动物实验概述课件

动物实验概述动物实验基本要素：

处理因素

受试对象

实验效应

（研究因素）（生物学特征改变）

（受试因素）

(受试动物)

同体处理前后对照

（施加处理因素前后）

同体不同部位对照

（对称部位施加或不施加处理）

同体交叉处理对照

（对称部位交叉处理）同体对照组间对照实例1用动物（犬）试验研究针刺“人中穴”对血压的影响的实验组设计：

问题：

1.实验三个基本要素？

2.实验组如何设置？

实例2用动物（犬）试验研究针刺“人中穴”对血压的影响的实验组设计：

不同处理水平

（针刺频率与强度）

实例2无针刺（正常）-阴性对照组针刺（非人中穴）-试验对照针刺人中穴-处理组用动物实验研究“沙棘油对汞诱导大鼠肝肾氧化损伤的影响”的实验组设计：

实例评述（实例摘自《毒理学杂志》第20卷第4期，2006）阴性对照组（生理盐水）汞处理组（皮下注射2.5mg/kg）沙棘油（灌胃5.0mg/kg）+汞处理组（皮下注射2.5mg/kg）实验效应指标：

谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）

超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）用动物实验研究“沙棘油对汞诱导大鼠肝肾氧化损伤的影响”的实验组结果：

实验设计问题分析：阴性对照组（生理盐水）汞处理组（皮下注射2.5mg/kg）沙棘油（灌胃5.0mg/kg）+汞处理组（皮下注射2.5mg/kg）实验设计问题：

①沙棘油对实验效应的单独作用？

②沙棘油对汞诱导的氧化损伤作用有无剂量影响？与汞处理组比较：肝脏GSH-Px↑与对照组比较有氧化损伤：肝脏GSH↓、

SOD↓、GSH-Px↓、MDA↑第一节

受试因素（物）一、剂量（Dose）

剂量含义1.动物接触受试物的量“外剂量”–大2.施加给动物的受试物量3.进入血液中的受试物量“内剂量”–小4.产生实验效应的受试物量

表示方法

1.mg/kg---经消化道、皮肤、注射途径2.mg/m3(ppm)---经呼吸道A(mg/m3)×22.4B(ppm)=M首过效应(Firstpasseffect)：

是指受试动物机体在受试物的接触部位对受试物的阻隔作用或生物转化作用，从而使受试物进入血液的量小于接触量。

吸收系数(Absorptioncoefficient)：

是指受试物被受试动物吸收入血的量与接触量之比。

二、受试物溶液配制

溶剂和助溶剂要求1.不与受试物发生化学反应；2.不对实验效应产生影响；3.在使用中不发生降解；4.不影响受试物的稳定性。

常用溶剂与助溶剂：

1.溶剂：水（生理盐水、蒸馏水等）植物油（玉米油、橄榄油等）2.助溶剂：吐温-80或吐温85羧甲基纤维素、月桂醇硫酸钠等受试物配制方法

灌胃量要求：

常规灌胃量

小鼠0.1ml-0.2ml/10g体重

大鼠0.5ml-1.0ml/100g体重

兔＜100ml/2kg体重

狗＜500ml/10kg体重

最大灌胃量（见表）

灌胃方式：

1.“等体积不等浓度”灌胃

2.“等浓度不等体积”灌胃灌胃给药染毒的药液配制A.等体积不等浓度药液配制

例1：按1ml/100g体重灌胃量,如何配制受试物药液？

剂量组：1000mg/kg100mg/kg10mg/kg

100mg/100g

受试物浓度：100mg/1ml10mg/1ml1mg/1ml

200g大鼠2ml2ml2ml

B.等浓度不等体积药液配制

例2：按1ml/100g体重灌胃量,如何配制受试物药液？

剂量组：1000mg/kg100mg/kg10mg/kg

100mg/100g

受试物浓度：100mg/1ml100mg/1ml100mg/1ml

200g大鼠2ml0.2ml0.02ml

(2)喂饲法

要求：

①动物需单笼喂养；

②每日需计算进食量或饮水量；

③受试物应无异味，不挥发；

④受试物应不与食物发生化学反应；

⑤受试物在饲料中含量≯5%。

缺点：

①动物笼具需要量多;

