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文档简介

抗核小体抗体检测诊断系统性红斑狼疮的评价【摘要】目的探讨抗核小体抗体检测及AnuA与抗双链DNA抗体、抗核抗体等特异性抗体联合检测诊断系统性红斑狼疮的价值。方法ANA采用间接免疫荧光法,抗dsDNA抗体、AnuA采用ELISA法,分别对48例SLE病人、44例病例对照病人及20例正常人进行检测。结果AnuA阳性率%,特异性%;抗dsDNA抗体阳性率%,特异性%;ANA阳性率%,特异性50%。AnuA与抗dsDNA抗体联合检测,阳性率%,特异性%。结论单一指标用于SLE的诊断AnuA最好,抗dsDNA抗体次之,ANA最差;AnuA与抗dsDNA抗体联合检测诊断SLE阳性检出可互补,能提高阳性率,且特异性好,是诊断SLE较好的联合检测指标。

【关键词】系统性红斑狼疮;抗核小体抗体

系统性红斑狼疮是一种累及多系统多器官的自身免疫性疾病。其主要特征是体内产生多种抗核抗体,如抗双链DNA抗体(抗dsDNA抗体)、抗史密斯抗体、抗组蛋白抗体、抗核糖体P蛋白抗体、抗核小体抗体等,而引起自身多组织、多器官以血管炎为特征的弥漫性损害的疾病[1]。目前SLE的实验室检查主要检测血清ANA、抗dsDNA抗体、AnuA等。本文对此三项指标检测诊断SLE的价值进行了探讨,结果报告如下。

1材料与方法

研究对象研究组为2003年11月~2005年6月我院门诊和住院SLE患者48例,男6例,女42例,年龄18~52岁,病程6个月~4年,诊断均符合美国风湿病学会SLE诊断标准[2]。病例对照组44例,男4例,女40例,年龄17~69岁,病程4个月~6年,均为我院门诊和住院病人,其中类风湿性关节炎30例,皮肌炎3例,干燥综合征4例,混合性结缔组织病3例,系统性硬化症4例。正常对照组20例,男10例,女10例,年龄20~50岁,为无偿献血者。

方法

标本的采集与处理抽取患者静脉血,充分凝固后离心取血清保存于-20℃低温冰箱,检测前解冻后检测。

AnuA检测采用德国欧蒙公司提供的AnuA第二代ELISA检测试剂盒,批号E050504EA。严格按说明书进行操作。设阴阳性对照孔,结果判断:≥20U/ml为阳性。

抗dsDNA抗体检测采用上海德波生物有限公司提供的抗dsDNA抗体ELISA检测试剂盒,批号20050412。严格按说明书进行操作。设阴阳性对照孔,结果判断:≥10U/ml为阳性。

ANA检测采用德国欧蒙公司提供的ANA检测试剂盒,批号T050512TB。以Hep—2细胞和猴肝为基质片,按说明书应用间接免疫荧光法检测。设阴阳性对照,结果判断:血清稀释≥1:100显示荧光判为阳性。

统计学方法采用χ2检验。

2结果

各观察组AnuA、抗dsDNA抗体、ANA检测结果SLE中自身抗体的阳性率:ANA最高,为%;AnuA次之,为%;抗dsDNA抗体最低,为%。特异性:AnuA和抗dsDNA抗体较高,均为%,而ANA仅50%。见表1。

表1各观察组AnuA、抗dsDNA抗体、ANA检测结果

48例SLE患者AnuA与抗dsDNA抗体检测结果比较阳性率AnuA为%,高于抗dsDNA抗体的%,差异有显着性。13例抗dsDNA抗体阴性而AnuA阳性,4例AnuA阴性而抗dsDNA抗体阳性。见表2。

