兽药残留分析技术进展资料

兽药残留(cánliú)分析技术

与残留(cánliú)检测实验室建设第一页，共五十七页。整理课件第一部分(bùfen)兽药残留及其危害第二页，共五十七页。整理课件兽药典型的兽药是指用于预防和治疗(zhìliáo)畜禽疾病的药物。随着集约化养殖生产的开展，一些化学的、生物的药用成分被开发成具有某些功效的动物保健品或饲料添加剂，也属于兽药的范畴。兽药的主要用于防病治病、促进生长、提高生产性能、改善动物性食品的品质等。第三页，共五十七页。整理课件兽药在动物性食品(shípǐn)中的残留兽药的原形化合物及其代谢物在动物的细胞、组织、器官或可食性产品（如奶、蛋）中的蓄积、贮存(zhùcún)，称为食品动物的兽药残留。（狭义）化学物残留：除兽药外还包括通过食物链进入动物体内的农药（如杀虫剂、除草剂等）和环境污染物(如重金属、霉菌毒素等)。（广义）第四页，共五十七页。整理课件兽药在生态环境(shēnɡtàihuánjìnɡ)中的残留在生产中大量使用的抗菌药物、抗寄生虫药物及各种促生长制剂等药物都会以原形或以有活性的代谢产物形式随动物粪便、尿液或其他排泄物进入环境。这些物质(wùzhì)在环境土壤、微生物、水生生物、植物等蓄积或贮存。第五页，共五十七页。整理课件兽药残留(cánliú)的产生外因兽药和添加剂的使用

--防治动物疫病

--使用药物添加剂环境污染物内因兽药的体内过程(guòchéng)

--消除规律第六页，共五十七页。整理课件兽药残留(cánliú)的产生兽药残留产生的主要原因不遵守休药期的规定标签外用药

--剂量、剂型、给药途径(tújìng)、疗程、适应症、动物非法使用违禁药物污染

--饲料加工、贮藏、运输第七页，共五十七页。整理课件兽药残留(cánliú)的危害急性毒性作用(zuòyòng)（瘦肉精）慢性毒性作用（氯霉素、氨基糖苷类）特殊毒性作用（三致作用、激素样作用、过敏反应）

--雌激素类（己烯雌酚）、同化激素（苯丙酸诺龙）--喹恶啉类（卡巴氧）--硝基呋喃类（呋喃西林、呋喃它酮）--砷制剂--苯并咪唑类--杀虫剂（666）--氯羟吡啶、SM2等--甲醛、苯酚等第八页，共五十七页。整理课件兽药残留(cánliú)的危害对人类肠道微生物的影响

--破坏或抑制人体胃肠菌群中敏感菌的生长

--导致条件性病原菌的大量繁殖或体外病原菌侵入肠道

--改变肠道菌群的代谢活性，使菌群改变药物(yàowù)和食物固有活性和毒性的的生物转化能力发生变化

--引起细菌耐药性的产生，导致人类感染性疾病治疗的失败第九页，共五十七页。整理课件第二部分(bùfen)兽药残留分析技术第十页，共五十七页。整理课件兽药残留(cánliú)分析技术的特点待测物质浓度低样品基质复杂，干扰物质多兽药残留代谢产物多样或不明动物种类多样，对药物代谢存在(cúnzài)差异第十一页，共五十七页。整理课件残留(cánliú)标示物的选择用药后体内存在多个残留成分，则需要监控(jiānkònɡ)总残留物。总残留物在体内的各组分比例相对稳定，选择总残留物中1种或2种组分作为“参照物”，称为“残留标示物”。通过测定残留标示物的含量表示样品残留量和MRLs。选择残留标示物的原则

--消除慢、含量高、稳定、毒性大第十二页，共五十七页。整理课件兽药残留(cánliú)分析方法的要求快速高通量定量准确度和精确度确证(quèzhènɡ)法定要求质控要求第十三页，共五十七页。整理课件兽药残留(cánliú)分析方法的要求ELISALC/MS/MS准确度定量精确度法定要求确证质控要求高通量快速LCorGC第十四页，共五十七页。整理课件分析方法的总体(zǒngtǐ)思路高水平(LevelⅠ)方法

--确证和定量被分析(fēnxī)物质中等水平(LevelⅡ)方法

--定量但不需要确证被分析物质低水平(LevelⅢ)方法

--筛选第十五页，共五十七页。整理课件分析方法的总体(zǒngtǐ)思路采用(cǎiyòng)快速、大量检测样品的筛选分析方法，能鉴别含有残留物的阳性样品采用充分可靠(kěkào)的分析方法，残留量的值不具有确证性，但具相应的准确度和有效性采用经过确认的分析方法对残留物进行鉴别和测定，残留量的值必须是有效和肯定的酶联免疫法液相色谱法气相色谱法液质联用法气质联用法三级二级一级第十六页，共五十七页。整理课件“筛选”到“确证”的方法(fāngfǎ)体系定性(dìngxìng)定量饲料产品尿样动物组织三级方法(fāngfǎ)二级方法一级方法定性为主定量为主定性为辅GC/MSLC/MSLC/MS/MSGC/MS/MSGCHPLC第十七页，共五十七页。整理课件兽药残留分析(fēnxī)技术用于残留分析的样本(yàngběn)制备技术样品的前处理技术残留检测方法的选择第十八页，共五十七页。整理课件样本(yàngběn)的范围可食性组织及产品(chǎnpǐn)

