检验科糖化血清蛋白NBT法标准操作规程（GSP）

PAGE6-XX生物技术有限公司技术部标准操作程序StandardOperatingProcedures版本：V1：A0执行日期：2XX-05-02共6页标准操作程序项目：糖化血清蛋白方法：NBT法文件编号ELK-SH-SOP-07-044编写者日期审核者日期批准者日期颁发部门或个人接收部门或个人院长办公司保管者院档案室保管者医务科保管者检验科主任临床化学检验室发布日期：2XX年4月2日实施日期：2XX年4月3日前言为使临床检验操作规范化，指导检验人员严格按规程进行正确的常规操作，保证检验质量，特制定本操作规程。本规程的编写遵循了ISO15189《医学实验室——关于质量和能力的特殊要求》及WS/T227-2002《

临床检验操作规程编写要求》的有关规定并结合产品实际情况制订，作为本产品的标准操作程序。本规程从2XX年5月2日起实施，每2年复审1次。本规程由XXXX生物技术有限公司编制。本规程起草单位：XX生物技术有限公司技术部。本规程主要起草人：本规程首次起草。XXXX生物技术有限公司技术部2XX年4月2日目

录1检验申请…………………32标本采集与处理…………………………33试剂及成份…………………………44方法原理……….…………45仪器……….……………….…………46校准液及校准模式………………………47质控品与室内质控规则…………………48标本检测步骤………….…………………59结果计算…………………510操作性能………………511试剂使用的注意事项……………...……512参考范围及医学决定水平………………………..……513检验结果的报告及范围………………………..………514临床意义……….….……615结果审核分析以及相关项目的联系..……………………..……..……616威胁生命的“紧急值”及报告规定.…………………..…617有关引用程序与文件………………..….618参考文献附录AXXX型生化分析仪参数糖化血清蛋白测定标准操作规程1.检验申请单独检验项目申请：糖化血清蛋白（缩写GSP，又称血清果糖胺）测定。临床医生根据需要提出检验申请。2.标本采集与处理2.1受检者的准备：采血前2周保持平时的饮食习惯，3d内避免高脂饮食，24h内不饮酒，空腹12h后采集标本。体检对象抽血前应有两周的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。有些药物长期应用，可使患者糖代谢发生障碍，引起血糖增高，因而应当在使用这些药物期间定期监测血糖，避免引起高血糖。常用药物中可致血糖增高的有以下几类。（a）糖皮质激素：糖皮质激素药物如强的松、氢化可的松、抗炎松等，临床应用广泛。糖皮质激素可通过三条途径影响糖代谢：（1）增强糖元分解；（2）使糖异生途径活动；（3）减少外周组织对糖化血清蛋白的作用，因而血糖升高。如果大剂量或长期使用糖皮质激素治疗，应密切监测血糖，根据情况适当减少剂量或配合降糖药物应用。(b)甲状腺制剂：甲状腺激素（甲碘胺、甲状腺素、甲状腺球蛋白），可以促进糖化血清蛋白的吸收，加速糖元分解及糖异生，使血糖增高。因而应用甲状腺制剂时应严密观察，特别是糖尿病病人需用甲状腺制剂时应慎重给药。(c)肾上腺素：肾上腺素可动员肝及肌肉的糖元分解，使血糖升高。一般来说，肾上腺素及拟肾上腺素制剂很少会长时间就用，所以对血糖的影响不大。(d)利尿剂：噻唪类利尿剂长时间应用，可使病人的糖耐量降低而升高血糖，可能是抑制胰岛素分泌或使糖元分解的缘故。噻唪类利尿剂致高血糖大多出现在用药2-3个月后，停药能自行恢复。(e)避孕药：包括雌激素与黄体酮样衍生物，这些药物均具有降低糖耐量和升高血糖的作用。因此患有糖尿病的育龄妇女，不能服用这些避孕药。(f)异烟肼：异烟肼是抗结核病的一线药物，治疗结核病时用药期至少在半年以上。长期用异烟肼可影响糖代谢，使糖耐量降低，因此在用药期间应定期检查血糖并采取相应措施。当糖尿病合并肺结核时，异烟肼忌与磺脲类降糖药合用，否则可能产生不可逆糖尿病。(g)其它：如烟酸及其衍生物、吩噻嗪类药物、生长素、促肾上腺皮质激素、双香豆素、去甲基麻黄碱等药物，均有增高血糖浓度的作用，使用时应注意监测血糖，避免引起高血糖或糖尿。2.2标本采集2.2.1除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的黄色盖子SST真空采血管，如为急诊标本，使用浅绿色盖子PST试管。2.2.2检验申请单和血标本试管上统一且唯一的标识符。2.2.3标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识。2.2.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.2.5下列标本为不合格标本2.2.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。2.2.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.2.5.3对无法确认标本与申请单对应关系的。2.2.5.4抽血后室温放置超过4h以上的标本。2.2.5.5静脉滴注大剂量维生素C后立即抽血的样本。2.2.5.6其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.3标本处理2.3.1接收标本在30min内将标本离心分离出血清，并及时将血清与血球分离。吸出血清或血浆,标本应立即测量。处理样品时要将其当成生物污染品。2.3.2标本保存时间：不抗凝血标本如血清未与血块分开，共存同一试管中，室温（15～25℃）下血清糖化血清蛋白很不稳定，普通冰箱中（2～8℃）稳定1d。