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文档简介

应用分类1、膜表面抗原和胞浆内蛋白分析2、DNA含量及细胞周期分析3、定量分析4、细胞功能分析5、凋亡研究6、细胞间相互左右7、细胞分选1.检测淋巴细胞亚群,监测细胞免疫状态2.白血病/淋巴瘤免疫分型3.HLA组织配型及HLA与某些疾病的关系4.干祖细胞的定量及成分分析.5.其它:粘附分子;TCR多态性检测;肿瘤癌基因及抑癌基因蛋白产物的检测;细胞内酶;耐药蛋白的分析等等。

临床应用疾病诊断:为疾病诊断提供直接的或支持诊断的依据免疫调节:细胞因子/受体的相互作用共刺激分子受体/配体的相互作用

发病机理:肿瘤的发病与机体的免疫力低下、以及信号传递障碍有关药物/疫苗效果的评价:肿瘤生物治疗的时机选择、以及效果的监测免疫状态评价:移植、放化疗等.细胞周期分析:在细胞周期(G0,G1,S,G2,M)的各个时期,DNA的含量随各时相呈现出周期性的变化。通过核酸染料标记DNA,并由流式细胞仪进行分析,可以得到细胞各个时期的分布状态,计算出G0/G1%,S%及G2/M%。了解细胞的周期分布及细胞的增殖活性。也可利用细胞周期蛋白(CYCLIN)、Ki67、核增殖抗原(PCNA)等,对细胞周期进行精确的分期:G0、G1、S、G2、M.DNA含量及细胞周期分析G2MG0G1s0

200

400

600

8001000G0G1sG2MDNAAnalysisDNAcontentCount2N4NNormalCellCycle1.肿瘤的早期诊断。2.肿瘤的良恶性判断。3.观察细胞的增殖状态及周期分布。4.疗效监测细胞功能分析

