遮)找险找茫看在…摆…基滤因忽表浊达醒系拉统超有蹲哪粉些狂?基雄因臭表狼达骄系渔统种应爬该达具计有澡什些么液条亦件件?重悬组粗子肾筛萄选扶的吩意迁义腿是阳什内么触?有翅哪欣些掘方姥法绵可平以阴用盼来诞筛送选恢重愤组豪子理?最帖佳泰的哀基胞因响表西达渴体荒系流:⑴产目阳的场基指因坑的符表茂达姑产答量煌高殊;⑵待表呜达乔产秀物芦稳进定植;⑶胳生锄物壳活抢性党高既;⑷宴表旅达知产钓物茎容浑易礼分企离犹纯抗化骑。第农一线节致基须因牌的俭表卡达喂系暖统系与车表灵达犹策矛略宿咸主蔽细望胞娘的犁选凳择一质、撞适幅合昂目条的颂基计因鸦表鉴达腿的醉宿膊主梯细歉胞笋的紫要册求稍:1抚、遍容六易迟获睬得踢较渔高请浓毕度四的缠细膛胞陵;2舰、截能拿利指用搜易绳得裁廉处价迅原达料织;3悉、穴不轨致季病蛋、葡不湿产汽生为内公毒百素糟;4侄、滚发盾热肯量郑低勿、翻需尺氧款低陵、弃适浇当勺的岸发挺酵肌温智度驰和混细创胞夹形僚态孙;5耳、嘉容息易屈进垫行啄代博谢澡调经控峡;6由、卧容铺易谢进获行绸D避N肚A五重妨组扰技询术阻操励作型;7刮、躺产轨物摸的您产兴量伞、聪产漂率撑高厉,8研、姓产怪物灰容调易同提鄙取本纯新化帝。二下、取宿竹主资细管胞拨分欣为且两混大跃类阁:1贤、熟原绪核杯细卖胞孝:竖常袜用傅有偷大驾肠颜杆导菌纳、颂枯迅草怠芽郑胞帆杆久菌给、宏链必霉鼠菌刺等匆;2鄙、攀真邮核屯细狭胞眨:订常摸用割有告酵移母灶、亮丝技状关真抗菌慨、扇哺腊乳卵动估物差细音胞尾等钞。大些肠冒杆趣菌目者前余仍饥是喉基灶因绝工普程结研纵究伶中蠢采霉用投最古多抵的色原貌核责表借达懂体猎系色。优做越委性绑:①蛮对射大池肠拳杆灰菌饿的百基害础慰生犬物碗学辟、膊分发子你遗然传梢学努等泳背胁景低知何识滩和润基初因顽表腊达欠的搭调樱控球机颜理朽已们有通了禾深做刻渣了扶解做。②刮有升各倒类认菌写株秆和宇载咳体唐系嫁列阻。③盒目疤前胳以学实退现瓜多迹种凝基想因伪的棚高茅效铺表需达彼。相表植达副基子因彻产梦物塘形肉式年多泄样收:熊细撇胞竹内跑不加溶走性沟表状达砌(僵包丸含竿体谎)另、额细樱胞叹内疫可土溶悟性活表竭达拒、蛋细柄胞锐周然质娇表放达碎等和。④婆易忙培现养涉,楚成惩本誓低。缺块点信:①虎大秘肠器杆郑菌贩中披的溪表英达仁不妻存逝在钻信权号车肽铃,士产齿品突多纺为检胞遍内组产败物僵,蛇提荷取鲁困阶难盼。②纠因煎分而泌臣能宏力偿不萝足左,调真脸核戏蛋必白雀质男常抚形域成召不峡溶贞性乞的门包耻含据体少,裹表贪达周产袍物歌需燥经屯变特性锯复冶性古才估恢刚复临活铺性熟。③猎蛋听白汤质奏不洁能月糖匀基条化煤。高产映物辰蛋籍白板质倒N扮端苗多修余们一践个辣蛋健氨守酸讲残块基座。④耀其找内触毒香素援很载难臭除习去灭。酵默母酵蛇母喂菌延是亲研稿究笛基旬因横表魄达冬最踪蝶有乖效虏的哄单截细邻胞泼真窗核往微价生估物雪。当其料基借因扶组煤小赛,独世警代毕时蚕间印短插,铅有续单堆倍协体寻双动倍绝体弟两早种茂形刃式冈,饺繁陆殖跪迅夏速龄,如无刻毒较性伍。个能害外怨分滩泌寇,牌产杆物挡可竭糖蝴基饲化迎。获已槐有年不格少忘真烟核佣基党因颠成垒功筐表脂达档。重市组浅子蛾的侮筛诊选打和猴鉴铃定(踏一仪)啊根滋据敞载懒体宾的拥性魔状斗变缓化搜进的行匀筛缘瑞选1现根冻据宵载俊体由的后抗没药判性捐标轰记信进伤行巧筛察选载障体恒上夸的混抗桥药裹基亦因姑:抗君氨蔬苄照青恒霉劣素份基胀因抗荷四冤环卫素坏基宪因抗牺卡根那但霉运素括基煮因暂等凡词是哪转闲入粗了柜载颂体计的辰细垦胞茂都接获伯得祥了务这为种抗竿药苦性谦,蜻可获以服在浓平呆板诸上贵生楚长刻菌谎落许。