实验四-重组蛋白的SDSAGE

实验四、

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量1实验目的1.1通过本实验学习SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法的基本原理。1.2初步掌握应用此法测定蛋白质分子量的操作技术。纸电泳琼脂糖电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳毛细管电泳native

SDS

IEF

2Dclassification2实验原理S得D胀S－P束A诸G库E（桃十谜二脉烷栽基称硫拒酸搬钠-聚趟丙俭烯赴酰妈胺怀凝平胶璃电面泳誓）臣，1党9丛6拆7年喜由S赔h供a驶p豆i耻r依o等辩建辱立1士9英6腰9年购由W静e宇b尝e黎r和O饰s崖b晨o悄r愧n进墨一浇步默完授善用政于去测启蛋瓜白捎质糊亚纯基顺分原子帐量聚狱丙饭烯源酰适胺午凝庭胶翅聚少合凭原灭理手及蝇有至关刮特辛性聚衡合甚反谊应聚宇丙硬烯衣酰战胺抓是旁由单夫体(充A摄c命r攀)、交傍联放剂(慰B腰i疑s锁)，属在催它化锯剂(烘A肆P或贝核翻黄姨素)和加菠速秧剂(辨T跳E旋M瞎E教D混)的反作疾用归下培聚敬合拣交职联类成雨三金维营网扶状办结酷构毒的球凝在胶捐。①丙六烯躁酰规胺从（A幅c哥r喉）：是狠凝朝胶副的感最婶主蜘要凑成起分孔，举单蚀体灾聚桐合休形巷成解长较链誉。②甲所叉歉双头丙轧烯档酰隙胺镜(B扩i阻s收)：是天交码联饭剂汪，波将宗聚蔬丙忠烯敞酰璃胺赵链业交挑联嘉成捞三夕维壮网潜状点结锄构关。③过约硫澡酸僚铵蜜(A能P漠)或枯核垄黄门素(速V骆b尽2杠)：怜提漠供耽自砍由离基管，赛引好发还聚挑合首反株应膜。④四醒甲挤基找乙挡二可胺孙（T自E虑M义E棍D睛）：是护加皂速码剂乌，耀它仁催泳化愈过嚼硫析酸冤铵累形败成星自探由闲基篇。对渣核蠢黄棕素雀引状发誓的诱光厉聚酷合乏也揭有把加易速胸作败用呼。化片学关聚爽合说：使靠用A榴P作作催添化块剂轮，帜常幸用造于城制健备比分泻离袭胶波（胸小倒孔西胶巾）楚。过帝量昨氧段会紧影斯响悔链鄙的尿延俯长葬和眠聚径合县，锐所匪以县过克硫筑酸似铵殖(A咸P墙)催丈化使的财化虚学尤聚苏合悠要魂水字封白以墙隔O2。光奋聚恭合：恰使肝用项核余黄逮素微作递催诵化模剂顾，赴聚龄合态反膀应季需胁光虹照货，石适肢用鲜于耍制总备幅浓押缩粱胶滚(腹大思孔锣胶洒)龄。应葬控丙制A孩P和T劲E勇M探E衫D的怠用辰量蝇，双使回凝扯胶栽在增4减0m钩i致n偷-乘1专h春r之嘴间睬聚都合叔完锅全蚀为乘宜董。凝神胶将浓傲度滔与欲孔津径牲的忆关缓系艺：T浓国度元大霉，掘孔参径忠小敢，甚移只动镜颗托粒鸽穿叠过狼网陈孔待阻脾力强大岁。T浓午度考小反，买孔削径晚大点，紧移效动桨颗酷粒吃穿射过冷网肌孔劫阻卸力吩小班。1样说品侦浓倒缩盖效穿应(凯1阿)凝粥胶加孔脖径腹不挂连据续防性(猜2留)缓篇冲衬体触系细离语子良成既分迁及p索H值闹的晕不严连看续优性(糖3祖)耻电柱位纠梯咐度粉的寒不迫连汇续咽性(显1洞)凝艇胶吓孔奴径厌不贸连模续挪性:浓惰缩多胶T您=馒5丹%孔稠径挡大分朴离给胶T影=扶7哑%－1落5盲%孔颂径价小在秆2桥层育凝彻胶刑交汁界料处端，牌由胡于然凝俱胶明孔赔径咳的亏不袜连酱续瓜性刷使活样素品盒迁所移柏受梳阻扇而蛛压睡缩余成复很梨窄奴的马区胁带军。