细菌检验技术-细菌的形态学检验技术（微生物检验课件）

细菌形态学检查

一、实验室规则及注意事项不得在实验工作区内吃、喝以及装卸隐形眼镜等。实验用的冰箱中不得储存饮料、食物。在实验操作时请穿好实验防护衣及其它合适的防护服。实验室中不宜穿凉鞋、露趾鞋。操作感染性、有毒物质或动物时，必须戴手套。不宜将实验衣、手套或其它个人防护装备穿着到实验室以外的场所。实验工作台应每日清理，若有污染发生应立即进行消毒；所有设备在使用后均必须及时清理和处理，以保持无污染状态。所有污染物－玻璃器皿、动物笼、实验装置等，必须先经过消毒处理(如：高压蒸气灭菌或化学杀菌处理)，再行清洗或重复使用。废弃物需经适当之废弃物处理流程处置。在接触传染性物质、化学物质和动物后脱掉手套，切记洗手。严格无菌操作，树立良好无菌观念。在遇到不能处理的问题时，请立即与本实验室人员联系以便及时采取相应的处理或消毒措施。

显微镜的使用

微生物的基本特点：小！

决定了显微技术是进行微生物研究的另一项重要技术，因为绝大多数微生物的个体形态及其内部结构只能通过显微镜才能进行观察和研究。1.普通光学显微镜用油镜放大1000倍，一般细菌均能清楚看到。2.暗视野显微镜用于检查不染色的活细菌和螺旋体的形态及运动观察。3.相差显微镜4.荧光显微镜5.电子显微镜

细菌特殊染色负染色法细菌的基本形态和特殊结

构观察

细菌基本形态－球菌细菌基本形态－杆菌细菌基本形态－弧菌细菌特殊结构－芽胞细菌特殊结构－荚膜细菌特殊结构－鞭毛一、细菌染色标本的检查细菌标本经染色后，除能清楚看到细菌的形态、大小、排列方式外，还可根据染色反应将细菌进行分类。（一）染色方法的种类1、单染法:采用一种染料染色2、复染法（鉴别染色）:采用两种或两种以上的不同染料进行先后染色，使不同种类的细菌、同种细菌的不同结构，分别染上不同的颜色，以便鉴别细菌。（二）常用染料:苯环上带有色基和助色基，色基为颜色，助色基解离后与被染物结合。1.碱性染料：美蓝、结晶紫、碱性复红。2.酸性染料：伊红、酸性复红、刚果红。3.中性染料：碱性染料和酸性染料的复合物，伊红美蓝、伊红天青。（三）涂片制备涂片：干燥：固定：通常用火焰加热固定，将已干燥的涂片在火焰中迅速通过3次，以手背皮肤接触玻片不烫为佳。涂片干燥固定染色水洗、吸干镜检制备涂片标本→染色(一)单染色法只用一种染料将细菌染成一种颜色，只能观察细菌的形态、排列、大小。1.染液：吕氏美蓝液或稀释石炭酸复红液。2.方法：细菌涂片干燥固定，滴加染液染色1min，水洗，吸干，镜检。3.结果：菌体呈蓝色或红色。（二）革兰染色最经典、最常用的染色方法。通过革兰染色将所有细菌分为G+菌和G-菌两大类。革兰阴性菌（红色）革兰阳性菌（紫色）（三）抗酸染色法

抗酸染色结果（×1000）：红色为抗酸杆菌，蓝色为非抗酸杆菌抗酸染色用于区别抗酸菌与非抗酸菌（四）其他染色法

1.特殊结构染色法（1）荚膜染色法荚膜染色结果，×1000（2）鞭毛染色法鞭毛染色结果，×1000（3）芽胞染色法芽孢染色结果，×1000（4）异染颗粒染色法

异染颗粒亚甲蓝染色结果：白喉棒状杆菌，×10002.负染色法墨汁荚膜染色（脑脊液中的