1.吞噬功能试验

2.氧爆发试验3.根据T淋巴细胞分泌细胞因子的不同将CD4+或CD8+分为介导细胞免疫的I型细胞和介导体液免疫的II型细胞.4.药物泵的功能检测

5.NK细胞的肿瘤杀伤活性检测6.血小板的粘附,聚集功能检测树突状细胞分析(DendriticCells,DC)DC是主要的抗原递呈细胞,同时又是重要的先天免疫细胞,还是具有免疫调控功能的一个细胞群,没有发现特异性的抗原标记DC研究的主要内容包括直接分析计数、体外诱导检测,一般分为两群-PDC,MDC当前DC检测的方法:1)Lin-,CD11c,CD123,同时可能表达CD80,CD86,CD83,DR等2)利用BDCA1,2,3,4对外周血或其它组织DC进行分析3)CD14+16/CD85/CD33,CD14+16/CD85/CD123T细胞分析相对计数-淋巴细胞亚群数量检查项目和意义疾病CD3CD4CD8CD4/CD8NK自身免疫病降低增高降低降低AIDS降低严重降低增高降低SARS降低降低降低降低降低慢性活动性肝炎、肝硬化降低正常或增高降低降低肿瘤降低降低增高降低降低CD何4细胞挤绝对昨计数对AI双DS病人杰的诊秋断、婚疗效迈和预脖后有赚重要乒的指奶导意扑义,墨一般雕认为CU骂TO喜FF值为故20姻0/ul.绝对简计数司是加通入浓刺度已拿知的青标准责微球抵与标虏本一悟起测习定,尸流式展细胞乡丰仪控呼制软汤件在趋设置筛后能卸自动凭计算贞出浓恐度对任结何细祸胞群纵体都炒可以亮进行筑绝对舱计数Th请1T私h2细胞贞因子志分泌稻细胞滨测定根据塌产生徐的细照胞因凯子的希类型移和生垃物学府功能粉,人吃的C宴D4疮+T昏细胞压可以两分为关Th侧1、订Th捕2Th昂1细凤胞产减生I速L欢2、熊IL买1竞2、苍IF劣Nγ、TN腰Fβ等细俭胞因魂子,书主要筑参与洒细胞轿介导皂的免贺疫反横应、垫迟发确性过乡丰敏反惰应,橡并在智清除昆病毒练等细天胞内锤致病努因子什方面复起着吼重要偿作用Th矿2细剂胞分物泌I权L厦4、表IL巩5句、I雷L视6、搂IL公1录0、气IL四1侄3等定细胞剧因子覆,主圈要促幅进体峡液免故疫反腊应,融中和肿胞外辞病原曲体相应狡地,CD猴8+伶T细胞蚕也可神以分创为Tc米1和Tc环2Th榆1细胞阅:介导委细胞臭免疫扮、细芹胞毒红性T细胞挂的生长忽和活纵化、拨巨噬稿细胞在的活肌化、础介导雾迟发鸽型过阁敏反剩应。只其功法能亢下进将姥导致轰炎症贷慢性蜂迁延目,器丢官特众异性土自身捞免疫杀病,塑急性丧排异般反应帝和接动触性团皮炎畏等的里发病约和免歪疫病穷理损工伤。Th雹2细胞赖:介导呆体液液免疫枕,促销进B细胞浓的生啊长、陪活化驻和分恼化,定是Ig嗽G1和Ig旺E类抗劳体的剩转换违因子裳,其使功能易亢进融将导朴致特医异性什过敏拨反应造,参隆与高Ig穿E综合染症和扔嗜酸书性粒搬细胞唇增多坐症。Th衬1T字h2检测Ti悦ps一定兆要确樱定T细胞沉是否棵已经手活化档,细竖胞转者运阻涛滞是纱否成施功,示胞膜肾打孔物是否扩有效一定快要用隶胞浆递内同问型对滚照(费特别蓝是FI匙TC标记蚀时)记,以六便分忘别部会分弱省表达参的细乱胞因欢子。TE燥TR驳AM临ER抗原查递呈快细胞卷(AP铅C)携带涛抗原持片段凳通过麻与TC蛾R复合疯物结衡合,沟在AP蒙C和T细胞旷的MH弱C相容乡丰和其妈它共记刺激明分子句的相南互作遣用下两激活T细胞侧并产抬生细磨胞免握疫效裙应。MH个C-四聚析体染押色技礼术用嫁于抗词原特眯异性T细胞钟分析汇的原并理在肆于体岁外模葡仿上劝述抗岔原递粪呈的旁过程孔来实丧现对镰特异家性T细胞贺的鉴纠定,领通过撕流式恒细胞豆仪这棍种高剪通量绑分析毙仪器距对标度本中猪这群帅细胞蔑进行代分析四聚淡体技扮术的层优势屑是:吨可以绸对特势异性矛免疫卸细胞昼进行皇定量仪;用砖流式寨细胞消仪检摩测可抹以快商速测才定大越量细爪胞,鸡可以慢同时呜进行奋其它纤表面享染色节,可嫌以直归接用绣外周姿血测雷定而亦不需体要培谁养;潮四聚晶体染隐色不悲会杀剑伤细既胞,假因此步染色披后的咬细胞孟可以述进行逼分选义或其谢它功思能分洗析;兔四聚从体对挠所有言的特欠异性T细胞丹都能你够结厨合,及而不丢仅仅岛是对有功框能的箱细胞焦进行晴检测寸。不同济厂家刑的MH重C四聚慎体产煮品不间太一仓样:锄贝克理曼库馅尔特共公司此创造病性地把构建叮和表涝达了MH五C分子α3链的芬区域重突变离的蛋狡白(iT撒Ag),能降饭低其疏与非摧特异歉性T细胞俯结合坦,大胡大提侄高了挠特异盖性。似并且据将MH圣C四聚袭体直侧接标篮记荧羽光,佩和常档用的请抗原叫多肽恐负载滔后整泊体商负品化裁,也宏有单晴独的MH寄C分子慎(iT介Ag)单独伐出售坡,极旷大方奶便了昆研究赖者CD江4C梨D2苹5Tr核eg调控胀性T细胞颠的主敌要功摘能是素抑制炼机体兰免疫爹功能判,太绪强则奶免疫授耐受绝,太只弱会暴引起大自身众免疫僻反应调控系性T细胞正调节判抗原口递呈动细胞框对抗恢原的善递呈调控危性T细胞敲的表粘型是CD盏4+嘉CD洞25睁br带ig诵ht弓,逐渐支发现甚越来批越多姜的其泳它分军子可塌能能捷够更鱼精确骑限定梯(eg堂.F福OX专-1土?)CD乖25也是集免疫圆细胞伤晚期机活化蹈的标慕记,押但表糕达的和平均弯荧光年强度期不足垂够强非特慰异性佛的先押天免姓疫细晶胞δT细逝胞:谋占外悲周血T细胞麦的1旋0%主以下左,非注抗原竹依赖陡型免序疫细棋胞,破在传骑染病戒、肿梳瘤病劫人外摊周血牵数量倒增加职,表摄达CD奔3量较沃普通T细胞污多NK细胞恋:占且外周样血淋肺巴细表胞8泻-2贿5%站,传腔染病春和肿喇瘤病江人数课量偏粒低。NK细胞观可以欺根据NK坦R的不拨同而饶分类膀,丙召型肝煤炎的碍发生葵和预图后可旺能与NK细胞昂的表躬型相和关DC鼓:分布梯与淋恰巴组朗织和塌外周找血,猪为非听成熟朝状态揪,遇巧到相夫应的显抗原乞后主猎要分留泌IF羡N-探al邀ph趟a来发志挥左峡右其它愤重要检分子才的流饼式分姥析的喜意义粘附守分子晌:物锹种间蚂高度好保守快,与浪细胞虾间通月讯,色干细理胞HO属MI回NG扬,肿瘤果的发咱生可订能有披很重密要的悠关系右,如CD港11剥C/浴CD蜓18毯-C取D5蜡4与DC成熟辨和迁宵移有划关;CD普20坟9-流CD傲10女2与抗稀原递碍呈有惹关CD啦26辱:移植序后造缩慧血干规细胞迹表达锻可能膝不利庙于该扯细胞葱的ho摆mi轮ng德,有证总据表筹明抑折制造咐血干篮细胞是有利压用移改植成动功流式切细胞爹术在急移植耐中的戴应用移植决配型晚和群盟体反圈应性股抗体吸的检尾测荧光稿示踪射标记汪的移躁植细闸胞:CF亚SE是一段个确油定的拉荧光牌标记双物,烂开发乎其它年稳定荐的荧监光素育应该杯更有境帮助流式路细胞陵仪分真选为达棵到最硬高的互分选懒效率困,实恨用中鸽最好仙先用衔磁珠扛分选揭系统秧进行页初步颗分选活细司胞分怜选非逗常有丢用流式基细胞鸦术在债生物呀医学呼研究走的新腐方向细胞筋多态膏性分统析:吃受体冰、抗羡原折剃叠、HL转A等,傅包括CX千CR蛙4,纺CC量R5去,D隆C-圾SI晚GN雅(与AI踪蝶DS易感陕性有惨关)霉,NK钩R(中国蒜科大听研究疗领先需项目夜)信号胆传导鲁(实辉际主辟要为雁胞浆消内磷袜酸化伯及去方磷酸样化蛋匆白的轧检测鸦)新型谱荧光巧特异雨性探拜针:肝胞内象病原

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