②工作量很大；

③受试物剂量很难控制在所需水平;

喂饲法染毒含药饲料配制例3：按100g体重动物每日摄食量10g计算,如何配制饲料？

剂量组：4000mg/kg400mg/kg40mg/kg

400mg/100g

饲料中

受试物含量：400mg/10g饲料40mg/10g4mg/10g

（4%）(0.4%)(0.04%)

200g大鼠20g饲料20g饲料20g饲料

三、受试物施加途径

1.经口(胃肠道)(1)灌胃法(2)喂饲法(3)吞咽胶囊法。

2.经呼吸道(1)自然吸入---“静式”与“动式”(2)气管注入

3.经皮肤--涂药

4.注射途径

---静脉、肌肉、皮下、腹腔注射等第二节

实验动物

一、实验动物分类

(一)按基因遗传学分类

1.近交系(inbredstrain)

2.封闭群(closedcolony)

3.突变系(mutantstrain)

4.杂交群(hybridstock)

(二)按携带微生物分类

1.普通动物(CV)---一级动物

2.清洁动物(CL)---二级动物

3.SPF级动物(SPF)---三级动物

4.无菌动物(GF)---四级动物(一)按基因遗传学分类

1．近交系(inbredstrain)

是指连续20代以上兄妹交配(BXS，brother-sistermating)或亲子交配(PXO，Parent-offspringmating)培育而成的动物品系。

常见的近交系动物：

①普通近交系

②重组近交系

③同源突变近交系

④同源导入近交系

近交系动物的特点：

①基因型相同，表现型一致，近交系数大于99％；

②对受试物反应一致，实验结果重复性好，可比性强；

③遗传学背景明确；

④抵抗力差，对营养及饲养管理条件要求高；

⑤不同品系具有各自明显的特性。

2．封闭群(closedcolony)

它是指一个不从外界引入新的血缘，采用非近亲交配方式进行繁殖一定代次的实验动物种群。又称远交系(outbredstock)。

常见的封闭群有两类：

(1)近交系封闭群：由近交系种群采用非同胞交配至少连续繁殖在4代以上的群体称近交系封闭群。

(2)非近交系封闭群：以非近亲交配方式在一定群体内连续随机繁殖15代以上的群体称非近交系封闭群。

封闭群动物具有以下特点：

①群体遗传特异性保持相对稳定；

②个体间具有杂合性，存在一定的差异；

③与人类群体遗传异质性相似；

④繁殖能力较强；

⑤生产成本低，生产量大，供应充足。

3．突变系(mutantstrain)

突变系(mutantstrain)是指由于遗传基因发生突变而表现出某种遗传缺陷的品系动物。

突变系动物的共同特点是：

①突变系动物因其突变多为病态；

②其生活能力较弱；

③饲养管理要求严格，繁殖保种较为困难；

④适用于某一疾病机制研究。

4．杂交群(hybridstock)

杂交群(hybridstock)又称异系杂交，它是由两个不同的近交品系杂交而繁殖的第一代动物，又称为杂交一代（简称F1杂交动物）。

杂交群动物的特点：

①它不具有育种功能；

②杂交F1代动物遗传和表现均一性好；

③生活适应能力较近交系动物强；

④具备亲代双亲的特点，应用范围大。

(二)按携带微生物分类

1.普通动物（conventionalanimals，CVA）

又称一级动物。

特点：

①不带有动物烈性传染病和人兽共患病病原体;

②对实验的反应性较差，实验结果不可靠，仅可供

教学示范及作为预备试验之用。

饲养要求：

①饲养于普通环境；

②全价饲料饲养；

③饮水水质应符合国家规定的生活饮水卫生标准；

④饲料与垫料要消毒，室内温度与湿度能人工控制；

⑤能防止蚊蝇等昆虫及野鼠进入;

