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文档简介
2024届湖北省武汉市外国语学校生物高三上期末考试试题注意事项:1.答卷前,考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号和座位号填写在试题卷和答题卡上。用2B铅笔将试卷类型(B)填涂在答题卡相应位置上。将条形码粘贴在答题卡右上角"条形码粘贴处"。2.作答选择题时,选出每小题答案后,用2B铅笔把答题卡上对应题目选项的答案信息点涂黑;如需改动,用橡皮擦干净后,再选涂其他答案。答案不能答在试题卷上。3.非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答,答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应位置上;如需改动,先划掉原来的答案,然后再写上新答案;不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答无效。4.考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后,请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题:(共6小题,每小题6分,共36分。每小题只有一个选项符合题目要求)1.用同位素标记法追踪元素及物质的去向是生物学研究的重要手段之一。下列结果正确的是()A.用18O标记的水培养植物细胞,短时间内生成的O2和CO2均可能存在放射性B.用含有放射性碘的饲料饲喂蝌蚪,体内促甲状腺激素中可能检测到放射性C.用无放射性噬菌体侵染被32P和35S标记的大肠杆菌,子代噬菌体中含有32P,不含35SD.用14C标记的CO2培养植物细胞,可在叶绿体生成的淀粉、蔗糖等物质中检测到放射性2.下列有关果蝇体内有丝分裂和减数分裂的叙述,正确的是()A.含有姐妹染色单体的细胞也同时含有同源染色体B.含有两条X染色体的细胞只有初级卵母细胞和次级精母细胞C.有丝分裂后期与减数第二次分裂后期的细胞染色体数量相同D.与减数分裂相比,有丝分裂过程不会发生基因重组3.细胞内的RNA常与蛋白质结合形成RNA-蛋白质复合物,以完成某些生命活动,下列相关叙述错误的是()A.某种RNA与蛋白质结合形成细胞器.在此处发生的化学反应可以生成水分子B.RNA聚合酶是一种蛋白质,转录时,它与RNA结合C.真核细胞和原核细胞都有RNA-蛋白质复合物D.某种RNA与蛋白质结合后,参与DNA分子单链的形成.则该蛋白可能是逆转录酶4.研究发现协助物质进出细胞的转运蛋白包括载体蛋白和通道蛋白,且载体蛋白协助物质进出细胞时可能消耗能量,也可能不消耗能量,而通道蛋白协助物质进出细胞时不消耗能量。下列有关物质进出细胞的方式叙述,不合理的是()A.无转运蛋白参与的物质进出细胞方式都是自由扩散B.Na+不能通过通道蛋白的协助逆浓度梯度运出细胞C.在主动运输中协助物质进出细胞的蛋白质是载体蛋白D.物质依靠通道蛋白进出细胞的方式属于被动运输5.下列关于物质鉴定实验的叙述,正确的是()A.鉴定还原糖实验,配制好的斐林试剂可以长期保存备用B.鉴定蛋白质实验,试剂与蛋白质反应需要进行水浴加热C.鉴定脂肪实验,对组织切片进行染色的时间没有限制D.鉴定淀粉实验,所用材料应富含淀粉且颜色要尽可能浅6.如图表示水稻根尖细胞呼吸与氧气浓度的关系,下列说法正确的是A.酵母菌的细胞呼吸和根尖细胞的呼吸类型相同B.氧气浓度为a时,Ⅰ、Ⅲ单位时间内产生的能量相等C.根尖细胞的细胞呼吸与细胞内的吸能反应直接联系D.曲线Ⅲ中产生能量最多的场所主要是线粒体基质二、综合题:本大题共4小题7.(9分)我国干旱、半干旱区占国土总面积的47%,这些区域水资源贫乏,植被稀疏,生态环境脆弱,加之多年来人为活动(过度放牧、开荒种田等)的干扰,使得本来就脆弱的生态系统遭到了更为严重的破坏。