半成品生产工艺

半成品生产工艺第1页，课件共53页，创作于2023年2月种蛋我们生产半成品所用的种蛋是SPF蛋和非免蛋，生产冻干苗用的是SPF蛋，生产油苗用的是非免蛋。SPF是SpecificPathogenFree(无特定病原体）的缩写。SPF种蛋不含有鸡新城疫、鸡传染性法氏囊病等近20种疫病抗体，种蛋纯净，可避免外源病毒干扰，适于培养病毒，从而制成优质的SPF疫苗，产生良好的免疫效果，达到免疫防病的目的。非免疫种蛋也要求品系纯正，鸡群健康，无各种疫病。SPF疫苗和普通疫苗相比，其生产工艺过程完全一致，主要区别在于疫苗的内在质量。第2页，课件共53页，创作于2023年2月种蛋的构造种蛋由蛋壳、蛋壳膜、气室、蛋白、蛋黄、系带、胚胎七个部分组成(如图1)。

1.蛋壳2.气室3.外壳膜4、5.系带6.浓蛋白

7.稀蛋白8.卵黄膜9.胚胎10.内壳膜第3页，课件共53页，创作于2023年2月

胚胎发育图解未受精蛋

种蛋中通常被称为“卵黄”的部分，实际上只是一个细胞，即雌性生殖细胞或卵子。卵黄绝大部分是营养物质，细胞核和大部分细胞质集中为一个不规则的小白点，浮于卵黄上面和卵黄膜的下面，如图中箭头所示。这种蛋虽经孵化但不能发育，称未受精蛋。

第4页，课件共53页，创作于2023年2月受精蛋

鸡的卵子在输卵管的漏斗部与精子相遇而受精，受精卵在母体内滞留期间不断分裂，到种蛋产出体外时已分裂成一团细胞，此时为胚胎发育的囊胚期。从正面看囊胚像覆盖在卵黄表面的圆盘，中央为明区，边缘为暗区，通常称为胚盘。受精蛋第5页，课件共53页，创作于2023年2月第一天