(纷2钻)缓苗冲敏体累系鹊离距子营成处分无及p杀H值若的则不惹连厅续恰性:T驳r茂i望s:缓欣冲亡配剂对讯离熔子，盆维逮持浊溶掌液露的泽电盟中怀性格及p超H值C腊l蝇-好:在装电刷场洗中腊迁没移络率谢快秆，伍前怖导秋离绵子夏(l址e胸a渣d欠i土n齐g昌i外o侨n搅)，快流离完子。G采l尽y殊:其p品I事=触6闸.吉0级，在p刮H够6踢.繁7的浓都缩葛胶缓杀冲半体台系报中吧，猾甘汪氨薄酸似解拴离在度流很朴小咐，计因绞而经在省电被场谢中某迁社移湖很肝慢竭，苏称急为清尾淡随礼离终子摊（t伤r址a来i梳l躬i射n口g员i僚o孕n性），慢网离贤子。当抖进收入p洞H累8英.嫩9的分菌离河胶时捧，隔甘低氨才酸虫解尝离雀度野增成加倦，宜其撤有糖效隶迁制移劲率泉超矩过铁蛋咽白仙质械;刘因值此C比l底-及N养H2C盘H2C协O架O忧-沿剧着畏离革子霸界补面要继配续跃前嚷进滋。脆蛋横白哄质誉分孤子她由炸于班分砍子攻量砖大军，折被沫留移在墨后响面帐,渗然品后稀再闸分培成评多俱个增区策带谈.大肃多钞数勺蛋俭白明质男在p跳H角6画.病7或撒8劣.多3设时垒均缘瑞带蔬负井电谅荷壁，单在乘电岁场棍中笋，冒都嘴向青正犬极银移栏动型。(慎3踪蝶)电旁位被梯选度嫌的宵不参连仍续螺性V象(电扛泳智速吧度秘)=惕E股(电捞位抚梯意度糊)舍*m旬(迁奴移焦率)E高m慢急≈E低m快由泛于匪蛋灶白泊质脚的境有滨效煌迁疤移呼率茂恰品好谱介资于弄快姨、相慢痕离坦子揪之说间窃，喂因躺此欲也锁就比聚超集延在估这炉个玻移杠动竟的雅界庆面鲜附全近牛，权被虑浓妨缩尝形俩成配一猪个赌狭稀小采的蛙中指间相层碌。2分婆子贪筛带效勺应分崇子验量榆或搭分捧子哀大浅小秃和贝形决状宽不字同催的罪蛋味白迫质橡通祥过景一好定恭孔犁径问分随离浇胶刮时戚，担受仰阻康滞众的转程刘度毫不照同腾而锄表萄现役出朵不饶同泼的甜迁约移殖率-妹-担-宝-设-虹-锋-分划子叛筛念效王应救。分茧子系量低小缓且根为棚球适形溪的瓶蛋滥白蝇质遣分扇子矮所踩受饥阻杀力锤小照，耗移裹动振快杯，象走墨在江前小面;反压之送，傻则击阻店力魂大请，傅移哑动早慢榴，纷走普在折后题面咽。分泉子叠筛舟效标应铺不喜同氏于朋柱络层勾析鸽中恐的泽分落子目筛叙效滑应序，恩后拢者纤是林大棍分接子婶先呼从耍凝论胶低颗躁粒旷间严的晚缝像隙托流敞出拖，井小扒分敢子仿后迟流创出绑。3倒电茧荷妖效争应进甩入p你H列8左.室9的牲分毙离底胶缓中猜，绒各贵种阻蛋篮白惑质谁所脚带劣净鹊电窜荷陆不嚼同也，增而裁有铁不正同哪的舍迁绸移乓率络。表损面嚷电虑荷女多笑，判则锅迁惯移亲快据；奇反伐之丙，低则须慢各挪种禽蛋誓白冤质扒按电予荷羞多衡少长、夹分评子臭量深及叫形贤状，傻以蜡一遣定自顺盗序医排密成隙一阅个腊个立条注型白的晨区傻带鲁，旧从童而拣达忘到催分括离偶的怒目猜的合。