为了恢复生态,内蒙古锡林郭勒在三种典型草原地带进行为期17年的封育政策,群落变化如表所示:典型草原地带不同植l物群落封育变化群落类型本氏针茅群落大针茅群落百里香群落坡向NESENS生长年限第1年第18年第1年第18年第1年第18年第1年第18年第1年第18年封育植物种数/种.m-261551351989118覆盖度/%25952080206520352055草层高/m105455585251839产草量/kg.hm-275060505004500550420055015507502255对照植物种数/种.m-25656573589覆盖度/%25302030203020202025草层高/m9756775539产草量/kg.hm~2700450450430490460500510550420注:NE、SE、N、S分别代表朝向东北、东南、北、南(1)封育是恢复生态学的常用手段,恢复生态学主要利用的是___________________理论,充分依靠生态系统自身的能力尽快恢复。锡林郭勒部分地区实行封育而非发展单一的人工林,这遵循了生态工程的________________________原理。(2)用样方法对植物种群密度进行调查,应注意_______________,目的是______________。(3)坡向NE的本氏针茅草群落生产力最高,应该是该区域__________________这一自然因素相对充裕。研究发现,封育措施较大地改良了土壤,这体现了生物多样性的____________________________价值。(4)在半干旱区,草原生态系统比农田生态系统抵抗干扰的能力____________(填“强”或“弱”或“差别不大”),因为_____________________________________________________。8.(10分)2019新型冠状病毒(2019-nCoV),因2019年武汉病毒性肺炎病例而被发现,2020年1月12日被世界卫生组织命名。冠状病毒是一个大型病毒家族,已知可引起感冒以及中东呼吸综合征(MERS)和严重急性呼吸综合征(SARS)等较严重疾病。新型冠状病毒是以前从未在人体中发现的冠状病毒新毒株。请回答以下问题:(1)新型冠状病毒属于________生物(填“细胞”或“非细胞”),只有侵入人体活细胞内才具有生命特征,它可以通过__________这一可遗传变异产生新品种。将其核酸进行初步水解,得到的产物是_________________。(2)当新型冠状病毒侵入人体后,首先通过_________免疫的作用阻止病毒的散播感染,当病毒进入肺细胞后,________能识别被寄生的宿主细胞,并与之________;新型冠状病毒被释放出来,再由体液免疫产生的________所凝集,使之失去侵染能力,最后被吞噬细胞吞噬消化。(3)已被治愈的患者短期内不容易再次被冠状病毒感染,这是由于他们体内产生了________,当再次接触冠状病毒抗原时可以迅速增殖分化为浆细胞,进而产生更强更快的免疫效应。9.(10分)缺乏腺苷酸脱氨酶(ada)基因的人体,不能够抵抗任何微生物的感染,只能生活在无菌环境。科学家对患者的基因治疗过程如图,使患者的免疫功能得到了很好的修复。(1)若病毒a侵染人体细胞,引起人体发生相应的免疫反应是_______。(2)从分子水平上来看,病毒b与病毒a的根本变化在于________。(3)为保障治疗的安全性,科学家已将病毒a基因组RNA上编码病毒球壳的蛋白基因一律删除掉(基因编辑),以降低病毒的潜在风险。这种潜在的风险是指________。(4)如图治疗过程中,利用基因编辑技术对T淋巴细胞进行改造和修饰,然后再重新注入人体,会不会造成人类基因污染?______。10.(10分)转染是指利用一定手段使外源基因进入细胞中并稳定表达的过程。腺病毒载体常用于外源基因的转染,这在基因治疗、疫苗研发和动物细胞培养的可视化监控方面有着广阔的应用前景。回答下列问题。(l)腺病毒营____活,用作转染的腺病毒载体上具有____识别和结合的部位,是外源基因在受体细胞中启动表达的关键。