当卷带扯有其完爹整祝抗丸药欣性劫基归因际的涂载雅体格转他化泉无伴抗际药树性控细漠胞访后正,凡愤转痕入弱载龄体抽的朝细枪胞纤都肉获助得昼了粗抗园药砖性犁,能脆在蔬含颈有敢相篇应必药参物该的砖琼怖脂引平锐板颜上甘生础长济成旅菌奥落浸,颠而吃未死被冲转激化是的刃宿为主砌细洪胞扮不坝能搅生槽长浓。2矛根洒据睛载霸体们抗回药终性护插游入青失挤活温选戚择根稍据桶载捐体异抗硬药殿性科标接志胸插塌入悉失孝活酒选挑择波含俘有两龟个裤以骗上的响抗昏药毫基影因萍的隙载侨体夫,培外统源素D痒N详A胀片骨段切插罢入雹其笔中徐一毯个条基凭因垦,爸并循导泛致料这歉个访基帽因鸣的村失祝活途,税就概可评用两捎个碍含台不邀同背药眯物互的宗平衬板,浸互慎相脆对紫照材,膏筛昏选纪含卖重附组响D翼N蓬A潜的亮菌灾落侵,哄这栏就奔是插妈入去失绘活挡效怨应。外递源的基兰因抗吗A刘m缺p抗大T首e忧t抗斯A件m腊p抗樱A云m达p抗遭T侦e哲t抗赌T炒e草t重野组捡D坐N途A空茫载饰体不甘含投有麻载朱体山或买重鸟组捷D妥N睁A3板-请半男乳扭糖胖苷氏酶腿系暖统β照-奴半躁乳赛糖程苷桐酶碰系捡统打载委体金:巧p挣U秒C障、似p蜘G洞E砌M望系辆列斑载对体台等弃带泳有苍一昂个疏来提自备大愿肠桃杆传菌狼D端N韵A敲的拐短秘序印列贞,岭其息中助含概有雨编滤码膝β册-狭半怖乳序糖嗽苷知酶奶(躁β锣-宴g炎a昂l狠a脖t社o膨s树i骂d宋a墓s薪e岔)覆基走因隙(阅L骆a炊c适Z睬基宜因节)坡的备调惨控佣序磨列凉和宴N确端帝1漫4尸6删个慕氨何基档酸怕的古编羞码棋序肺列文,币在攀编蛮码度序好列终中冷插赌入蛇了食一勺个足多析克互隆托位赠点内,霸但牌不傍破泉坏画阅少读利框您架君,础不刊影回响柜功屡能仔。当木这怖种该载屠体抢转娱入侵的烦宿顷主盘细跑胞彩是狮含碑有焦β片-顽半泥乳资糖伙苷萌酶递C品端档编顶码派序想列躬时镇,层此雄酶超的隙N狸端犹序浙列蹲和骄C束端夕序韵列玻可煮以夸互丹补呢(匹成诉为炒α营互尤补软)邀,具产翻生凭具敲有湾酶型活掉性稍的蛾蛋基白勿质敲(切β跟-跟半柴乳众糖凶苷山酶庄)脏,坐从秃而跟使妻宿派主稻细逃菌捞在护含希有犹I拾P雅T段G疾,煎X做-延g扬a孩l好的飞培液养盒基观上呈除蓝莫色。雀当耍多馆克粱隆译位赴点趟有分外成源久D丹N倚A征片胖段背插横入定时俩,邻破法坏剥此步酶狸的稻N桃端爽阅意读纤框祥架棉,寨产密生私无歇α舟互着补扫功运能姐的丘N息端徒片嗽段继,开因中此壮在右带护有蚕外口源耀D移N偿A满片耐段港的揪细拐菌紧在扁含渠有彼I虎P世T识G帜/俊X厕-脸g痛a远l本的妄培葵养仓基抹上呈低白骂色。L配a讨c惊Z芦基炎因淘-见半啦乳勺糖傅苷宁酶在裕X心/怕g贫a敏l倚培清养魔基照上妖呈灿现纤兰由色X箭-鞋g笋a蜜l惹X取(览发匹色诞底僵物及)寨+践g均a机l迷(现半摆乳咬糖践)倾-齿半趴乳咸糖狱苷弓酶4货根袄据意外愚源劝性亿D宗N吊A晋片阳段趟性览状磨进睡行医筛柄选根裁据柔外码源劝基现因膜可堡能恋表研达为的排蛋诊白说质慈对俭缺乏育该住蛋跪白判的亚细刷菌训的禁影斧响如浸果蹦外悉源聪性迷D功N累A主片晃段鹿可轧编尽码锤产乌生职蛋邮白宅质触,支并续且颗该雾蛋田白日质截为缺细请菌熟生点命庄活垃动葱所话必学需草,雾可浪利扣用丘该售蛋惕白厨质胞的涝性护状拿进应行趁筛洽选掏。煎如宵亮思氨撒酸四是惠细撇菌萄生毛命模活炊动添所狼必陕需怕的补,欺当临外鸭源集性辱D本N链A附片丸段灰含帜有练合程成泛亮苗氨韵酸驻的棋基冷因容时陆,盼将苦该案外蝴源躺性只D朵N拐A川片休段央转步入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