氨基酸红外吸收光谱的测定实验报告

氨基酸红外吸收光谱的测定―、实验目的熟悉固体样品压片技术。掌握红外光谱测试方法与仪器使用规程。练习红外光谱解析方法。二、实验要点选择固体样品测定其红外光谱，然后进行光谱解析。三•仪器试剂AVATAR360FT-IR型红外光谱仪（美国Nicolet公司），压片机，玛瑙研钵，光谱纯KBr,丙氨酸，苯丙氨酸；苏氨酸，缬氨酸；丝氨酸，半胱氨酸。四•实验原理（一） 红外光谱法对试样的要求红外光谱的试样可以是液体、固体或气体，一般应要求：1、 试样应该是单一组份的纯物质,纯度应＞98%或符合商业规格，才便于与纯物质的标准光谱进行对照。多组份试样应在测定前尽量预先用分馏、萃取、重结晶或色谱法进行分离提纯，否则各组份光谱相互重叠，难于判断。2、 试样中不应含有游离水。水本身有红外吸收，会严重干扰样品谱，而且会侵蚀吸收池的盐窗。3、 试样的浓度和测试厚度应选择适当，以使光谱图中的大多数吸收峰的透射比处于10%〜80%范围内。（二） 制样的方法：固体试样压片法将1~2mg试样与200mg纯KBr研细均匀，置于模具中，在油压机上压成透明薄片，即

可用干测定。试样和KBr都应经干燥处理，研磨到粒度小于2微米，以免散射光影响。五•实验步骤1•开机：开启电脑，运行OMNIC操作软件。检查电脑与主机的通信。2.固体样品测试取干燥样品1〜2mg与200mg光谱纯KBr放入玛瑙研钵中，混匀研细，取适量放入压片模具中，将模具置于压片机中，30MPa压30sec。减压、退模。即得一透明片子，将其放在样品框中测试。IR扫描后得到图谱。六•谱图解析氨基酸对比解谱练习，根据理论课教材找出各峰归属。对照分组：①丙氨酸，苯丙氨酸；②苏氨酸，缬氨酸；③丝氨酸，半胱氨酸。1.L-苏氨酸图谱：100一0 500 1000 1500 100一0 500 1000 1500 2000 2500 3000 35Q0 4000 4500L

由该图可知，在1700cm-i处有窄，强吸收峰，说明有C=O存在，在2500-3300处有比较宽的吸收峰，在3000cm-1处有宽，中强度吸收，900cm-1处也有弱吸收，说明有-OH存在，，则该化合物含有羧基-COOH，而且在1000-1300区域内有C-O的强吸收峰,3350cm-1和3180cm-1处分别有吸收，说明存在-NH2,在1460cm-1和1380cm-1处有吸收，说明存在-CH3,由此可以断定该吸收谱图为苏氨酸的红外吸收谱图。100一2・L-缬氨酸图谱100一60一CD -20一4020一500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000 4500由该图可知，在1700cm-1处有窄，强吸收峰，说明有C=O存在，在2500-3300处有比较宽的吸收峰，在3000cm-1处有宽，中强度吸收，900cm-1处也有弱吸收，说明有-OH存在，，则该化合物含有羧基-COOH,而且在1000-1300区域内有C-O的强吸收峰,3350cm-1和3180cm-1处分别有吸收，说明存在-NH?，在1460cm-1和1380cm-1处有吸收，说明存在-C^，在1340cm-1处有吸收，说明存在-CH，由此可以确定该谱图为缬氨酸的红外吸收谱图。七•思考题1•实验中为什么要用KBr作为载体?如果想绘制原料的光谱图，就必须找到一种载体作为溶剂，与样品按1:200的比例混合在一起压成一个透红外的小薄片，在红外光谱仪上绘制出一张合格的样品光谱图，这就必须要求这个载体在整个红外波段内本身绝对不能有任何其他吸收峰，并具有很高的透过率，所以真正的光谱纯溴化钾