(2)构建腺病毒载体时,先用同种限制酶对腺病毒DNA和外源基因进行切割,可获得相同的____,再用DNA连接酶恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的___。(3)通过腺病毒载体将蓝色荧光基因转染山羊耳缘成纤维细胞,利用蓝色荧光直观监控细胞的体外培养过程。首先将山羊耳缘组织块用胰蛋白酶或_______处理得到单个成纤维细胞,培养至贴满瓶壁时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为________。这时,重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续进行_______培养。培养时使用的合成培养基,通常需加入___等一些天然成分,以满足细胞对营养物质的全面需求。11.(15分)Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进。研究发现,GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子1(ICAM-1),导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体,对治疗GD进行了尝试。(1)用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠,几周后取这些免疫小鼠的血清,分别加入多孔培养板的不同孔中,多孔培养板中需加入________以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果,选出抗原-抗体反应最________(强/弱)的培养孔所对应的小鼠M。(2)取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液,与实验用骨髓瘤细胞进行融合,用选择培养基筛选得到具有________能力的细胞。核苷酸合成有两个途径,物质A可以阻断其中的全合成途径(如下图)。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶,制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。可用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”筛选特定的杂交瘤细胞。融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养,一段时间后培养基中________(有/无)骨髓瘤细胞生长,说明培养基符合实验要求。杂交瘤细胞可以在HAT培养基上大量繁殖的原因是________________。(3)将获得的上述细胞在多孔培养板上培养,用ICAM-1检测,从中选择________的杂交瘤细胞,植入小鼠腹腔中克隆培养,一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。(4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用,可将若干GD模型小鼠等分为三组,请补充下表中的实验设计。对照组(A)131I治疗组(B)单克隆抗体治疗组(C)给GD模型小鼠腹腔注射1.1mL无菌生理盐水给GD模型小鼠腹腔注射溶于1.1mL无菌生理盐水的131I________
参考答案一、选择题:(共6小题,每小题6分,共36分。每小题只有一个选项符合题目要求)1、A【解析】
