肿瘤免疫治疗与免疫调节剂在转移性黑色素瘤治疗中的应用

肿瘤免疫治疗与免疫调节剂在转移性黑色素瘤治疗中的应用外科治疗放疗化疗目前的肿瘤治疗方案外科治疗放疗免疫治疗化疗目前的肿瘤治疗方案癌症患者的免疫治疗策略被动免疫治疗主动免疫治疗细胞免疫效应体液免疫效应抗体疫苗免疫调节抗体细胞因子肿瘤细胞疫苗基因修饰的肿瘤细胞疫苗蛋白质疫苗肿瘤相关抗原体外冲击疫苗Rosenbergetal,NatRevCancer2008基因改造的抗肿瘤细胞Science,2006癌症患者的免疫治疗策略被动免疫治疗主动免疫治疗细胞免疫效应体液免疫效应抗体疫苗免疫调节抗体细胞因子肿瘤细胞疫苗基因修饰的肿瘤细胞疫苗蛋白质疫苗肿瘤相关抗原体外冲击疫苗治疗性

单克隆抗体a-肿瘤a-Id免疫调节性

单克隆抗体名称靶向

TAA目标疾病作用机制临床阶段Rituximab(MabThera,Rituxan)CD20滤泡型LNH,oindolenteLLC CDC,ADCC,pro-apoptosi批准Ibritumonabtiuxetan-(90Y)(Zevalin)CD20滤泡型LNH,oindolente局部RT(β-particelle)批准Gemtuzumab-ozogamicin(Mylotarg)CD33LMACD33+Apoptosi批准Alentuzumab(Campath-1H)CD52LLC-BCDC,ADCC,pro-apoptosi批准EpratuzumabCD22LNHApoptosi?研究中(III期)186Re-Epratuzumab90Y-VeltuzumabCD22LNH局部RT(β-particelle)研究中(I-II期)Tositumomab-(131I)(Bexxar)CD20LNHindolente局部RT(β-particelle)研究中(II期)Apolizumab(H1D10)HLA-DRLNHPro-apoptosi;ADCC;CDC研究中(I-II期)Lintizumab(HuM195)CD33LAM,LAPPro-apoptosi;ADCC;CDC研究中(I-II期)BL22(immunotossina)CD22HCL,LLCInibizionesintesiproteica研究中(II期)LMB2(immunotossina)CD25HCLInibizionesintesiproteica研究中(II期)Lumiliximab(IDEC-152)CD23LLCADCC,pro-apoptosi研究中(I-II期)Galiximab(IDEC-114)CD80LNHindolenteADCC,pro-apoptosi?研究中(I/II期)应用治疗性单克隆抗体在造血系统肿瘤中对抗特定的肿瘤相关抗原NameTargetTAA TargetdiseaseMechanismofactionClinicalphaseEdrecolomab(Panorex)17-1ACacolon-rettoADCC,CDC,antiproliferativodirettoApprovatoTranstuzumab(Herceptin)HER-2CamammarioADCC,CDC,antiproliferativodiretto;down-regolazioneHER-2ApprovatoPertuzumab(2C4)HER-2Camammario,ovaio,prostata,polmone,colonADCC,CDC,antiproliferativodiretto;down-regolazioneHER-2Investigazionale(FaseI/II)Bevacizumab(Avastin)VEGFCarene,colon,NSCLC,mammella,LLC,linfomiInibizioneangiogenesi,ADCC,CDCApprovatoCetuximab(IMC-C225,Erbitux)HER-2Cacolon,testa-collo,NSCLC,pancreasBloccoinG1delciclocellulare;antiproliferativo;pro-apoptotico;inibizionemeccanismiriparazionecellulareApprovatoPanitumumab(ABX-EGF,Vectibix)EGFRCacolon-rettoPro-apoptotico,bloccofosforilazionediEGFRApprovatoSibrotuzumab(BIBH-1)Sibrotuzumab(131)IFAP(Fibroblasticactivationprotein)Cacolon-rettoADCC,CDC,pro-apoptoticoInvestigazionale(FaseI/II)Matuzumab(EMD72000)HER-1CaovaioADCCInvestigazionale(FaseI/II)Bivatuzumab-Mertasina(BIWI-1)CD44v6Catesta-colloInibitoresintesiproteicaInvestigazionale(FaseI)OregovomabCA125CaovaioADCC,CDCInvestigazionale(FaseII/III)LabetuzumabCEACacolon-rettoADCC,CDCInvestigazionale(FaseI/II)h-R3NImotuzumab(188)-ReHER-1Catesta-colloglioblastomaApoptosiRTlocale(β-particelle)Investigazionale(FaseI-II)MAb806EGFRvIIINSCLC,glioblastomaPro-apoptosi,angiogenesi?InvestigazionaleMAbG250(CAIX)MAbG250(131)IProteinaG250o(CAIX)CarenaleADCC,CDC,pro-apoptoticoInvestigazionale(FaseI)TherapeuticmAbagainstdefinedTAAinsolidtumors 癌症患者的免疫治疗策略被动免疫治疗主动免疫治疗细胞免疫效应体液免疫效应抗体疫苗免疫调节抗体细胞因子肿瘤细胞疫苗基因修饰的肿瘤细胞疫苗蛋白质疫苗肿瘤相关抗原体外冲击疫苗FAK/cdc42/p130casS-SS-SFGFs/PDGF-B(>>A)半乳糖凝集素

