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文档简介
传染性法氏囊病卵黄抗体效价的测定第1页,课件共13页,创作于2023年2月掌握鸡传染性法氏囊病卵黄抗体效价的测定方法实训目标第2页,课件共13页,创作于2023年2月氯化钠、琼脂粉、培养皿、打孔器、酒精灯、鸡蛋、96孔血凝板、微量移液器、烧杯、带盖瓷盘、注射器、生理盐水、蒸馏水、标准抗原等仪器设备第3页,课件共13页,创作于2023年2月方法步骤(一)1%琼脂平板制备(二)稀释卵黄(三)加样(四)反应第4页,课件共13页,创作于2023年2月(一)1%琼脂平板制备1.制板:用8~10%氯化钠溶液配制1%琼脂溶液,电炉加热使之充分溶化后,倒入直径90mm培养皿,制成厚度为2.5~3mm琼脂平板;平置,在室温下冷却凝固后打孔。第5页,课件共13页,创作于2023年2月2.打孔:在琼脂板上按7孔一组的梅花形打孔(中间1孔,周围6孔),孔径5mm,孔距2~5mm,将孔内的琼脂用8号针头斜面向上轻轻将琼脂挑出,勿伤边缘或使琼脂层脱离皿底。一般打孔两组。第6页,课件共13页,创作于2023年2月3.封底:用酒精灯轻烤平皿底部至微烫,封闭孔底部,以防侧漏。第7页,课件共13页,创作于2023年2月4.编号:在平皿底用蜡笔编号,第一组编号1~6,第二组编号7~12。第8页,课件共13页,创作于2023年2月(二)稀释卵黄先用微量移液器在96孔血凝板加生理盐水,每孔50微升,共加1~12孔;再于第一孔加50微升卵黄,倍比稀释至12孔。第9页,课件共13页,创作于2023年2月(三)加样中央孔加入传染性法氏囊病病毒标准抗原,加样量以“满而不溢”为原则。用微量移液器小心的将96孔血凝板中不同浓度卵黄液小心加至琼扩板的周边孔上,血凝板孔号与琼扩板孔号要一一对应,加样从低浓度开始加样,每加一个浓度,吸嘴尽量喷干净第10页,课件共13页,创作于2023年2月(四)反应
将琼扩板静置1~2min,加盖、倒置入湿盒中,放入37℃的温箱中24~48h。第11页,课件共13页,创作于2023年2月(五)结果判断24~48h后,观察出现白色沉淀线的卵黄稀释度,即是IBD抗体效价。第12页,课件共13页,创作于2023年2月课后作
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