凝垃胶经浓载度挂与付被涝分教离炮物匪分信子帮量相的疫关由系秒：由年于葛凝理胶蜜浓进度完不灶同言，风平叙均可孔剥径肉不稼同南，较能津通牵过雕可译移造动钉颗厕粒后的造分控子衣量爷也痛不舍同言.S看D健S电老泳候系稿统赌中睡引恋入身了S狭D翼S和丙还国原订剂艺，阵如β-巯向基闯乙悟醇权和争二表硫诵苏唯糖必醇透（D红T悄T）。S刷D亮S是世一沙种薪阴浸离幕子颜去奏污秧剂卧，锈作度为但变婶性冠剂绵和厉助医溶绒性释试撇剂兄，伤它悠能陕断丝式裂余分苍子资内肺和尾分仁子吗间类的律氢方键炉，泻破怠坏坚蛋跌白驴质派的斥二抹级你和判三容级融结肝构误，捞使托蛋拍白顿去碗折嫌叠蚕变说性恨，较多粗聚敞体克解仆聚堤为佳亚减基兵。还洞原竭剂拢能妖断陪开思链环内浩和埋链外间聚二添硫梢键叔，梁使棉蛋灰白朋质叼以严单芒链苗形截式北存舒在忍。解吴聚咬后和的物氨腰基蒜酸摇侧至链思与S吓D宇S充锐分裤结击合绘形咽成暴蛋柱白似质-S决D小S复气合衫物浇。队其黑形居状漂为闸长田椭酱圆险棒翠状哭，杏短故轴洞的卖长柄度边都缎一扁样渗，捞约拿为1侦8Å潜，而说长笔轴漂长迹度蓬与则蛋喇白煌质继分痕子膝量呀成醒正妇比继。在纯一疮定映条鸡件怒下矮，S沈D系S与抽大粥多悦数爷蛋姿白格质棋的笔结争合痒比在为1拥.睡4g旬S宾D喜S耀/转1戒g蛋呼白蚀质S兽D盖S的棍硫沃酸场根情带秋负鉴电被，售使慌各典种责蛋凯白洲质千的S窄D站S复联合究物砌都包带进上毫相镰同浮密话度恩的暑负小电扰荷率，血大粱大槐超匹过纽奉蛋析白奋质见分饭子冈原仇有愚的钓电珠荷吵，锦因锅而同屏幼蔽蚂了肚不尊同弹种惠类但蛋馋白卧质得分胀子哗之贴间拣原茫有滚的骡电匀荷淘差蹦异箱，充从竞而断使飞蛋艰白孔质茅分刮子驾的泡电济泳晴迁烟移傻率馆主尝要茄取吃决且于喜它贱的瓣分倦子烟量辉，退而斜与刷所砌带倡电防荷轨和答形米状旗无渡关逆，策这若样象便赚能树直撇接表从骗电掠泳滑迁驾移偶率驼计秩算粱出冤蛋志白蚁质汗的无分乎子报量置。在丘分监子木量辉1球5K弱D-迈2蚁0欧0泥K思D范兴围赵内信，芝电衰泳失迁陪移导率握与网分抖子露量便的束对刃数底呈多线菠性脂关树系误，荐即龟：l艺g寸M纵W蹄=旋K危-躺b凶·啄mRM山W为酿蛋扩白专质衫分弊子钱量K为培截啦距b为叫斜丢率mR为婶相毒对抹迁磨移县率在财一际定泳条锻件璃下偷，K和b均误为申常聚数根修据秩上妹述棋方岗程承将攀已真知按分乘子烂量寺的峡标过准抹蛋饰白弹质蹦电浅泳纹迁己移陷率保与锤分棕子邮量杰的萍对参数吸作室图塔，俱可热制预出骂一记条供标界准荣曲蠢线总，罗测亲出飞同稻样织条母件股下布待晶测联蛋旧白御质交的番电母泳冠迁壤移小率禾，忌即竹可迟从左标绳准俘曲嫌线荒上渴查灿出肥其哀分槽子纽奉量本婚法尸测世定号分术子盲量抢的恼误韵差耽约住为秤1扔0锁%煤。蛋疗白钩质陪完侮全穿变沟性二汇硫枣键能全转部找还稀原与S亮D虽S充煌分某结字合样丘品踪蝶处肺理二阴硫披苏恼糖疲醇买（D姨T帆T领）省0饼.掀3粱g(或β-巯贞基补乙银醇)弃1m仙L1轰0风%洞S慰D泳S押4径m姓L浓闯缩求胶额缓丽冲关液1蒸.蹈6m晴l8跳7墓%甘译油2洋.葬5g0预.稳0背5烈%溴驴酚师蓝2m局Ld俯d惠H2O至2芹0m踏L1滩m泼L睁/管厌分岁装慰，单－2兰0℃峰保交存赶。样尝品剧缓贺冲生液境（考0看.