-3CS链肌动蛋白MUPP1Thr2256PKCaERK1/2Thr2314丝切蛋白D1D2D3Ca2+-结合区ColVI高分子量黑色素瘤相关抗原

(NG2)抗独特性抗体疫苗方案763.74IgG2a抗NG2抗体-1NG2肿瘤抗原肿瘤NG2内源性抗体-3(抗NG2)抗独特性抗体疫苗免疫MK2-23IgG1抗A1抗体-2(拟NG2)MK2-23-L1MK2-23-H3抗个体基因型单克隆抗体疫苗联合小剂量IL-2或GM-CSF治疗进展期黑色素瘤II期试验接种进度表治疗周数aId2mgi.d.IL-2

(5x105

I.U./12h)0148GM-CSF(4x105

I.U./12h)或CR完全缓解,PR部分缓解,SD疾病稳定期根据AJCC分期的临床反应

临床反应患者完全反应的表现08-199903-200006-200011-200002-200108-2008PatientPatient免疫接种阳性阴性阳性阴性免疫接种MK2-23HMW-MAA抗原特异性B细胞对抗个体基因型单克隆抗体MK2-23(1/3000)

与HMW-MAA(1/125)的反应N=40N=40有效接种诱导抗-MK2-23T细胞反应:稳定期评估

(至少接种10次后)-35-155254565MEL592MEL629MEL640MEL721MEL497MEL635MEL687MEL691MEL713MEL723MEL735SFC/100000CD3+细胞免疫有反应者免疫无反应者SDSDSDSDSDPDRCRCRCRCPDM1aM1aM1aM1aN2N2N2N2N3N3N3抗-MK2-23前抗-MK2-23后存活IFN-ELISPOT试验癌症患者的免疫治疗策略被动免疫治疗主动免疫治疗细胞免疫效应体液免疫效应抗体疫苗免疫调节抗体细胞因子肿瘤细胞疫苗基因修饰的肿瘤细胞疫苗蛋白质疫苗肿瘤相关抗原体外冲击疫苗免疫调节性抗体通过单克隆抗体对宿主

进行免疫调节抗CTLA-4:

负向信号系统抑制物抗CD137:正向信号系统促进物抗CD40:正向信号系统促进物抗OX40:正向信号系统促进物抗PD-1:负向信号系统抑制物抗CTLA-4单克隆抗体IL-2B7MHCTCRCD28...............~抗原APCT细胞CTLA-4B7MHCTCRCD28~抗原B7TCRCD28CTLA-4...............抗原抗CTLA-4单克隆抗体MHCIL-2~用抗CTLA-4单克隆抗体(Ipilimumab与Tremelimumab)

在一系列肿瘤中的临床研究III期转移性黑色素瘤II期转移性黑色素瘤胰腺腺癌慢性骨髓来源白血病卵巢癌滤泡型非霍杰金氏淋巴瘤肾细胞癌乳腺癌I期输尿管上皮癌前列腺癌肺癌临床有效性摘要

对严重的进展期肿瘤阻抑CTLA-4是有效的(主动):在单独应用及与其它治疗方案（化疗，放疗，介入治疗）联合应用中均观察到这一效果阻抑CTLA-4可产生临床持续性反应