⑥饲养环境应定期清洁消毒。

物种来源于清洁动物或SPF动物。

2.清洁动物（cleananimals，CLA）

又称二级动物，除不带有普通动物应排除的病原体外，还不应携带对动物危害大和对科学实验干扰大的病原体。

饲养要求：

①必须饲养于半屏障环境中或屏障环境中；

②饲料、饮水、垫料、笼具等均须消毒；

③工作人员需更换灭菌工作服、鞋帽、口罩等后工作；

④饲养环境必须能控制温度、湿度、光照强度和光照时间。

物种来源于SPF动物或无菌动物。

3.SPF动物(specificpathogenfreeanimals,SPFA)

又称三级动物，除不带有普通动物、清洁动物应排除的病原体外，还应排除潜在感染或条件性致病的病原，以及对科学实验干扰大的病原体。

饲养要求：

①必须饲养于屏障系统环境中；

②饲料、饮水、垫料、笼具等必须灭菌；

③操作人员必须严格执行操作规程；

④保种最好饲养于隔离器中。

物种来源于无菌动物或悉生动物。4.无菌动物(germfreeanimals，GFA)，

又称四级动物，指采用当前手段无法检出一切其他

生命体的动物。

悉生动物(gnotobioticanimals，GNA)

又称已知菌动物，是将已知菌植入无菌动物体内，因植入菌

类数量不同分为单菌动物、双菌动物和多菌动物。

饲养要求：

①必须饲养于隔离的无菌环境；

②饲料、饮水、笼具必须严格灭菌，确保无菌；

③饲料中的营养成分必须齐全，满足无菌动物的

需要，特别是维生素类营养物质。

物种来源于剖腹产或无菌卵的孵化。

二、实验动物选择

(一)动物种属的选择

选择原则：

1.相似性原则

2.特殊性原则

3.标准化原则

4.经济性原则相似性原则

相似性原则是指利用动物与人类生命现象（如机能、代谢、结构及疾病特点等)的相似性来选择实验动物。

例如：

烧伤研究模型动物-小型猪

因为小型猪的皮肤组织结构与人类相似，其上皮再生、皮下脂肪层、烧伤后的内分泌及代谢等也类似人体。

自发性高血压模型动物-SHR大鼠特殊性原则特殊性原则是指利用不同种系实验动物机体存在的特殊结构或某些特殊反应选择解剖、生理特点符合实验目的和要求的动物。

例如：

热源试验-家兔

呕吐试验-家犬、猴和猫

过敏性试验-豚鼠

耳毒性试验-豚鼠

观察切除甲状旁腺后的生理现象-犬标准化原则标准化实验动物主要是指遗传背景明确，具有已知菌丛和模型性状显著且生物学特征隐定的动物。

例如：

许多突变品系动物具有与人类相似的疾病或缺损。

经济性原则经济性原则是指尽量选用容易获得、价格便宜和容易饲养的动物。

动物种属：

啮齿类动物-小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠

特点：繁殖周期短，具多胎性，饲养容易，

遗传和微生物控制方便，经济。

非啮齿类动物-狗、家兔、猪。

非人灵长类动物-猴、猩猩等

(二)动物个体的选择

1.年龄（根据试验目的与试验周期选择）

2.体重

3.性别（根据受试物用途）

4.生理及健康状况

第三节

实验效应

一、基本概念

1.实验效应（experimentaleffect)

是指受试因素引起受试动物机体出现出现的生物学特征变化或改变。分类：量效应(gradedeffect)质效应(quantaleffect)

2.实验反应（experimentalresponse)

是指受试因素引起受试动物出现某种质效应的个体数在群体中所占的比率，即受试动物群体在受试因素的作用下出现某种质效应个体的频率。或受试因素引起受试动物出现某种量效应并达到一定程度的个体在群体中占有的比率。

3.剂量-效应(反应)关系

(1)剂量-效应关系（指个体或群体中的个体）

(Dose-EffectRelationship)

指受试物的剂量与实验动物个体发生量效应

强度之间的关系。

(2)剂量-反应关系（指群体）

(Dose-ResponseRelationship)