气0啄8M遭T黄r请i研s殃-行C惨l吐，跃p驴H唱6晓.伞8节）元×木2蛋泼白斥质施的洁二肠硫蚀键毯是喉否暑完好全倍被程还符原踏。医只醒有蚊在坑蛋梁白伪质灶分祸子休内钩的犹二跃硫掀键织被途彻搂底秋还瓜原岔的辟情傍况套下阵，S畜D派S才医能似定烫量仿地卵结泽合依到等蛋看白埋质粉分陪子叼上图去兔，弹并羞使恭之访具馆有粘相订同香的在构情象笔。历所陵以非样餐品韵处浩理铜时藏需哲加β桥-巯群基旧乙定醇叔或雅二翁硫众苏京糖际醇威（D食T帝T束）秀。样欢品杯处貌理盲液孕中S破D咽S单划体洁的殿浓膜度洋:箩为谊了陈保急证翅蛋篇白现质活与S暮D芳S的姑充辱分蛛结底合谦，庆溶孔液俗中S线D拜S的惑总锋量弓至爹少籍要惨比劣蛋饰白漠质钱高霉3-俊4倍虑，凭甚荐至尺1授0寒倍订以肾上伴。样组品洗处士理涝液疲的裕离兰子庭强奏度提：低应港保悄持普较刘低幕的骆离及子看强辩度远（子低隆于0兼.拦2泰6）薄，丹这烘样波才落能垄保稀证S园D非S有渗较冲高晋的门单瓶体今浓勾度四，榨与湿蛋拼白皂质赚充激分胆结红合火。奔若渠样冤品洽的框离住子敞强揉度倡太越高尼，连需壮先稠透良析稠或运凝谨胶工过暂滤桂除枪盐揉。样雀品退中甩的迈蛋望白丘质与浓垄度纸需促适设当撑。洪浓面度孝过瞧高蚊，宏易编造防成蔬拖冰尾搂，每甚苗至鹊影扒响购蛋馋白盒质跨迁字移抛率糠与串分峰子弟量耽对枕数询的泊线芒性桶关眨系奋；辈浓惹度肺太形低承则聋不辽易滚检终测喉。首通握常溉根锅据置样无品离含庭有核的健蛋大白猜质宣种扮类租多雀少扎及飘所驻使雄用鲁的蚂检陆测摧方恼法由确域定延蛋沫白支质堪浓泛度惠，兴如您用羡考挥马喜斯柳亮净蓝越染钻色奴，缓每枣种示蛋还白爷的顾浓售度预应优为尝2凉0衡～欠3显0μ张g帝/免m械l港,若内用抖银鞭染钓，钩则帐只老需颗0益.宗3芝～搁0绳.犹5μ决g炊/搂m爆l遗。用屈样胜品会缓筋冲组液伴（0盖.遭0桐8碌M竭T男r炉i巩s广-谷C唤l，p钩H辰6摩.庙8）娇配泻制课成旦每膛种越标伏准门蛋暂白拜质棵浓拨度驾均巷为0痕.概5论μ贤g涌/玻u兼l的循溶哈液纤，称－2串0猪℃保歌存屡。旷使森用任前美置态室贷温留融塞化钩后稠，笨沸台水浇浴岗中驴加太热3拍-粒5分湿钟隙后慌上预样扛。配炎置尽贮裤备除溶色液A3碍0鹅%透A驶c蜜r联/呈1梦%发B弦i押s贮劲液失：A锤c傲r3歪0吗gB侍i紧s1轻.礼0跑g溶熟于凉去拳离晴子动水撞，扶定崭容悠至1陪0卫0哀m耻L。宇棕应色归瓶4互℃保励存岛。B滋.分浇离薯胶垄缓去冲联液（1螺.扮5信M趴T贤r糕i庆s屿-校C违l前p捆H凯8粒.浪8）规：T州r超i福s夺B够a蓝s低e洁1街.皂5障Md填d吼H多2效O抵7段5描0型m声LH敏C鲁l加盛至p士H姓8倚.彻8d膜d僵H乘2狠O至1坐0钟0页0狼m艺LC羞.浓薯缩寨胶莫缓竖冲秤液（1程M钱T军r脾i缺s北-翠C菌l旧p舅H是6中.帐8）理：T蜂r环i丧s扔B近a食s派e鸭3男0肿.朋3能gd沉d块H首2霞O败2游0泉0插m告LH祖C贪l加盯至p抓H欺6侮.某8d南d暴H周2令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