--肝、肾、肌肉、脂肪、皮肤、血液

--奶、蛋

--其他加工食品其他

--毛发、尿、粪便等第十九页，共五十七页。整理课件样本(yàngběn)的收集取样方法

--代表性原则、随机采样

--各种标准规定活体检测

--一般采集毛发、血液、尿液和粪便(fènbiàn)屠宰场取样

--药物的靶组织

--其他高浓度的样本：肝、肾、胆汁、注射部位

--排泄物：尿液第二十页，共五十七页。整理课件样本(yàngběn)的贮存容器材料(cáiliào)

--一般为玻璃或塑料预处理

--匀化、缩分、过筛、离心、过滤、防腐、抑制降解等贮存温度要求第二十一页，共五十七页。整理课件样品前处理(chǔlǐ)技术提取方法(fāngfǎ)

--组织捣碎法

--振荡法净化方法

--液—液萃取

--液—固萃取浓缩与富集

--旋转蒸发器浓缩

--气流吹蒸法：氮气、空气第二十二页，共五十七页。整理课件样品(yàngpǐn)的前处理技术——提取提取(tíqǔ)化合物特性(tèxìng)基质组成提取剂选择沉淀剂选择设计顺序效率试验配比试验干扰试验影响净化第二十三页，共五十七页。整理课件样品(yàngpǐn)的前处理技术——净化净化(jìnghuà)液液(yèyè)萃取SPE纯化相似相溶小柱选择浓缩富集效率试验配比试验上样洗涤洗脱第二十四页，共五十七页。整理课件残留检测方法(fāngfǎ)简介快速筛选方法(fāngfǎ)

--酶免疫测定(EIA)--ELISA--放射免疫测定法(RIA)--金标试纸条(Dipstick)--生物传感器

--微生物抑制测定法：抗菌药

--TLC第二十五页，共五十七页。整理课件残留检测(jiǎncè)方法简介化学定量方法(fāngfǎ)

--气相色谱法（GC）

--高效液相色谱法（HPLC）

--原子荧光(AF)--原子吸收(AA)第二十六页，共五十七页。整理课件残留(cánliú)检测方法简介仪器确证(quèzhènɡ)方法

--HPLC-PDA--GC-MS--GC-MS-MS--HPLC-MS--LC-MS-MS第二十七页，共五十七页。整理课件样品(yàngpǐn)处理技术进展SPE的应用与自动化膜分离技术免疫亲和色谱(IAC)凝胶渗透色谱（GPC）分子印迹(yìnjì)技术其他技术（自动索氏提取法、超声波辅助提取、超临界流体萃取、强化溶剂萃取、微波辅助萃取、加速溶剂萃取法）第二十八页，共五十七页。整理课件色谱分析(fēnxī)技术进展超高效液相色谱(sèpǔ)系统(UPLC)第二十九页，共五十七页。整理课件色谱分析技术(jìshù)进展高效毛细管电泳色谱(sèpǔ)系统(HPCE)第三十页，共五十七页。整理课件色谱分析(fēnxī)技术进展高精密度串联(chuànlián)质谱——GC-MS/MS、LC-MS/MS第三十一页，共五十七页。整理课件色谱(sèpǔ)分析技术进展高精密度串联(chuànlián)质谱——GC-MS/MS第三十二页，共五十七页。整理课件色谱分析技术(jìshù)进展高精密度串联(chuànlián)质谱——LC-MS/MS第三十三页，共五十七页。整理课件色谱分析技术(jìshù)进展高分辨(fēnbiàn)质谱系统(Q-TOF、Q-Exactive)第三十四页，共五十七页。整理课件检测技术(jìshù)发展趋势分析检测(jiǎncè)方法筛选方法确证方法快速(kuàisù)简便价格便宜现场应用注重时效性仪器更新快多组分分析灵敏度高提高准确性第三十五页，共五十七页。整理课件限制我国残留检测发展(fāzhǎn)的问题问题(wèntí)：标准依赖性强，但标准滞后。——标准制修订程序化、效应化导致：标准实施效果较差。——标准出台后很快又被淘汰——现有标准限制了检测(jiǎncè)技术发展第三十六页，共五十七页。整理课件限制(xiànzhì)我国残留检测发展的问题问题：照搬国外的残留(cánliú)监控内容。——检测方法缺乏验证——缺乏药理研究，没有“中国特色”的MRL导致：残留检测基础较差。——对不同药物的残留关注(guānzhù)程度不一第三十七页，共五十七页。整理课件警惕残留(cánliú)检测发展的误区误区一：“两极(liǎngjí)”分化检测(jiǎncè)方法筛选方法确证方法成本上升一物多用注重首创忽略了筛选方法的初衷仪器追新型盲目多残留水平看指标过犹不及不切实际没有联系第三十八页，共五十七页。整理课件警惕残留检测(jiǎncè)发展的误区误区二：习惯(xíguàn)“参考”方法可行数据可信国外文献资料国内文献资料实验条件重现国外文献资料国内文献资料实验数据参考撰稿发表内容相似知其然，而不知所以然难以提升自身水平第三十九页，共五十七页。整理课件警惕(jǐngtì)残留检测发展的误区误区三：只认“原形(yuánxíng)”药物消化吸收分布转运动物体内药物原形氧化还原水解结合结构变化代谢物缺乏药代动力学研究，盲目检测第四十页，共五十七页。整理课件正确引导残留(cánliú)检测发展方向积极研究药物代谢(dàixiè)和残留消除规律药理学药效研究药代研究药物对机体的实际作用机体内药物的生物转化药物的生物利用度药物的标示残留物药物剂型研究消除规律研究确定监控的靶点制定休药期危险性评估第四十一页，共五十七页。整理课件正确引导残留检测(jiǎncè)发展方向重视(zhòngshì)饲料投入品的调查和监测饲料(sìliào)药物添加剂国外引进人用药品企业自创禁用化合物清单允许添加的药物要求检测违禁药标签不明示药名要求出具合格报告出现干扰物质有特征组分未知组分分析新添加物第四十二页，共五十七页。整理课件第三(dìsān)部分残留检测实验室建设第四十三页，共五十七页。整理课件残留(cánliú)实验室的功能动物性食品中兽药残留检测(jiǎncè)饲料产品中违禁药物(危害物质)检测残留分析技术的推广应用残留分析技术的研发和标准化工作第四十四页，共五十七页。整理课件残留实验室的建设(jiànshè)要求硬件要求(yāoqiú)

