HIV检测质量保证杭州

HIV检测的质量控制

中国CDC性艾中心肖瑶xiaoyao@

规范化的实验室检测全国艾滋病检测技术规范，2009修订版艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准实验室安全通用要求临床基因扩增实验室管理暂行办法《检测和校准实验室能力认可准则》CD4+T淋巴细胞检测质量保证指南HIV－1病毒载量检测及质量保证指南HCV检测指南？婴幼儿HIV检测指南？02年 03年 04年 05年 06年07年抗体 CD4病毒载量亚型 BED耐药

2009

20062006全国艾滋病检测实验室质控体系发展20062008质量控制

质量控制：是指为确保实验工作正常进行而在每一次实验过程中必须采取的各种措施。以保证检验结果达到允许的准确度。实验前质量控制

正确的标本采集和处理正确及时的运送样品实验前正确地处理和保存样品实验中质量控制

选择正确的检测方法质控品的准备开展质控图质控Levey-Jennings（或“即刻法”质控）。

实验后质量控制①实验后准确填写检验结果；②及时发出报告；③正确地解释检验结果的临床意义。质量控制实验前质量控制正确的标本采集和处理检测目的（抗体（BED），VL，CD4，DBS等）抗凝和不抗凝数量正确及时的运送样品运输包装检测目的检测方法

实验前质量控制运输采用WHO提出的三级包装系统

第一层容器：装样品，要求防渗漏第二层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒观察窗温度计实验前质量控制正确地保存样品

长期（血清，血浆，全血），短期，不保存

问题：抗体：短期（？）保存2－8C。长期（？）度保存CD4：全血最长时间（？）处理好样品怎样保存？VL：（？）分离血浆长期（？）中期（？）短期（？）保存时间冻溶不能超过（？）次实验前质量控制选择正确的检测方法不同检测方法对样品有不同要求检测方法提高准确性质控品的准备商用和自制开展质控图质控（Levey-Jennings，或“即刻法”质控）。

中部三省27个VCT点10310名咨询者样本检测结果检测策略与WB+符合率漏检（数）RT192.57%1RT291.94%3RT1+RT298.72%1RT1+RT2+EIA99.74%第四代EIA试剂的使用现场调研时发现，在CDC实验室工作中存在着HIV漏检的潜在危险因素，应引起高度重视。许多血站开始开始使用第四代EIA，CDC仍然用第三代EIA复检，因此，有导致窗口期漏检的可能。建议：确证实验室对来自血站的筛查阳性的样品使用第四代试剂进行复检。HIV发病率研究的方法BED计算发病率与队列观察发病率比较文献列表

3.14.3③155001092IDU中国8.88.2③4247534225IDU中国1.13.4③447528267FSW中国1.76.1③..39151乡村居民非洲917.3②..113594IDUc泰国3.43.5①②d2349589123234VA试验非洲4.612.2①19397.19FSW非洲1.361.44①.1113..入伍官兵泰国0.51①19482216FSW非洲3.12.91①1271805101111MSMaFSWb北美荷兰队列观察发病率/100人年BED计算发病率/100人年BED检测样本来源队列血清阳转人数队列随访人数新感染数BED检测的样本量人群地区标注：①队列中期和随访间隔；②样本来自队列筛检人群；③与队列目标人群相同的横断面调查；a:男同性恋人群；b:商业女性工作者；c:静脉吸毒人群d:该文献给出队列筛检人群由BED-CEIA计算的发病率6.0/100人年

“.”表示数据缺失实验中质量控制质控图1、抗体检测2、抗原检测3、病毒载量检测4、免疫表型（CD4＋T淋巴细胞）的检测EIA检测质控室内质控内部对照：试剂盒提供外部对照：自己制备或购买用质控图监测变化趋势试剂盒内部对照试剂盒内部对照质控品阳性和阴性对照血清用于判断每次实验的有效性，但不能作为室内质控品使用。每一次检测临床样品时，必须有试剂盒内部对照，而且只能在同批号的试剂盒中使用。内部对照结果无效，必须重新试验。室内质控品为非试剂盒组份的外部质控品，是为了监控检测的重复性而设置的，包括强阳性、弱阳性和阴性质控血清。也可以只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒临界值（Cut-off）的2～3倍为宜。外部质控品的是判断该批临床样品检测的有效性，因此，每次实验必须包含室内质控品，其结果无效，必须重新试验。室内质控品可以是商品或实验室自行制备。