表248例SLE患者AnuA与抗dsDNA抗体检测

48例SLE患者单独检测AnuA与联合检测AnuA和抗dsDNA抗体结果比较阳性率联合检测为%,高于单独检测AnuA的%,差异有显着性。见表3。

表348例SLE患者单独检测AnuA与联合检测AnuA和抗dsDNA抗体结果比较

3讨论

核小体是构成染色质的基本单位,每个核小体是由180~200个bp绕八聚体核心组蛋白构成的复合物,染色质纤维由紧密排列的核小体组成[3]。在细胞凋亡过程中核酸内切酶活化分切割核染色质、染色质释放核小体[4]。核小体作为免疫原,可被抗原提呈细胞如单核细胞提呈给CD4+Th2细胞,Th2细胞增殖活化,激活B细胞产生AnuA,形成抗原抗体复合物参与SLE的发病[5]。2000年Amoura等对596例患者用酶联免疫法检测AnuA,结果发现AnuA-IgG仅见于三种结缔组织病,即SLE阳性率%,系统性硬化症阳性率%,混合性结缔组织症阳性率%,是狼疮肾炎的标记性抗体[6]。

用间接免疫荧光法检测病人血清ANA,能检测出多种风湿性疾病的存在,如系统性硬化症、干燥综合征、未分化结缔组织病、多发性肌炎、类风湿性关节炎,也能作为SLE的诊断指标。但正因其能于多种风湿性疾病中出现,阳性率高,特异性低,故不能作为SLE诊断的特异性指标,而用作筛选试验。

诊断SLE,AnuA、抗dsDNA抗体都有较高的特异性,抗dsDNA抗体在狼疮肾炎的过程中可与肾小球基底膜结合,该反应是由核小体介导的,即核小体既能产生AnuA,又能产生抗dsDNA抗体,作为SLE的特异性抗体,它们的阳性率各不相同,其中AnuA的阳性率要高于抗dsDNA,与文献[7]结果基本一致。且高水平的AnuA几乎是仅在SLE中出现[8],提示AnuA可能是诊断SLE比抗dsDNA更特异的指标。尤其对于抗dsDNA抗体阴性的SLE患者的诊断更具有临床应用价值。

分析AnuA和抗dsDNA抗体的检测结果,13例抗dsDNA抗体阴性的SLE患者AnuA阳性,4例AnuA阴性的SLE患者抗dsDNA抗体阳性,故两者用于诊断SLE,阳性检出有一定的互补关系,这一结果与国内苏茵的研究类似[9]。二者联合检测能将阳性率提高到%以上,而特异性没有差别。本文结果还显示,AnuA及抗dsDNA抗体与SLE的病情活动性相关,特别是与狼疮性肾疾病高度相关,可作为治疗观察的指标。因此,临床工作中可应用AnuA与抗dsDNA抗体联合检测,既可明显降低检查费用,同时也达到SLE早期诊断和早期治疗的目的。

综上所述,AnuA、抗dsDNA抗体是诊断SLE的特异性自身抗体。相对来说,AnuA的阳性率要高于抗dsDNA抗体,两者在诊断中有明显的互补作用,联合检测,能提高SLE的检出率,而不降低其特异性,有利于SLE的早期诊断和治疗。

【参考文献】

1苏茵,贾汝琳,粟占国,等.自身抗体联合检测在系统性红斑狼疮诊断中的意义.中华风湿学杂志,2005,1:16-19.

2LugbreK,MaderAW,RichmondstructureofthenucleasomecoreparticleatAresolutionNature,1997,389:251-261.

3郝进,郝飞,钟白玉,等.系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞核小体释放水平及其临床意义.中华皮肤科杂志,2003,36:372-374.

4EmlenW,NieburJ,kaderainvitroapplosisoflymphocytesfrompatientswithsystemiclupuserytheImmunol,1994,152:3685-3692.

5BrunsA,BlassS,HansdorfG,etaremajorTandBcellautoantigensinsystemiclupuserythemmatosus.ArthritsRheum,2000,43:2307-2315.

6Z,koutouzovS,,etofantinucleasomeantibodiesinarestrictedsetofconnectivetissuediseases.ArthritsRheum,2000,43:76-94.

7SimonJA,CabiedesJ,OrtizE,etantibodiesinpatientswithsystemicJupuserythematosusofrecentousetpotentialupilityasadiagnosticfoolanddiseaseactivity(Oxford),2004,43:200-

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