—实验场地、格局、设施

—设备、标准物质、试剂耗材

—人员软件要求

—资质认证与管理体系建设第四十五页，共五十七页。整理课件实验室建设的硬件(yìnɡjiàn)要求实验场地和格局面积要大。根据具体功能分割，不同实验室要求不一。（天平室不宜太大，仪器室不宜太小）根据实验流程(liúchéng)分割。明确每个实验室名称，避免功能混乱。第四十六页，共五十七页。整理课件功能(gōngnéng)实验室样品保存室天平室（称量）样品预处理室（组织(zǔzhī)匀浆、饲料粉碎、分样）样品检测室（ELISA检测）仪器分析室（大型仪器设备）清洗消毒室试剂保存室（危险化学品）耗材保存室标准物质保存室第四十七页，共五十七页。整理课件实验室建设(jiànshè)的硬件要求必要设施安全(ānquán)设施：消防装置、报警装置等。环境设施：空调、通风柜、排气扇、去湿机等。防护设施：医药箱、冲淋装置。三废收集与处理设施。第四十八页，共五十七页。整理课件实验室建设(jiànshè)的硬件要求设备(按流程分类)样本的保存设备：冰箱(bīngxiāng)、培养箱等。样品前处理设备：匀浆机、粉碎机、浓缩仪等。检测用设备：酶标仪、HPLC、LC-MS/MS等。设备(按功能分类)主要设备：出具检测数据。辅助设备：对检测数据有一定的影响。第四十九页，共五十七页。整理课件主要(zhǔyào)检测用仪器设备仪器名称数量总价(元)酶标仪1高效液相色谱仪2气质联用仪1液相色谱串联质谱仪1总计第五十页，共五十七页。整理课件主要(zhǔyào)检测项目β-肾上腺素能激动剂(如瘦肉精、莱克多巴胺)精神类药物(如安定、氯丙嗪)蛋白同化激素(如睾酮、群勃龙)糖皮质激素(如地塞米松、氢化可的松)抗生素(如四环素类)抗菌药物(如磺胺类、喹诺酮类、硝基呋喃类)抗虫药物(如硝基咪唑类)农药(如六六六、滴滴涕)其他(如苏丹红、三聚氰胺)第五十一页，共五十七页。整理课件实验室建设(jiànshè)的硬件要求标准物质

—标准品和对照品

—标准溶液常用试剂

—水

—固体(gùtǐ)试剂

—液体试剂专用试剂

—试剂盒第五十二页，共五十七页。整理课件实验室建设(jiànshè)的硬件要求常用耗材玻璃仪器（包括小容量(róngliàng)玻璃仪器）塑料制品（离心管、枪头等一次性用品）防护用品（手套、护目镜等）专用耗材色谱耗材（色谱柱、样品瓶等）前处理耗材（SPE小柱、滤膜等）保存用耗材