第一胚龄照蛋第一胚龄解剖一日起了珠，鱼眼黄中浮第6页，课件共53页，创作于2023年2月第二天

二日樱桃起，心脏开始动。第二胚龄解剖

第7页，课件共53页，创作于2023年2月第三天

第三胚龄照蛋

第三胚龄解剖三日血管成，"蚊子"在黄中。第8页，课件共53页，创作于2023年2月第四天

第四胚龄照蛋第四胚龄解剖四日定了位，样似小蜘蛛第9页，课件共53页，创作于2023年2月第五天

第五胚龄照蛋第五胚龄解剖五日长软骨，黑眼显单珠第10页，课件共53页，创作于2023年2月第六天

第六胚龄照蛋

第六胚龄解剖六日胎盘动，头躯成双珠第11页，课件共53页，创作于2023年2月第七天

第七胚龄照蛋

第七胚龄解剖七日离了壳，沉人卵黄中第12页，课件共53页，创作于2023年2月第八天

第八胚龄照蛋第八胚龄解剖八日边口硬，胎在蛋内浮第13页，课件共53页，创作于2023年2月第九天

第九胚龄照蛋第九胚龄解剖九日嘴爪分，头尾来回动第14页，课件共53页，创作于2023年2月第十天

第十胚龄照蛋第十胚龄解剖

十日显毛管，血管始加粗第15页，课件共53页，创作于2023年2月第十一天

第十一胚龄照蛋

第十一胚龄解剖十一腹毛生，尿囊全合拢第16页，课件共53页，创作于2023年2月第十二天

第十二胚龄照蛋第十二胚龄解剖十二毛长齐，上下颚分明第17页，课件共53页，创作于2023年2月第十三天

第十三胚龄照蛋第十三胚龄解剖十三躯体长，气室分外明第18页，课件共53页，创作于2023年2月第十四天

第十四胚龄照蛋

第十四胚龄解剖十四蛋白少，白朝嘴里进第19页，课件共53页，创作于2023年2月第十五天

第十五胚龄照蛋

第十五胚龄解剖十五体长大，头朝大端伸第20页，课件共53页，创作于2023年2月第十六天

第十六胚龄照蛋

第十六胚龄解剖十六绒毛爽，骨长鳞爪呈第21页，课件共53页，创作于2023年2月第十七天

第十七胚龄照蛋第十七胚龄解剖十七肺发育，小端已封门第22页，课件共53页，创作于2023年2月第十八天

第十八胚龄照蛋第十八胚龄解剖十八已斜口，鸡雏待转身第23页，课件共53页，创作于2023年2月第十九天

第十九胚龄照蛋第十九胚龄解剖十九见起影，已行肺呼吸第24页，课件共53页，创作于2023年2月第二十天

第二十胚龄照蛋

第二十胚龄解剖二十闻鸣叫，陆续破壳膜第25页，课件共53页，创作于2023年2月第二十一天

二十一小鸡出，发育始结束第26页，课件共53页，创作于2023年2月种蛋的标准新鲜度：夏秋季在3日内，冬春季自7日内对种蛋新鲜度检查，可抽取种蛋打开，放入干净的玻璃平皿中，新鲜的种蛋蛋黄隆起，蛋白浓稠；不新鲜的种蛋蛋黄相对扁平，蛋白相对稀薄。种蛋内部物理性状的检查采用照蛋的方法，主要查看种蛋气室的大小、是否流动以及蛋黄蛋白的状况。新鲜的种蛋气室较小，蛋黄呈暗红色或暗黄色。蛋黄发黑、气室流动的种蛋会影响孵化率，要弃去。第27页，课件共53页，创作于2023年2月种蛋标准蛋重60±5克/枚，气室部位正常。受精率92%以上，中止率在5%以下，利用率90%以上。表面圆滑呈卵圆形，无畸形无沙壳，长轴60±2mm，短轴45±2mm。蛋壳厚度要均一，一般在0.33—0.35mm之间，过薄的蛋壳接种时易破碎，过厚、坚硬的“钢壳蛋”进行接种时难以做孔，不宜选用。第28页，课件共53页，创作于2023年2月种蛋标准种蛋必须要求保持蛋壳清洁，有光泽且无裂痕，污壳蛋不仅容易被微生物侵入蛋内，引起败坏，而且污物会堵塞气孔，影响气体交换，孵化时导致胚胎死亡，降低孵化率。种蛋保存要点：鸡蛋蛋白的凝结点为零下0.5℃，而当温度高于23.9℃时，蛋内胚胎就开始萌动，因此保存种蛋最适宜的温度为10℃至15℃，最适宜的相对湿度为70%至80%。第29页，课件共53页，创作于2023年2月接种图4五日检各种种蛋的情况A.

无精蛋B.死胚蛋C.弱精蛋D.正常蛋1.气室2.卵黄3.血圈4.血管5.胚胎6.眼睛第30页，课件共53页，创作于2023年2月鸡胚的结构第31页，课件共53页，创作于2023年2月

尿囊腔的接种接种方法孵育10～11日龄的鸡胚，经照视后，划出气室及胚胎位置，在胚胎的一侧，避开大血管，在距离气室边缘2mm处画接种点。用酒精棉球消毒接种点，以钢锥在接种点内打一小孔，针头沿孔垂直插入气室，进入尿囊，向尿囊腔内注入0.1～0.2mL病毒悬液，拔出针头,直立孵化。孵化期间，每日照蛋，观察胚胎存活情况。弃去接种后24h内死亡的鸡胚。

第32页，课件共53页，创作于2023年2月尿囊腔接种第33页，课件共53页，创作于2023年2月卵黄囊接种法接种方法选用6～8日龄鸡胚，划出气室和胚胎位置，垂直放置在固定的卵架上，用酒精棉消毒气室端，在气室的中央打一小孔，针头沿小孔垂直刺入约3cm，向卵黄囊内注入0.1～0.5mL病毒液。拔出针头,直立孵化3～7d。孵化期间，每日照蛋，观察胚胎存活情况。弃去接种后24h内死亡的鸡胚。