指受试物的剂量与实验动物群体中出现某种

质效应发生率之间的关系。

农药敌敌畏致大鼠死亡的试验结果剂量-效应与剂量-反应关系的区别4.剂量-效应(反应)曲线

曲线类型

①直线关系型

②抛物线型③S形曲线型a.非对称S形曲线型b.对称S形曲线5.曲线的直线转换

直线转换的意义：

(1)可以通过直线回归方程估算受试物在某一

剂量水平时的实验效应强度或反应率。

(2)可以通过比较直线的斜率评价实验效应的

特征。

如LD50(或LC50)的急性毒性特征。

直线转换的意义：

直线回归方程：

Y=a+bX

公式：Y-应变量

a-截距

b-回归系数即斜率

x-自变量

二、实验效应观察指标

1.一般性指标动物体重、食物消耗量、食物利用率、中毒症状、脏器系数等

2.生理生化指标血液学指标、血液生化指标、尿液指标等。

（特异性指标）3.病理学指标4.死亡指标5.特殊性指标(致癌率、致畸率等)

食物利用率：指动物每食入lOOg饲料所增加的体重克数（g）。用“g体重／lOOg饲料”表示。食物消耗量：

指动物每公斤（kg）体重所消耗的饲料重量（g）。用“g饲料／kg体重”表示。

脏器系数（又称脏／体比值）：

指受试动物某个脏器的湿重与其体重的比值，通常用每lOOg体重中某脏器所占的重量。用“g脏量／100g体重”表示。三、实验效应评价参数（一）急性毒性评价指标1.绝对致死剂量（absolutelethaldose，LD100）是指化学毒物或药物引起全部受试动物死亡的最低剂量。2.最小致死剂量（minimallethaldose，LD01）是指化学毒物或药物引起个别受试动物（1%）死亡的剂量。3.最大非致死剂量（maximumnon-lethaldose,LD0）是指化学毒物或药物不引起受试动物死亡的最高剂量。

4.半数致死剂量（medianlethaldose,LD50）是指化学毒物或药物引起一半受试动物死亡所需要的剂量或浓度。

优点：a.代表性好；b.灵敏度大；c.稳定好。

缺点：不能直接反应化学毒物或药物的安全剂量水平

用途：a.评价化学毒物或药物的急性毒性；b.为长期毒性试验或特殊毒性试验的剂量分组提供依据。

死亡率%剂量-反应曲线95%50%

5%

LD50

剂量(mg/kg)

表示LD50的注意事项：

动物品系；

染毒途径；

95%可信限范围。LD50±1.96S例如：异氰酸甲酯

SD大鼠经口LD50的95%可信限范围为63.4～74.6mg/kg。

长期毒性或特殊毒性试验剂量设组

试验类别剂量设组蓄积毒性试验1/20-1/5LD50范围设组亚慢性试验1/5LD50作最高剂量慢性(致癌)试验1/10LD50作最高剂量

与LD50概念类似的指标：

①半数有效剂量(或浓度)MedianEffectiveDose(concentration)--ED50(EC50)②半数中毒剂量(或浓度)MedianToxicDose(concentration)--TD50(TC50)5.急性阈剂量（acutethresholddose,Limac）指化学毒物或药物与机体一次接触（即急性毒性试验）引起受试动物中少数个体出现某种最轻微的异常改变所需要的最低剂量。亦称最小有作用剂量（minimaleffectdose）。注意：(1)必须用最敏感指标表示急性阈剂量；(2)急性阈剂量具有“相对性”“发展性”。（即具有可变性）敏感指标的选择：例如：XX药物生理指标阈剂量1200mg/kg生化指标阈剂量600mg/kg血象指标阈剂量2000mg/kg

敏感指标的阈剂量应：600mg/kg（二）慢性毒性评价指标1.慢性阈剂量（chronicthresholddose,Limch）是指化学毒物或药物长期反复多次给予受试动物引起受试动物中少数个体出现某种最轻微的异常改变所需要的最低剂量。