(20+月!!!)抗CTLA-4单克隆抗体的反应可能出现持续的动力学效应甚至在其进行后;阻抑关键位置可产生更强的T细胞反应，进而出现抗肿瘤效应;但这需要时间用Ipilimumab观察到的客观反应

与生存期延长Numberofdeaths/numberofpatients:87/155(Dataasofcut-offdate:June2008)MedianOS=10.6月

[95%CI:7.6–17.6]47.2%存活至少一年[95%CI:39.2–56.2] 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28存活比例1.00.80.60.40.2010mg/kgIpilimumabCensored月数mWHOBORR=5.8%

[95%CI2.7–10.7](9/155获得治疗的患者)随访中位期9.6月

(范围,0.2–24.8)mWHODCR=27.1%

[95%CI,20.3–34.8]Ipilimumab

临床效应

免疫细胞的激活起始较早可测定的临床效应出现于不同的时间节点SDPRCRPDBaseline*肿瘤体积可能包括免疫细胞的渗入及肿瘤细胞↑25%↓50%↓100%SDPRCRIpi暴露于IpilimumabT细胞活化T细胞反应

超过12周者未被标明肿瘤总体积*IpiIpiIpiIpiIpiIpiAdaptedfromHodiFS,etal.JClinOncol.2008;26(19S):3008新的标准可能对

评估免疫治疗疗效有影响WHO与RECIST在开始治疗后的不久测定化疗细胞因子的活性与细胞毒性认定新的病灶出现为病情“进展”与用药失败WHO=世界卫生组织;RECIST=实体瘤反应评估标准mWHO针对irResponse标准的变革CRPRSDPD

mWHO

所有病灶SPD指数lesionsSPD指数

或CRSPD指数

增长

标准消失

下降>50%PR或PD>25%

不得出现不得出现基于SPD的PD新的病灶新的病灶

irCRirPRirSDirPD

irResponse

所有病灶

标准

均消失

SPD指数+任何SPD指数+任何SPD指数+任何

新的病灶

新的病灶即非

新的病灶扩大

下降>50%irCR,irPR也非irPD>25%

可出现新的病灶可出现新的病灶

仅基于SPD的PD

Baseline患者至今仍存活,并继续用IPILIMUMAB治疗22+个月稳定期抗CTLA-4

在胸腔恶性肿瘤中应用研究设计随机化

ARMA:同时治疗

Ipilimumab*+

泰素/卡波铂*

ARMB:

继发后治疗泰素/卡波铂*+Ipilimumab*

ARMC:

对照组安慰剂+泰素/卡波铂**泰素175mg/mqevg1q3wx6个周期

卡波铂AUC=6g1q3wx6个周期维持阶段:Ipilimumab或安慰剂(q12w)F.U.

*Ipilimumab:10mg/kgq3wx4(诱导阶段)间皮瘤外周存在抑制免疫反应的细胞因子与Treg细胞

(DeLong,2005;Hegmans,2006)一项二线单用完全性人源化抗CTLA-4单克隆抗体治疗无法切除的恶性间皮瘤Ⅱ期临床研究癌症患者的免疫治疗策略被动免疫治疗主动免疫治疗细胞免疫效应体液免疫效应抗体疫苗免疫调节抗体细胞因子肿瘤细胞疫苗基因修饰的肿瘤细胞疫苗蛋白质疫苗肿瘤相关抗原体外冲击疫苗一项关于T1联合DTIC

加或不加IFN对DTIC联合

IFN在Ⅳ期恶性黑色素瘤患者应用的一线、随机Ⅱ期研究结果报道。

目的为确定使用剂量、观察肿瘤反应与生存率。研究资助者Sigma-tau意大利ValLysSerAspAlaAlaValAspThrSerSerGluIleThrThrLeuAspLysLysGluLysGluValGluGluAlaGluAsnAc-151015202528

N-末端

乙酰化,28个氨基酸多肽非四维结构在人类与动物种群中高度保守的序列

最初从胸腺中提炼而得，后来通过化学合成制备制成冻干粉剂，皮下注射胸腺肽-α1(Tα1).作用机制干细胞胸腺肽a1:肿瘤细胞肿瘤细胞免疫调节对肿瘤细胞的直接作用­MHCI­表达肿瘤抗原¯肿瘤细胞生长¯T细胞凋亡CD4+TCD8+T­生成T细胞­IL-2,IFN-g¯IL-4,IL-10NK细胞.目的为今后的研究确定以胸腺肽1为基础治疗方案时的使用剂量.方法:研究设计筛选随机化DTIC+IFN1DTIC+T1(3.2mg)DTIC+IFN+T1(1.6mg)DTIC+IFN