EIA质控图算术平均值X：至少20天测得的外部对照血清S/CO值结果的平均值标准差S：是描述样品于均值之间离散程度的指标，是与对照血清S/CO值有关的预测范围。

变异系数CV：是反映各次S/CO值相对于均值离散程度的。可以用来衡量检测的重复性和精密性。实验中质量控制质控图

XX+SX-SX-2SX+2SWestgard标准

多标准质控13S标准均值+1s+2s+3s-3s-2s-1s1234567891022S标准均值+1s+2s+3s-3s-2s-1s1234567891041S标准均值+1s+2s+3s-3s-2s-1s12345678910R4S标准均值+1s+2s+3s-3s-2s-1s12345678910CD4＋T淋巴细胞检测质控室内质控：内部对照：厂家提供外部对照：购买用质控图监测变化趋势流式细胞仪检测质控图质控图质控图VL质控室内质控：每次实验需同时使用试剂盒内的质控品以及一个HIV-1RNA为5000-15000拷贝/毫升的外部质控品内部对照：厂家提供外部对照：自制，个别实验室使用实验后质量控制实验后准确填写检验结果；及时发出报告；正确地解释检验结果的临床意义。抗体检测中的问题初筛实验中的假阳性血液恶性病变自身免疫性疾病多发性胆汁型肝硬化酒精性肝炎疫苗接种（流感，乙肝）多发性骨髓瘤肾移植或慢性肾衰竭疟疾或丝虫病其他

抗体检测中的问题

初筛实验中的假阴性窗口期免疫移植换血输血恶性肿瘤免疫功能丧失（B细胞功能缺损）其他（试剂或操作原因）影响CD4细胞数的因素1.季节性和昼夜差异：如每日最低水平在中午12点30分，峰值在下午8点30分（JAIDS，1990，3：144）。2.肾上腺皮质激素对CD4细胞数有较大的影响，短期服用可能使CD4从900/ul下降到300/ul.Clinimmunopath,1983,28:101).3.合并感染HTLV-1的病人可能造成CD4的假性升高（AnnInternMed,1993,119:55).4.急性改变可能由于淋巴细胞在外周循环和骨髓、脾及淋巴结中的再分布(ClinExpimmunol,1990,80:460)。影响CD4细胞数的因素

免疫缺陷状况也可以有辅助性T-淋巴细胞数量减少的结果:

-丙球蛋白缺乏症

-胸腺发育不全(DiGeorge氏综合症)

-严重的联合免疫缺陷影响CD4细胞数的因素检测的仪器PT与室内质控室内质控是对检验结果的即时性评价，通过对室内质控结果的连续观察，监测实验室检验结果的可靠性。PT是对检验结果的回顾性评价，其主要目的是评价和修正实验室检验结果的准确性，并与各参评单位结果比较，了解本室结果的偏倚程度，是发现实验室系统误差的重要手段之一。HIV抗体检测诊断依据：金标准？谢谢第一节活塞式空压机的工作原理第二节活塞式空压机的结构和自动控制第三节活塞式空压机的管理复习思考题单击此处输入你的副标题，文字是您思想的提炼，为了最终演示发布的良好效果，请尽量言简意赅的阐述观点。第六章活塞式空气压缩机

piston-aircompressor压缩空气在船舶上的应用：

1.主机的启动、换向；

2.辅机的启动；

3.为气动装置提供气源；

4.为气动工具提供气源；

5.吹洗零部件和滤器。

排气量:单位时间内所排送的相当第一级吸气状态的空气体积。单位：m3/s、m3/min、m3/h第六章活塞式空气压缩机

piston-aircompressor空压机分类：按排气压力分：低压0.2～1.0MPa；中压1～10MPa；高压10～100MPa。按排气量分：微型<1m3/min；小型1～10m3/min；中型10～100m3/min；大型>100m3/min。第六章活塞式空气压缩机

piston-aircompressor第一节活塞式空压机的工作原理容积式压缩机按结构分为两大类：往复式与旋转式两级活塞式压缩机单级活塞压缩机活塞式压缩机膜片式压缩机旋转叶片式压缩机最长的使用寿命-

----低转速（1460RPM），动件少（轴承与滑片），润滑油在机件间形成保护膜，防止磨损及泄漏，使空压机能够安静有效运作；平时有按规定做例行保养的JAGUAR滑片式空压机，至今使用十万小时以上，依然完好如初，按十万小时相当于每日以十小时运作计算，可长达33年之久。因此，将滑片式空压机比喻为一部终身机器实不为过。滑(叶)片式空压机可以365天连续运转并保证60000小时以上安全运转的空气压缩机1.进气2.开始压缩3.压缩中4.排气1.转子及机壳间成为压缩空间，当转子开始转动时，空气由机体进气端进入。2.转子转动使被吸入的空气转至机壳与转子间气密范围，同时停止进气。3.转子不断转动，气密范围变小，空气被压缩。4.被压缩的空气压力升高达到额定的压力后由排气端排出进入油气分离器内。4.被压缩的空气压力升高达到额定的压力后由排气端排出进入油气分离器内。1.进气2.开始压缩3.压缩中4.排气1.凸凹转子及机壳间成为压缩空间，当转子开始转动时，空气由机体进气端进入。2.转子转动使被吸入的空气转至机壳与转子间气密范围，同时停止进气。3.转子不断转动，气密范围变小，空气被压缩。螺杆式气体压缩机是世界上最先进、紧凑型、坚实、运行平稳，噪音低，是值得信赖的气体压缩机。螺杆式压缩机气路系统：

