喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析

关于喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析第1页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三疟疾简介以及抗疟药疟疾是经按蚊叮咬或输入带疟原虫者的血液而感染疟原虫所引起的虫媒传染病。寄生于人体的疟原虫共有四种，即间日疟原虫，三日疟原虫，恶性疟原虫和卵形疟原虫。在我国主要是间日疟原虫和恶性疟原虫；其他二种少见，近年偶见国外输入的一些病例。不同的疟原虫分别引起间日疟、三日疟、恶性疟及卵圆疟。本病主要表现为周期性规律发作，全身发冷、发热、多汗，长期多次发作后，可引起贫血和脾肿大。抗疟药：一类用于控制症状，一类用于控制复发和传播，一类用于病因性预防。喹啉类药物分子结构中含有吡啶与苯稠合而成的喹啉杂环，环上杂原子的反应性能基本与吡啶相同。现以常见的硫酸奎宁、二盐酸奎宁、磷酸氯喹、磷酸哌喹、磷酸咯萘啶和磷酸氨伯喹为例，就鉴别和检查的有关问题进行讨论。第2页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三（一）典型的药物结构与物理性质P315（二）主要化学性质1.碱性奎宁为二元生物碱，其中奎宁环上的氮原子的碱性较强（pKa8.8）与强酸形成稳定的盐：而喹啉环上的氮原子的碱性较弱（pKa4.2）不能与硫酸成盐2.旋光性喹啉类抗疟疾药基本都具有手性，硫酸奎宁为左旋体，其比旋度为-237~-224。；二盐酸奎宁也为左旋体。而磷酸哌奎和磷酸咯萘啶不具有手性。3.荧光特性硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸中均显蓝色荧光。4.紫外吸收光谱特征由于喹啉类药物分子结构中含有吡啶与苯稠合而成的喹啉杂环，具有共轭体系，可以用紫外吸收光谱的特征鉴别该类药物。产生荧光的条件刚性平面结构共轭体系取代基和溶剂荧光强度的影响一、喹啉类药物的基本结构与主要性质第3页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三二、鉴别实验（一）绿奎宁反应取其水溶液加溴试液0.2ml和氨试液1ml，即显翠绿色；加酸至中性显蓝色；

酸性则呈紫红色；翠绿色可转溶于醇、氯仿中不溶于醚。第4页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三（二）光谱特征1.紫外吸收光谱特征由于喹啉类药物分子结构中含有吡啶与苯稠合而成的喹啉杂环，具有共轭体系，可以用紫外吸收光谱的特征鉴别该类药物。ChP采用本法鉴定磷酸氯喹、磷酸哌喹、磷酸咯萘啶和磷酸伯胺喹。示例12-2ChP磷酸氯喹的UV鉴别：取本品，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含有10ug的溶液，照紫外-可见分光光度法测定，在222nm、257nm、329nm、与343nm的波长处有最大吸收。2.荧光光谱特征利用硫酸奎宁和二盐奎宁在稀硫酸溶液中均显蓝色荧光的性质进行鉴别。示例12-5ChP硫酸奎宁的荧光鉴别：取本品约20mg，加水20ml溶解后，分取溶液10ml，加稀硫酸使成酸性，即显蓝色荧光。3.红外吸收光谱特征硫酸奎宁、二盐奎宁、磷酸哌喹、磷酸咯萘啶和磷酸伯胺喹在ChP中均采用红外光谱的方法进行鉴别。示例12-6第5页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三（三）无机酸盐1.硫酸盐的鉴别实验加BaCl2生成白色沉淀，不溶于盐酸和稀硝酸加HCl不产生沉淀，与硫代硫酸盐区别加醋酸铅生成白色沉淀，溶于醋酸铵或NaOH第6页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三加二氧化锰，加硫酸润湿，缓慢加热，产生氯气使KI试纸遇淀粉变蓝加稀硝酸和硝酸银生成白色凝乳状沉淀加铵试液溶解,加硝酸再沉淀2.氯化物的鉴别反应第7页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三3.磷酸盐反应加硝酸银生成浅黄色沉淀在铵试液或稀硝酸中均易溶解加氯化铵镁生成白色结晶性沉淀加钼酸铵试液与硝酸后,加热生成黄色沉淀，分离，沉淀在氨试液中溶解第8页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三三、纯度检查（一）硫酸奎宁1.酸度－酸性杂质取本品0.2g，加水20ml溶解后，测定pH值应为5.7～6.6。

