微生物的培养及应用

微生物的培养及应用高考说明与课标中的要求高考说明课程标准微生物的培养与分离Ⅱ某种微生物数量的测定Ⅱ培养基对微生物的选择作用Ⅲ利用微生物进行发酵来生产特定的产物Ⅰ发酵过程中亚硝酸盐含量的测定---微生物学的奠基人

——巴斯德发酵与微生物的关系发酵产生微生物？

微生物引起发酵？巴斯德曲颈瓶实验证明：“一切发酵过程都是微生物作用的结果。”

发酵与人类的关系?

利用微生物发酵来生产各种有用产品微生物细胞机器的工作模式Workingpatternofcell-machineinIndustrialFermentation一、微生物的主要类群细菌（原核生物）放线菌（原核生物）真菌：酵母菌、霉菌（真核生物）病毒（无细胞结构）其他二、微生物的分离和培养细菌生长所需营养物质：

碳源、氮源、生长因子、水、无机盐培养基：根据微生物的生长需求和生产需要而配制的营养基质；根据其物理状态，可分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基，其状态由培养基中凝固剂的比例决定，常用的凝固剂是琼脂。培养基组分提供的主要营养物质牛肉膏5g蛋白胨10gNaCl5gH2O定容至1000ml碳源、氮源、生长因子牛肉膏和蛋白胨来源于动物原料，含有糖、维生素和有机物等营养物质。氮源、碳源、生长因子无机盐氢元素、氧元素分离纯化微生物的方法

平板划线法、稀释涂布法

（选择培养基的利用）无菌技术消毒、灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌在“分离以尿素为氮源的微生物”的实验中，若菌落周围会出现红色的环带，则说明：产生该菌落的菌株可利用

作为氮源，并向胞外分泌脲酶，使培养基中的

分解产生氨，导致培养基中的

（酸碱指示剂）显出红色。尿素尿素苯酚三、微生物的计数方法稀释涂布计数法用血球计数板计数细菌的繁殖

——方式：二分裂

——结果：形成菌落2020÷0.1(20÷0.1)×10(20÷0.1)×102(20÷0.1)×103(20÷0.1)×104(20÷0.1)×105网格区计数室（容积：0.1mm3）设五个中方格中总菌数为A，计算10克土样中的总菌数：取样计数A/5×25×l0×l000×103×l0四、微生物的利用传统发酵工业：酵母菌醋酸杆菌乳酸菌霉菌腐乳酒酸奶醋泡菜泡菜中亚硝酸盐的测定：比色法原理：（1）在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮反应（2）重氮反应形成的产物与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。偶联将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。(也可使用分光光度计定量测定)分光光度计0ml0.5ml1ml3ml5ml0μg2.5μg5μg15μg25μg亚硝酸钠标准液四、微生物的利用现代生物技术：细菌（如大肠杆菌）常被用作基因工程的受体细胞转基因植物技术中，土壤农杆菌可作为运载体生态工程中，利用微生物分解作用原理，建立沼气池动物细胞融合技术中，灭活的病毒起到诱导融合的作用练习（海淀区高三年级第一学期期中练习2009.11）44、某中学杨老师自制大蒜提取液，希望这种简便、经济的提取液能够高效的杀灭餐具上的细菌，杨老师完成了下面的探究实验：（1）制作提取液：杨老师将大蒜榨汁后制成提取液，具体做法如下表所示。请根据表中数据，在表中的括号内填出1#提取液应加入的冷开水量：大蒜提取液编号1#2#大蒜（g）350350冷开水（mL）（）880无色食醋（mL）/20900（2）使用方法：将餐具浸泡在提取液中10min后取出冲洗。（3）样品抽取：将经过

处理的滤纸贴在餐具表面1min，然后再将滤纸放到50ml无菌水中，充分振荡后制成原液。再取1ml原液加入

ml无菌水中摇匀制成10倍稀释液。灭菌9（4）分离及培养：用

分离法分离细菌。分别取1ml原液和10倍稀释液，分别加到伊红-美蓝培养基中，用灭菌、消毒后的

（用具），将原液和稀释液均匀涂布到整个平板上。每个浓度各做三个培养皿，其目的是

。本实验另设1ml无菌水涂布在未接种的培养皿为空白对照，原因是排除

。最后在37℃培养48h。（5）观察记录：设计1#提取液实验组的观察记录表：稀释涂布（分离）涂布器进行重复实验，减小实验误差灭菌不彻底对实验的影响只答“涂布”不得分原液、稀释液1分；平均值1分

（6）结果分析：统计数据，得到消毒前后的菌落总数变化（单位cfu/cm2，每平方厘米样品中含有的细菌群落总数）根据消毒前后的数据知：

。2#提取液效果高于1#，分析可能的原因：

。请你给杨老师提出需要进一步研究的问题：

。总份数＜11-1010-102102-10