加氟化钠的血液标本室温（15～25℃）下稳定4h。2.3.3为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1d的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。2.3.4已完成测试的标本保持完整的识别号，单独分离出血清后，密闭置2～8℃冰箱内保存7d。2.4标本的注意事项2.4.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。检查空腹血清糖化血清蛋白的须在禁食12h以上早晨抽血。2.4.2餐后2h糖化血清蛋白检查，受检者于餐后2h小时准时抽血。2.4.3糖化血清蛋白耐量试验检查的血液标本，在服用75克糖化血清蛋白后，分别于0.5h、1h、2h及3h准时抽血。2.4.4为避免糖化血清蛋白被酵解，单独测定糖化血清蛋白时，血标本可氟化钠-草酸钾抗凝，氟化钠用量为1.5mg/ml血。3.试剂及成份3.1试剂本科使用的糖化血清蛋白检测试剂盒，由XXXX生物技术有限公司生产,产品货号为:XXX,试剂为液体试剂，其组份如下：主要组成份浓度碳酸盐缓冲液100mmol/L硝基四氮唑蓝0.5mmol/LTritonX-10060mmol/L稳定剂0.95g/L3.2试剂盒保存及效期未启封试剂盒在2～8℃保存，可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定3d。开盖后避免污染。当试剂变混浊，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。新打开试剂不宜与已用过的试剂混合在一起,否则易造成试剂稳定性下降。3.3试剂盒准备液态试剂型，即开即用，无特殊准备。4.方法原理4.1测定方法：两点速率法。4.2原理：糖化血清蛋白是一种大分子酮胺类化合物。样品中糖化血清蛋白在碱性条件下将试剂中的硝基四氮唑蓝还原成紫色甲其生成量与糖化血清蛋白浓度成正比，用比色法在546nm处以糖化血清蛋白为标准品，测定反应中甲的生成量，从而可计算出样品中糖化血清蛋白的含量。5.仪器XXXX型号仪器。6.校准品与校准模式6.1校准品：使用复合校准血清或使用试剂盒附送的标准液。试剂盒附送的标准液校准液。6.2标准类型和校准点数目：线性模式，n个校准点。6.3校准周期：空白定标：每日需做试剂空白定标。全点定标：①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后；均须需要全点定标。7.质控品与室内质控规则7.1质控品使用XXX公司提供的复合校准液或采用因数法7.2质控液重建方法：用蒸馏水溶解质控品，轻轻混匀，20min后即可使用。7.3质控品测定：在每一批标本中测定至少两个水平质控血清各一次。7.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。7.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。8.标本检测步骤装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。9.结果计算A测定A测定A标准血清中糖化血清蛋白浓度（mmol/L）＝ΧCA标准式中：A测定——标本管吸光度；A标准——标准管吸光度；C——校准中液糖化血清蛋白浓度（mmol/L）；10.操作性能10.1精密度：批内CV≤4％，批间相对极差CV≤6％。10.2准确度：测量结果在质控血清靶值±2SD范围内。不同方法学试剂的质控结果之间会存在差异，使用时请确保质控选择与试剂的方法学保持一致。10.3线性范围：8mmol/L/L（血清与试剂用量之比为1:20时）10.4方法的有限性及干扰因素：10.4.1内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸80mg/ml对测试结果无明显影响。11.试剂使用的注意事项11.1本试剂仅应用于体外诊断。11.2扔弃废物应符合当地的法规要求。12.参考范围及医学决定水平成人：1.4~2.5mmol/L13.检验结果的报告及范围13.1结果的报告13.1.1结果经审核确认准确无误后发出报告。13.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。13.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。13.2报告范围：血清与试剂用量之比为1:20时，测定上限为8mmol/L。超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，并经上级主管技师审核后报告。14.临床意义血清白蛋白在高血糖情况下同样会发生糖基化。主要是白蛋白肽链189位赖氨酸与葡萄糖结合形成高分子酮胺结构，其结构类似果糖胺，故也称为果糖胺测定。由于白蛋白的半寿期比血红蛋白短，转换率快，约17～19天，故可通过测定血清糖基化蛋白水平来反映2～3周前的血糖控制情况，制定控制糖尿病人血糖浓度的短期方案，结合GHb的长期数据，采用更有效的治疗药物，将病人血糖维持在正常范围。糖化血清蛋白反映2～3周前的血糖控制水平，作为糖尿病近期内控制的一个灵敏指标，能在短期内得到治疗效果的回馈，特别适用于住院调整用药的病人。15.结果审核分析以及相关项目的联系15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的可靠性负责，并在