2.慢性最大无作用剂量（ED0）是指化学毒物或药物长期反复多次给予受试动物用现代检测方法和目前最灵敏的观察指标不能发现任何损害作用的最高剂量。亦称“未观察到作用剂量”（noobservedeffectlevel,NOEL）“未观察到损害作用剂量”（noobservedadverseeffectlevel,NOAEL）（三）特殊毒性评价指标1.致癌率（%）2.致畸指数

雌鼠LD50致畸指数=最小致畸剂量3.致突变率、微核率、显性致死率等

化学物质致畸强度分级标准

致畸强度致畸指数备注不致畸10

雌鼠LD50致畸指数

=最小致畸剂量致畸10-100强致畸100（四）其它毒性评价指标1.急性毒作用带（acutetoxiceffectzone，Zac）指化学药物的半数致死剂量（LD50）与急性阈剂量（Limac）的比值。公式：LD50Zac=Limac

评价：Zac值越小，急性毒性危险性越大。

2.慢性毒作用带（chronictoxiceffectzone，Zch）指化学药物的急性阈剂量（Limac）与慢性阈剂量（Limch）的比值。公式：LimacZch=Limch

评价：Zch值越大，慢性毒性危险性越大。

3.蓄积毒作用带

（accumulationtoxiceffectzone,Zaccu）指化学药物的半数致死剂量（LD50）与慢性阈剂量的比值（Limch）。公式：LD50Zaccu=Limch

评价：Zaccu值越大，毒物的蓄积毒性越强。

4.相对毒性（Relativetoxicity）-药物(1)治疗指数（TherapeuticIndex,TI）指药物的半数致死剂量（LD50）与半数有效治疗剂量（ED50）的比值。公式：LD50TI=ED50

评价：TI值越大，药物用于治疗越安全。

(2)安全系数（SafetyFactor）指药物的较小有害剂量（LD5或LD1）与较大有效剂量（ED95或LD99）的比值。公式：LD5SF=ED95

评价：SF值越大，药物用于治疗越安全。

反应率%

剂量-疗效反应曲线95%剂量-致死反应曲线50%

5%

ED95

SF

LD5

剂量(mg/kg)

ED50

TI

LD50

治疗范围

SF

ED0ED50ED95

LD0LD1LD5LD50LD100

剂量

LimchLimac

ZchZac

Zaccu

TI常用毒性指标与剂量的关系示意图

第四节

影响动物实验效应的因素

了解毒作用影响因素意义：

有利于在动物试验中设法控制其干扰因素，

使试验结果更准确；

有利于分析动物试验结果外推到人的安全

性。

环境因素

（影响)受试因素实验动物实验效应

（机体因素）

一、受试物因素（药物）

1.理化性质a.脂/水分配系数（K）b.溶解度c.电离度（pKa）2.纯度3.溶媒、助悬剂与赋形剂4.稀释度5.给药途径

C脂

脂/水分配系数（K）=

C水

注：C脂---药物在脂相中的浓度；

C水---药物在水相中的浓度。

常用作脂相的有机溶剂有：

正辛醇、环已烷、氯仿、乙醚

药物的电离度（pKa）

---弱酸性或弱碱性药物在介质中的电离：非离子型（CM）离子型（Ci）

注意：

◆介质pH影响药物的非离子型与离子型的比例。

◆药物的非离子型容易穿过生物膜表现出实验效应。

评价：药物电离度越小，实验效应越大。

pKa的含义：

是药物在介质中(体液)处于动态平衡时，离子型与非离子型各占50%时介质中的pH值。

公式：[Cn]

pKa

=lg+pH[Ci]

按Henderson-Hasselbach公式：有机酸药物：[Cn]

pKa

=lg+pH[Ci]有机碱药物：[Ci]

pKa

=lg+pH[Cn]

按Henderson-Hasselbach公式：有机酸药物：[Cn]

Lg=pKa-pH[Ci]有机碱药物：[Ci]

Lg=pKa-pH[Cn]

[举例]有机酸药物：[Cn]

Lg=pKa-pH[Ci]

HAH+

+A

[Cn]

[Ci]