第34页，课件共53页，创作于2023年2月卵黄囊接种第35页，课件共53页，创作于2023年2月绒毛尿囊膜接种法接种方法选10～12日龄鸡胚，经照视后划出气室位置并消毒。在胚胎附近略近气室处，选择血管较少的部位打一孔，另外，在气室的顶端钻一小孔，用橡皮乳头紧贴气室小孔，向外吸气，使卵窗部位的绒毛尿囊膜下陷形成一小凹，造一个人工气室。用胶布封住气室顶端的小孔，用酒精棉消毒卵窗部的卵壳，用注射器注射病毒液于绒毛尿囊膜上。接种部位朝上横卧孵化，不许翻动。每日孵育检查，经48～96h，病变发育明显，鸡胚可能受感染死亡。第36页，课件共53页，创作于2023年2月绒毛尿囊膜接种第37页，课件共53页，创作于2023年2月羊膜腔接种法接种方法选12～14日龄鸡胚，经照视后划出气室位置并消毒，按绒毛尿囊膜接种法造成人工气室，撕去卵壳膜，用无菌镊子夹起绒毛尿囊膜，在无大血管处切一0.5cm小口。用灭菌镊子夹起羊膜，针头刺破羊膜进入羊膜腔，注入毒液0.1～0.2mL。横卧孵化，每日检查发育情况，24h内死亡者弃去。通常培养3～5d。第38页，课件共53页，创作于2023年2月羊膜腔接种第39页，课件共53页，创作于2023年2月接种法我们通常用的是尿囊腔接种法。由尿囊腔接种病毒时，应根据不同的病毒培养所需要的时间选择最恰当的接种胚龄，以获得最高量病毒液。同时，接种操作应严格按照规定，不应伤及胚体和血管，以免影响其发育，使病毒繁殖数度降低或停止。第40页，课件共53页，创作于2023年2月孵育和观察鸡新城疫低毒力LaSota活疫苗鸡胚接种后，每日照蛋1次，将在60小时前死亡的鸡胚弃去。60小时后，每4--8小时照蛋1次，死亡的鸡胚随时取出，直至96或120小时，不论死亡与否，全部取出，气室向上直立，至于2—8℃冷却。第41页，课件共53页，创作于2023年2月孵育和观察鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗鸡胚接种后，72小时前每日照蛋1次，弃去死胚，72小时后每4--8小时照蛋一次，将死亡的鸡胚随时取出，至96---120小时，无论死亡与否，全部取出，气室向上直立，置2—8℃冷却。第42页，课件共53页，创作于2023年2月孵育和观察鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗鸡胚接种后，72小时前每日照蛋1次，弃去死胚，72小时后每4--8小时照蛋一次，将死亡的鸡胚随时取出，至96---120小时，无论死亡与否，全部取出，气室向上直立，置2—8度冷却。第43页，课件共53页，创作于2023年2月孵育和观察鸡传染性支气管炎活疫苗鸡胚接种后，30小时前照蛋一次，弃去死胚，收取30--36小时的活胚，气室向上直立，至于2—8℃中冷却4—24小时。第44页，课件共53页，创作于2023年2月孵育和观察鸡新城疫中等毒力I系活疫苗接种24小时后，每4小时照蛋一次，直48小时，死亡的鸡胚随时取出，气室部向上，在2--8℃中冷却，接种后24小时前及48小时死亡者弃去不用。第45页，课件共53页，创作于2023年2月孵育和观察鸡新城疫等毒力I系活疫苗接种24小时后，每4小时照蛋一次，直48小时，死亡的鸡胚随时取出，气室部向上，在2--8度中冷却，接种后24小时前及48小时死亡者弃去不用。第46页，课件共53页，创作于2023年2月孵育和观察鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗接种后，将36小时前死亡的鸡胚弃去，36小时后，每隔4--8小时照蛋一次，随时取出48---168小时内死亡鸡胚，置2—8℃冷却。第47页，课件共53页，创作于2023年2月孵育和观察鸡传染性喉气管炎活疫苗接种后4--5日剔出死亡鸡胚，将活胚冷却致死。如采用尿囊腔接种，从72小时起，应注意观察鸡胚绒毛尿囊膜病变发展情况，可观察到绒毛尿囊膜有分散的病斑，当绒毛尿囊膜逐渐增厚，透光度减弱时，可先后取出鸡胚冷却。第48页，课件共53页，创作于2023年2月收获

根据不同病毒，收获不同时间内死亡或存活的鸡胚尿囊液和羊水。收获时，通常在收获前将鸡胚于4度放置6小时或过夜或-20度放置0.5--1小时，使血液凝固，以免收获时流出的细胞与尿囊液或羊水中的病毒发生凝聚，造成病毒低度下降。然后消毒气室部蛋壳，以无菌手术剥出气室部卵壳，揭去卵壳膜，剪破绒毛尿囊膜及羊膜（勿使卵黄破裂），再用灭菌吸管插入尿囊腔，吸取尿囊液和羊水，每若干个鸡胚的胚液混合为一组。收获后的胚液置于灭菌瓶中，加入适宜的抗生素，无检，留样后，结冻保存。在收获胚液的同时，应逐个检查鸡胚，如胎儿腐败、胚液混浊及有任何污染可疑者弃去不用。第49页，课件共53页，创作于2023年2月病变及质量标准鸡新城疫低毒力LaSota活疫苗胎儿病痕：在接种后72小时前后死亡的鸡胚，多为全身充血；72--120小时死亡的鸡胚，除有全身充血外，在头、胸、背、翅及趾端有出血点；在120小时以后死亡的鸡胚除有上述病痕外，或呈发育不全、卷曲成团、失水干硬等病变。每0.1ml病毒含量>108.0EID50者可用于配制疫苗。第50页，课件共53页，创作于2023年2月病变及质量标准鸡传染性支气管炎活疫苗胎儿病痕：胎儿具有失水、蜷缩、发育小等特异性病痕每0.1ml病