放射性同位素标记法在生物学中具有广泛的应用:(1)用35S标记噬菌体的蛋白质外壳,用32P标记噬菌体的DNA,分别侵染细菌,最终证明DNA是遗传物质;(2)用3H标记氨基酸,探明分泌蛋白的合成与分泌过程;(3)15N标记DNA分子,证明了DNA分子的复制方式是半保留复制;(4)卡尔文用14C标记CO2,研究出碳原子在光合作用中的转移途径,即CO2→C3→有机物;(5)鲁宾和卡门用18O标记水,证明光合作用所释放的氧气全部来自于水。【详解】A、用18O标记的水培养植物细胞,光反应过程中H218O光解可产生18O2,有氧呼吸第二阶段H218O与丙酮酸反应可产生C18O2,A正确;B、碘是合成甲状腺激素的原料,用含有放射性碘的饲料饲喂蝌蚪,体内甲状腺激素中可能检测到放射性,B错误;C、噬菌体的蛋白质外壳含S,DNA含P,噬菌体在大肠杆菌内增殖时,利用自身遗传物质做模板、以大肠杆菌内的原料和能量等合成噬菌体的DNA和蛋白质外壳,所以用无放射性噬菌体侵染被32P和35S标记的大肠杆菌,子代噬菌体的DNA中含有32P,蛋白质外壳含35S,C错误;D、蔗糖是在叶绿体外生成的,D错误。故选A。2、D【解析】
该题主要考查了有丝分裂和减数分裂中染色体的行为变化和数量变化,同时对比了有丝分裂和减数分裂的区别。基因重组在自然情况下主要发生于减数分裂过程,识记有丝分裂和减数分裂过程是本题的解题关键。【详解】A、处于减数第二次分裂前期、中期的细胞都含有姐妹染色单体,但细胞中不含同源染色体,A错误;B、含有两条X染色体的细胞包括初级卵母细胞、处于有丝分裂后期的雄性体细胞或原始生殖细胞、减数第二次分裂后期的次级卵母细胞/第一极体,B错误;C、果蝇有丝分裂后期与减数第二次分裂后期都发生着丝点分离、姐妹染色单体分离等行为,但有丝分裂后期细胞中含有16条染色体,减数第二次分裂后期的细胞中含有8条染色体,C错误;D、正常情况有丝分裂过程不会发生基因重组,D正确;故选D。3、B【解析】
核糖体是由两个大小亚基构成,主要成分是rRNA和蛋白质,因此题干信息中RNA-蛋白质复合物即指核糖体,据此答题。【详解】A、rRNA与蛋白质结合形成细胞器—核糖体,在核糖体上发生的氨基酸脱水缩合可以生成水分子,A正确;B、RNA聚合酶是一种蛋白质,它与DNA结合,催化DNA到RNA的转录,B错误;C、真核细胞和原核细胞都有RNA-蛋白质复合物—核糖体,C正确;D、RNA病毒的RNA可以在逆转录酶的催化下,逆转录出互补的DNA分子单链,D正确。故选B。4、A【解析】
1、小分子物质跨膜运输的方式和特点:名称运输方向载体能量实例自由扩散(简单扩散)高浓度低浓度不需不需水、CO2、O2、甘油,苯、酒精等协助扩散(易化扩散)高浓度低浓度需要不需红细胞吸收葡萄糖主动运输低浓度高浓度需要需要小肠绒毛上皮细胞吸收氨基酸、葡萄糖等2、大分子的运输方式:胞吞和胞吐:大分子物质进出细胞的方式,不需要载体,但需要能量,体现了细胞膜的流动性。【详解】A、无转运蛋白参与的物质进出细胞方式有自由扩散和胞吞、胞吐,A错误;B、Na+通过载体蛋白的协助逆浓度梯度运出细胞,通道蛋白只能进行顺浓度梯度运输,B正确;C、在主动运输中协助物质进出细胞的蛋白质是载体蛋白,C正确;D、物质依靠通道蛋白进出细胞的方式是协助扩散,属于被动运输,D正确。故选A。5、D【解析】
生物组织中化合物的鉴定:(1)斐林试剂可用于鉴定还原糖,在水浴加热的条件下,溶液的颜色变化为砖红色(沉淀)。斐林试剂只能检验生物组织中还原糖(如葡萄糖、麦芽糖、果糖)存在与否,而不能鉴定非还原性糖(如淀粉)。(2)蛋白质可与双缩脲试剂产生紫色反应。(3)脂肪可用苏丹Ⅲ染液(或苏丹Ⅳ染液)鉴定,呈橘黄色(或红色)。(4)碘液可以将淀粉染成蓝色。【详解】A、斐林试剂需要现配现用,不能长期保存,A错误;B、蛋白质的鉴定用双缩脲试剂,不需要水浴,B错误;C、脂肪的鉴定用苏丹Ⅲ染色3分钟,或者苏丹Ⅳ染色1分钟,C错误;D、淀粉遇碘变成蓝色,所以要求实验材料富含淀粉,且自身颜色越浅越好,防止对实验产生干扰,D正确。故选D。【点睛】本题考查生物组织中化合物的鉴定,对于此类试题,需要考生注意的细节较多,如实验的原理、实验采用的试剂及试剂的使用方法、实验现象等,需要考生在平时的学习过程中注意积累。6、A【解析】