介质pH

总结：有机酸药物在酸性介质环境中，主要呈非离子型的药物存在，它容易穿透生物膜发挥毒效应。

例如，阿司匹林（pKa=3.5），在胃内几乎完全呈非离子型药物，易被胃吸收。

药物的纯度

药物杂质来源：1.药物生产过程中（如原料不纯、工艺技术、人为因素）

混入的某种有毒有害物质；2.药物在贮存过程中因外界条件的变化引起药物本身降解，产生有毒降解产物；

预防药物杂质危害规定：

---《国际药品质量技术要求》1.药品杂质含量0.1%，应标明杂质名称与毒性大小；2.药品最大日用量2g/d，其杂质限定阈值为0.1%；3.药品最大日用量2g/d，其杂质限定阈值为0.05%；

药物溶媒、助悬剂与赋形剂

◆溶媒:水（生理盐水、蒸馏水、去离子水）植物油（玉米油、花生油等）◆助悬剂:tween-80、羟甲基纤维素、月桂醇硫酸钠等。◆赋形剂:淀粉、羟丙甲基纤维素等。

辅料的选择原则：1.本身无毒；2.不与药物起化学反应；3.不改变药物生物活性；4.在药物贮存保质期不发生降解。

药物的稀释度

药物不同稀释度时小鼠的死亡率(%)

水溶液浓度药物名称灌胃剂量（mg/kg）5%2.5%1.25%

戊巴比妥钠18090%45%10%戊烯四唑

20090%75%45%

给药途径

不同给药途径对药物毒性的影响LD50值(mg/kg)药物动物经口皮下注射腹腔注射静脉注射依米丁小鼠30-62-四环素小鼠3000-330170棒曲霉素小鼠--5

25氨基氰大鼠21084--

二、机体因素

1.种属与个体2.性别3.年龄4.生物机体状态a.生理状态b.健康状态c.营养条件(饥饿与营养不良)等5.遗传因素

种属差异毒物毒性：毒性大小不同（见附表）毒性性质不同（见附表）差异原因(遗传因素)：1.毒物代谢酶结构与功能不同；2.靶细胞靶分子受体不同；3.生理生化功能不同；4.生物膜结构不同等。

不同动物种属对药物毒性大小的影响LD50值(mg/kg)药物给药途径小鼠大鼠狗5-氟尿嘧啶po262781-异烟碱po190650-心可定po2001000-新斯的明iv0.26-20奋乃静po120318-溴苯辛po4001660-

不同动物种属对毒物毒性性质的影响毒性程度毒物毒性作用人猴狗豚鼠大小鼠反应停致畸胎++++++-氮尿苷WBC↓-+++

-奈胺致膀胱癌++++-

性别

不同性别对药物毒性的影响LD50值(mg/kg)药物给药途径动物雌性雄性雌/雄毒性比3-羟孕二酮

po大鼠29712004信他尼定po小鼠52010592硫酸镁iv小鼠1383102特而福斯po大鼠93.10.3

年龄因素

不同年龄对药物毒性大小的影响LD50值(mg/kg)药物受试动物新生年幼动物成年动物Mesylate大鼠300036(雌)51(雄)洋地黄毒甙大鼠0.176(雌)54(雄)

常用试验动物的生活年限及体重选择

成年动物体重选择范围动物生活年限(Y)时间体重急毒试验慢毒试验(WK)(g)(g)(g)小鼠1.5-281518-2515-18大鼠2-2.512150150-24050-100豚鼠6-88150200-250150-200家兔4-912-1615001500-20001200-2000狗15-2012-16-8000-150004000-6000