+T1(3.2mg)DTIC+IFN

+T1(6.4mg)2345.方法:研究治疗的周期Day1胸腺肽

11.6mg,3.2mgor6.4mg/日胸腺肽11.6mg,3.2mgor6.4mg/日Day8Day11Day15Day18DTIC800mg/m2IFN3MIUIFN3MIUDay18Day11初级肿瘤反应:完全+部分(每隔两个周期用RECIST标准作一次集中评估)次级安全性总体生存无恶化生存期方法:研究终点主要入选标准18岁

年龄

75岁确诊为转移性恶性黑色素细胞瘤(IV期)伴有1个无法切除的可测定的有功能的肾脏与骨髓状态评分1(ZUBROD-ECOG-WHOscale)主要排除标准之前已用胸腺肽a1治疗治疗前已化疗过出现中枢神经系统转移伴随或既往曾有黑色素瘤疾病史，及十年内发生的已治愈的皮肤癌、手术治愈的宫颈原位癌，除此以外的恶性疾病史，方法:筛选标准最佳总体疗效NCR(%)PR(%)CR+PR(%)DTIC+IFN9704(4.1)4(4.1)DTIC+T13.2mg992(2.0)10(10.1)12(12.1)DTIC+IFN+T11.6mg972(2.1)5(5.1)7(7.2)DTIC+IFN+T13.2mg973(3.1)7(7.2)10(10.3)DTIC+IFN+T16.4mg982(2.0)4(4.1)6(6.1)TotalThymosin3919(2.3)26(7.7)35(9.0)治疗组BOR分配N=可评估的患者最佳总体疗效(II)

NCR(%)PR(%)CR+PR(%)DTIC+IFN6502(3.2)2(3.2)DTIC+T13.2mg632(3.2)8(12.7)10(15.9)DTIC+IFN+T11.6mg642(3.1)5(7.8)7(10.9)DTIC+IFN+T13.2mg602(3.3)6(10.0)8(13.3)DTIC+IFN+T16.4mg652(3.1)4(6.1)6(9.2)完全使用胸腺肽2528(3.2)23(9.1)31(12.3)治疗组中排除血清LDH

患者的BOR分配N=可评估的患者PFS与

OS的患者比例(ITT)DIT1.6DIT3.2DIT6.4DT3.2TotalTDI第六个月PFS11.7%21.0%13.5%15.9%15.5%9.1%生存达12个月39.2%37.1%45.5%38.8%40.3%33.2%CONFIDENTIAL总体生存率

(ITT)CONFIDENTIAL总生存率(ITT–LDH<1.2UNL)CONFIDENTIAL无恶化生存期(ITT)CONFIDENTIAL无恶化生存期

(ITT–LDH<1.2UNL)伴有严重或不严重副反应

的患者数量DIT1.6(N=97)DIT3.2(N=97)DIT6.4(N=98)DT3.2(N=98)TotalT(N=390)DI(N=95)发生AEs患者n(%)91(94)91(94)88(90)91(93)361(93)88(93)非相关的79(81)82(85)82(84)83(85)326(84)77(81)相关的58(60)64(66)49(50)40(41)211(54)46(59)发生*SAEs患者n(%)71(73)67(69)75(76)74(75)287(74)72(76)非相关的66(68)64(66)71(72)66(67)267(68)65(68)相关的8(8)9(9)6(6)12(12)35(9)13(14)结果:1642例[DIT*6.4mg]PETCT扫描基础状态治疗6个周期后*DIT6.4=DTIC+INFα+Tα16.4mg结论胸腺肽a1在所有剂量下都有良好的耐受性两组使用胸腺肽3.2mg肿瘤反应的人数超过无效假设值(至少有9例有反应)总体生存率与无恶化生存期的数据，尤其是LDH正常者的(具有统计学显著意义),支持III期临床计划的可实施性未来最佳的III期研究中治疗方案可使用DTIC+Thymosin3.2mg联合治疗中a干扰素的作用具有争议性

致谢

SIGMA-TAU参与的研究人员(部分被招募的患者）RobertoCameriniSimo