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文档简介
实验三寄生虫学粪便检查法三第1页,课件共17页,创作于2023年2月本次实验的意义:学习虫卵计数法的操作技术,对于我们判定宿主感染寄生虫病的强度,或者检验驱虫药使用后的效果如何,都有着重要的参考价值。第2页,课件共17页,创作于2023年2月1、寄生虫排卵有一定的规律性,因此,宿主所排出的粪便中虫卵的含量就会有所很大差异,而且虫卵在同一个粪样中,分布也是不均匀的;2、粪便的浓稠程度的不同,虫卵的含量也会不同。如果要想获得较为准确的数据,不仅要克服主观上的不足外,还要将被检宿主在24小时内所排出的粪便全部收集起来,经充分混合均匀后,称量好总量,按一定的比例来称取粪样,通过换算后,得出的结果才是较为准确的数据。第3页,课件共17页,创作于2023年2月实验内容:
1、虫卵计数法:(只适用于线虫卵和球虫卵囊)(1)简易计数法:(2)斯陶尔法;(3)麦克马斯特计数法。2、线虫幼虫检查法:(1)线虫幼虫的培养方法;(2)温水引诱法;(3)毛蚴孵化法:第4页,课件共17页,创作于2023年2月四、操作方法
1、虫卵计数法:(1)、简易计数法:取粪样(1g)_加清水(10-15倍)_搅拌均匀_过滤_静置(30-40分钟)_倒去上清液_再加饱和盐水_混匀_倒入青霉素瓶_用吸管加满并使之凸出瓶口_加上盖玻片_静置(20-30分钟)_垂直取下盖玻片_镜检_并盖上另一块盖玻片(一般要检三片以上)。第5页,课件共17页,创作于2023年2月用吸管将粪液加满并使之凸出瓶口第6页,课件共17页,创作于2023年2月(2)、麦克马斯特计数法;麦克马斯特计数板的规格:它由两块玻片所组成,其间隔距离为1.5mm,上面的盖玻片上一般有1-2个1平方厘米的方格,每个计数室的体积为o.15立方厘米,容量为o.15ml。第7页,课件共17页,创作于2023年2月1.5mm1.5mm麦克马斯特计数板第8页,课件共17页,创作于2023年2月原理:由于计数室内充满了用漂浮液制成的粪液,因此,在计数室内体积小、比重轻的虫卵漂浮在上面,而粪渣则沉于下面,当视野感觉模糊时往往所看到的是该室的底部沉渣,当清晰见到上面的线条时,才能找到虫卵,由于有线条的规范,有效地防止了漏检或重检。第9页,课件共17页,创作于2023年2月麦克马斯特操作方法:取样(2g)_加饱和盐水(58ml)_充分混匀_过滤_混匀后立即用吸管注入计数室内_静置(1-2分钟)_镜检。计算公式:每克粪便中的虫卵数=全部计数室的虫卵总数/计数室的个数×200第10页,课件共17页,创作于2023年2月2、线虫幼虫的检查法:方法:在平皿中垫上一层吸水纸--将含有虫卵的粪便(混匀)--放入平皿中(如粪便太干燥时洒适量的水,如太湿时应洒适量的炭末)--塑成半球状(压平并略高出平皿口)--放入恒温箱内(25-30℃,夏天可放在室内,根据情况可适当洒点水,以保持吸水纸的潮湿度)--经过7-10天的时间--就会发育成第三期幼虫。第11页,课件共17页,创作于2023年2月观察:线虫的种类很多而它们排出的虫卵,在形态、结构和大小上极为相似,因此,以虫卵来鉴别线虫的种类是较困难的,只有通过培养出第三期幼虫(即具有感染力的幼虫),才能根据幼虫的形态结构来进行鉴定。
第12页,课件共17页,创作于2023年2月(2)、温水引诱法:
A、贝尔曼法:该方法检出率高,适用于检查各种线虫的幼虫,包括土壤、饲料和器官内的幼虫检查。贝尔曼分离器装制:用一个直径为10-15cm的漏斗,下接一条10-15cm长的胶管,再接一个沉淀管,并准备一个止水夹和铜滤筛。
第13页,课件共17页,创作于2023年2月试管胶管漏斗滤筛第14页,课件共17页,创作于2023年2月操作方法:
取培养好的粪样(10-20g)_用两层纱布包扎好_置于漏斗中的铜筛中_沿漏斗边缘加入37-40℃的温水(以淹盖粪样为佳)_静置(1-2小时)_夹好止水夹_取下沉淀管_吸去上清液_取沉渣镜检。如果没有沉淀管时,在加温水之前应夹好止水夹,静置(1-2小时)后,收集下面一部分水,进行离心后取沉渣镜检。
第15页,课件共17页,创作于2023年2月B、平皿幼虫分离法:取培养好的粪样1-2g_放入平皿中_加40℃的温水(以浸没粪便为宜)_静置(5-10′)_去粪便_镜检平皿中的液体。C、直接检查法:
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