A

进气过滤器

B

空气进气阀

C

压缩机主机

D

单向阀

E

空气/油分离器

F

最小压力阀

G

后冷却器

H

带自动疏水器的水分离器油路系统：

J

油箱

K

恒温旁通阀

L

油冷却器

M

油过滤器

N

回油阀

O

断油阀冷冻系统：

P

冷冻压缩机

Q

冷凝器

R

热交换器

S

旁通系统

T

空气出口过滤器螺杆式压缩机涡旋式压缩机

涡旋式压缩机是20世纪90年代末期开发并问世的高科技压缩机，由于结构简单、零件少、效率高、可靠性好，尤其是其低噪声、长寿命等诸方面大大优于其它型式的压缩机，已经得到压缩机行业的关注和公认。被誉为“环保型压缩机”。由于涡旋式压缩机的独特设计，使其成为当今世界最节能压缩机。涡旋式压缩机主要运动件涡卷付，只有磨合没有磨损，因而寿命更长，被誉为免维修压缩机。

由于涡旋式压缩机运行平稳、振动小、工作环境安静，又被誉为“超静压缩机”。

涡旋式压缩机零部件少，只有四个运动部件,压缩机工作腔由相运动涡卷付形成多个相互封闭的镰形工作腔，当动涡卷作平动运动时，使镰形工作腔由大变小而达到压缩和排出压缩空气的目的。活塞式空气压缩机的外形第一节活塞式空压机的工作原理一、理论工作循环（单级压缩）工作循环：4—1—2—34—1吸气过程

1—2压缩过程

2—3排气过程第一节活塞式空压机的工作原理一、理论工作循环（单级压缩）

压缩分类：绝热压缩：1—2耗功最大等温压缩：1—2''耗功最小多变压缩：1—2'耗功居中功＝P×V（PV图上的面积）加强对气缸的冷却，省功、对气缸润滑有益。二、实际工作循环（单级压缩）1.不存在假设条件2.与理论循环不同的原因：1）余隙容积Vc的影响Vc不利的影响—残存的气体在活塞回行时，发生膨胀，使实际吸气行程（容积）减小。Vc有利的好处—

（1）形成气垫，利于活塞回行；（2）避免“液击”（空气结露）；（3）避免活塞、连杆热膨胀，松动发生相撞。第一节活塞式空压机的工作原理表征Vc的参数—相对容积C、容积系数λv合适的C：低压0.07-0.12

中压0.09-0.14

高压0.11-0.16

λv＝0.65—0.901）余隙容积Vc的影响C越大或压力比越高，则λv越小。保证Vc正常的措施：余隙高度见表6-1压铅法—保证要求的气缸垫厚度2.与理论循环不同的原因：二、实际工作循环（单级压缩）第一节活塞式空压机的工作原理2）进排气阀及流道阻力的影响吸气过程压力损失使排气量减少程度，用压力系数λp表示：保证措施：合适的气阀升程及弹簧弹力、管路圆滑畅通、滤器干净。λp

（0.90-0.98）2.与理论循环不同的原因：二、实际工作循环（单级压缩）第一节活塞式空压机的工作原理3）吸气预热的影响由于压缩过程中机件吸热，所以在吸气过程中，机件放热使吸入的气体温度升高，使吸气的比容减小，造成吸气量下降。预热损失用温度系数λt来衡量（0.90-0.95）。保证措施：加强对气缸、气缸盖的冷却，防止水垢和油污的形成。2.与理论循环不同的原因：二、实际工作循环（单级压缩）第一节活塞式空压机的工作原理4）漏泄的影响内漏：排气阀（回漏）；外漏：吸气阀、活塞环、气缸垫。漏泄损失用气密系数λl来衡量（0.90-0.98）。保证措施：气阀的严密闭合，气缸与活塞、气缸与缸盖等部件的严密配合。5）气体流动惯性的影响当吸气管中的气流惯性方向与活塞吸气行程相反时，造成气缸压力较低，气体比容增大，吸气量下降。保证措施：合理的设计进气管长度，不得随意增减进气管的长度，保证滤器的清洁。2.与理论循环不同的原因：二、实际工作循环（单级压缩）第一节活塞式空压机的工作原理上述五条原因使实际与理论循环不同。4）漏泄的影响5）气体流动惯性的影响1）余隙容积Vc的影响2）进排气阀及流道阻力的影响3）吸气预热的影响2.与理论循环不同的原因：二、实际工作循环（单级压缩）第一节活塞式空压机的工作原理3.排气量和输气系数理论排气量Vt----单位时间内活塞所扫过的气缸容积。实际排气量Q：Q=Vt

λ输气系数λ

：λ＝λtλv

λ

pλl漏泄的影响余隙容积Vc的影响进排气阀及流道阻力的影响吸气预热的影响二、实际工作循环（