生物机体状态a.生理状态（怀孕期、哺乳期）b.疾病状态（肝脏、肾脏疾病等）c.饥饿与营养状况d.遗传因素（6-磷酸葡萄糖脱氢酶缺乏）

饥饿对安眠药“美索比妥”毒性的影响禁食状态小鼠经口LD50(mg/kg)不禁食354.0禁食4-6h162.0

禁食20h

66.0

三、环境因素

1.气温2.气湿3.昼夜节律4.动物饲养条件a.密闭笼与开放笼b.群居与独居c.饲养环境（噪声、照明、异臭）d.饲料5.化学物的相互作用（联合作用）

环境气温

有三种类型：1.“U”型或“V”型；2.“正相关线”型；3.“无相关线”型。可能原因：1.影响生理机能，改变吸收与排泄速率；2.影响代谢酶的活性。如：寒冷刺激，大鼠肝MOF中羟化酶，苯胺N-羟化，N-羟基苯胺生成，毒性。

毒性（死亡率）100氯丙嗪13C醋酸可的松36C27C38C5028C-6C

1010

203040温度（C）

温度对药物毒性影响示意图

昼夜节律

苯巴比妥在不同时间点对小鼠的毒性差异

给药时间给药途径剂量(mg/kg)死亡率14点ip190100%24点ip1900%

饲养条件动物饲养条件对实验效应的影响小鼠LD50值(mg/kg)药物独居/群居LD50比值

群居独居甲基苯丙胺843236.82消旋苯丙胺893654.10异丙肼1645103.11哌醋甲脂1906803.59哌苯甲醇1686805.00咖啡因62012001.94

饲料成分原因：1.饲料营养成分(1)一般毒性代谢活化毒物：低蛋白＜正常蛋白含量高蛋白＞正常蛋白含量代谢解毒毒物：（相反）(2)发癌率脂肪含量高发癌率2.饲料中混入有害有毒物质化学物的联合毒作用

药物配伍效应表现形式配伍方式治疗效应毒副效应A+B

A+CA+DA+E

A+F

A+GA+H

A+I

用动物急性毒性实验来研究

---改进寇氏法测定LD50要求：

1.

每组动物数相同，一般每组动物10只以上，

雌雄各半或雌雄分别进行实验；

2.

组数一般为5～7组；

3.

用死亡率为观察指标；

4.

各剂量组组距呈等比级数；

5.

死亡率呈正态分布:

最低剂量组死亡率＜20%；

最高剂量组死亡率＞80%。药物联合毒作用

(JointtoxicactionofDrug）一.药物联合毒作用类型1.相加作用2.协同作用3.拮抗作用4.独立作用二.联合毒作用类型评定方法1.联合毒作用系数法2.等效应线图法

一.药物联合毒作用类型1.相加作用（Additionaljointaction）概念表述：TM=TA+TB+TC

……公式：1abcLD50(M)

LD50(A)LD50(B)LD50(C)

常见于：(1)化学结构相似或同系物的药物；(2)毒作用机理相同的药物；(3)毒作用靶器官相同的药物；

2.协同作用（Synergiaticjointaction）概念表述：TM

TA+TB+TC

……公式：1abcLD50(M)

LD50(A)LD50(B)LD50(C)

常见于：(1)药物相互促进对方的吸收或减慢排泄；(2)通过影响代谢酶增加对方药物的毒性；

苯硫磷与马拉硫磷的协同作用：

毒效应水解酶

马拉硫磷水解（毒性）

抑制

苯硫磷

3.拮抗作用（Antigoniaticjointaction）概念表述：TM

TA+TB+TC

……公式：1abcLD50(M)

LD50(A)LD50(B)LD50(C)

常见于：(1)药物相互阻止对方的吸收或加快排泄；(2)通过影响代谢酶加快对方药物的解毒；(3)通过抑制代谢酶来拮抗对方药物毒性。

新斯的明与东蒗菪碱的拮抗作用

M胆碱受体生物学效应：谵妄、激动不安惊厥等。

竞争东蒗菪碱乙酰胆碱乙酸胆碱

(抑制)新斯的明乙酰胆碱脂酶

有机磷农药与1,2,4-三溴苯的拮抗作用：

水解酶有机磷农药水解，加速解毒

诱导

1,2,4-三溴苯

4.独立作用（Independentjointaction）

是指各药物毒作用的靶器官不同、毒作用机理不同、毒效应表现形式不同，而表现出各自独特的毒效应。例如：反应停-----胚胎毒性