2.氯仿－乙醇不溶物

取本品2g，加氯仿－无水乙醇(2:1)的混合液15ml，在50℃加热10min后，用称定重量的垂熔坩埚滤过，滤渣用上述混合液分5次洗涤，每次10ml，在105℃干燥至恒重，遗留残渣不得过2mg。

3.其他金鸡纳碱

(TLC、HPLC)第9页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三1.酸度

取本品1.0g，加水25ml溶解，测定pH值应大于2.4。2.水中不溶物

取本品加水溶解后，稍放置即有黄色不溶物产生,影响品质.3.氯化物

系生产工艺带入.检查时为了避免溶液颜色干扰碱使咯萘啶沉淀析出,过滤后进行检查.4.甲醛合成过程中引入5.四氢吡啶合成过程中引入（二）磷酸咯萘啶的纯度检查第10页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三（一）硫酸喹啉含量测定非水溶液滴定法（BH+）2·SO42-+HClO4⇌

BH+·ClO4-+BH+·HSO4-游离碱类盐被置换出的弱酸当HA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低HA的酸性，使反应顺利地完成。四、含量测定第11页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三3H+H+第12页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三（二）磷酸氯喹制剂含量测定磷酸氯喹用非水溶液滴定法测定含量，但制剂中由于含有辅料，所采用的含量测定方法不同。示例12-10：ChP中磷酸氯喹片含量的紫外—可见分光光度测定法：取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于磷酸氯喹0.13g),置200ml量瓶中，加0.lmol/L盐酸溶液适量，充分振摇使磷酸氯喹溶解并稀释至刻度，摇匀,滤过，精密量取续滤液2ml，置100ml量瓶中，用0.lmol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法（附录IVA)，在343nm的波长处测定吸光度；另取磷酸氯喹对照品适量，精密称定，加O.lmol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每lml中约含13ug的溶液，同法测定，计算，即得。五、高效液相法测定人体血液中的氯喹P323第13页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三青蒿素类药物的分析青蒿素又名黄蒿素,是我国从菊花科植物黄花蒿中提取分离得到的一个含过氧基团的新型倍半萜内酯青蒿素抗疟作用有迅速、高效、安全、低毒且与大多数抗疟药无交叉抗性,是一类全新结构的抗疟药，为抗疟药的研发提供了新的先导化合物。易产生耐药性，推荐使用复方青蒿素合成难度较大，药物的生产仍依赖于天然药材的提取。第14页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三一、青蒿素类药物基本结构与主要性质第15页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三（一）典型药物的结构与物理性质见P325（二）主要化学性质氧化性过氧桥键具有氧化性旋光性手性原子,具有旋光性水解反应内酯结构，碱性条件下易水解紫外吸收特性环状结构虽然不具有共轭特性,但取代基具有一定吸收特性第16页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三青蒿素类药物的鉴别试验1.呈色反应过氧桥键具有氧化性酸性条件下能将碘离子氧化成碘与淀粉指示液显蓝紫色第17页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三2.羟肟酸铁反应含内酯的化合物、羧酸衍生物和一些酯类化合物在碱性条件下与羟胺反应生成羟肟酸。在稀酸溶液中与高铁离子呈色显紫色2.羟肟酸铁反应含内酯的化合物、羧酸衍生物和一些酯类化合物在碱性条件下与羟胺反应生成羟肟酸。在稀酸溶液中与高铁离子呈色显紫色第18页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三3.吸收光谱特征红外，与标准谱图对照紫外，取代基末端吸收以鉴别，ChP2010未采用第19页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三使分子中的羧基脱水，增加双键位移，分子缩合反应生成其轭系统，在酸作用下形成阳碳离子盐而显色4.香草醛-硫酸反应第20页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三

5.色谱法HPLC法保留时间定性第21页，讲稿共25页，2023年5月2日，星期三青蒿素类药物的含量测定含量测定青蒿素原料采用高效液相色谱法测定，双氢青蒿素片采用水解后UV法测定。示例12-24：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（42:58)为流动相；检测波长为210nm。取本品和双氢青蒿素对照品适量，加甲醇溶解并稀释制成每lml中各约含lmg的混合溶液，量取注入液相色谱仪，双氢青蒿素呈现两个色谱峰，青蒿素峰与相邻双氢青蒿素峰的分离度应大于2.0;理论板按青蒿素峰计算不低于3000。测定法：取本品约25mg,精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取20μL，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取青蒿素对照品，同法测定。按外标法