水稻根尖细胞的有氧呼吸和无氧呼吸过程:(1)有氧呼吸可以分为三个阶段:第一阶段:在细胞质的基质中,1C6H12O6(葡萄糖)→2C3H4O3(丙酮酸)+4[H]+少量能量(2ATP)第二阶段:在线粒体基质中进行,2C3H4O3(丙酮酸)+6H2O→20[H]+6CO2+少量能量(2ATP)第三阶段:在线粒体的内膜上,24[H]+6O2→12H2O+大量能量(34ATP)。(2)无氧呼吸的二个阶段:第一阶段:在细胞质的基质中,1C6H12O6(葡萄糖)→2C3H4O3(丙酮酸)+4[H]+少量能量(2ATP)第二阶段:在细胞质基质,2C3H4O3(丙酮酸)+4[H]→2C2H5OH(酒精)+2CO2【详解】酵母菌的细胞和根尖细胞均既进行有氧呼吸,也进行无氧呼吸(产物都是酒精和二氧化碳),A正确;氧气浓度为a时,Ⅰ、Ⅲ单应时间内产生的CO2量相等,Ⅰ是无氧呼吸,产生能量少,Ⅲ是有氧呼吸,产生能量多,B错误;根尖细胞的呼吸作用产生ATP与细胞内的放能反应直接联系,C错误;曲线Ⅲ中产生能量最多的场所主要是线粒体内膜,D错误。【点睛】注意:当有氧呼吸和无氧呼吸产生的CO2量相等时,由于前者消耗的葡萄糖较后者少,所以有氧呼吸的强度小于无氧呼吸的强度。二、综合题:本大题共4小题7、群落演替物种多样性随机取样为了确保所选择的样方具有代表性,不受主观因素的影响,使统计的结果(估算值)能更接近真实的情况水分间接强草原生态系统的组分更多,食物网更复杂,自我调节能力更强【解析】
1、样方法注意事项:(适用范围:植物种群密度,昆虫卵的密度,蚜虫、跳蝻的密度等。)(1)样方应随机选取(2)样方面积大小要合适(3)样方数目:总体面积大要多取,总体面积小可少取。(4)样本统计:位于样方边线上的植物计数相邻两边及其交点上的植物;不同生长期的个体都应统计。2、生物多样性的价值:(1)直接价值:对人类有食用、药用和工业原料等使用意义,以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的;(2)间接价值:对生态系统起重要调节作用的价值(生态功能);(3)潜在价值:目前人类不清楚的价值。3、生态系统所具有的保持或恢复自身结构和功能相对稳定的能力,能力大小由生态系统的组分和食物网的复杂程度有关,生态系统的组分越多和食物网越复杂自我调节能力就越强。但自我调节能力是有限度的,超过自我调节能力限度的干扰会使生态系统崩溃。【详解】(1)恢复生态学主要利用的是生物群落演替理论,特别强调生态系统的自我调节能力与生物的适应性,充分依靠生态系统自身的能力,并辅以有效的人为手段,从而尽快使生态系统从受损的退化状态恢复到正常的健康状态。锡林郭勒部分地区实行封育而非发展单一的人工林,这遵循了生态工程的物种多样性的原理。(2)用样方法对植物种群密度进行调查时,为了确保所选择的样方具有代表性,不受主观因素的影响,使统计的结果(估算值)能更接近真实的情况,因此应注意做到随机取样。(3)根据题意可知,内蒙古锡林郭勒在三种典型草原地带区域水资源贫乏,封育后坡向NE的本氏针茅草群落生产力最高,说明该区域水分这一自然因素相对充裕。封育措施较大地改良了土壤,这属于生态功能,因此体现了生物多样性的间接价值。(4)生态系统抵抗力稳定性的大小与生态系统的自我调节能力有关,草原生态系统的组分更多,食物网更复杂,自我调节能力更强,而农田生态系统物种单一,食物网较为简单,自我调节能力较差,因此草原生态系统的抵抗力稳定性强于农田生态系统。【点睛】本题以内蒙古锡林郭勒在三种典型草原地带封育实例为背景考查生态学的知识点,要求学生掌握生态工程的基本原理和封育依据的原理,把握样方法的操作过程和注意事项,识记生物多样性的价值和实例,理解生态系统稳定性的原因和自我调节能力之间的关系,这是该题考查的重点。8、非细胞基因突变4种核糖核苷酸体液免疫效应T细胞密切接触,使其裂解死亡抗体记忆细胞【解析】
体液免疫和细胞免疫。1.体液免疫过程为:大多数病原体经过吞噬细胞等的摄取和处理,暴露出这种病原体所特有的抗原,将抗原传递给T细胞,刺激T细胞产生淋巴因子,少数抗原直接刺激B细胞,B细胞受到刺激后,在淋巴因子的作用下,开始一系列的增殖分化,大部分分化为浆细胞产生抗体,小部分形成记忆细胞。抗体可以与病原体结合,从而抑制病原体的繁殖和对人体细胞的黏附。2.细胞免疫过程:抗原经吞噬细胞摄取、处理和呈递给T淋巴细胞,接受抗原刺激后T淋巴细胞悔增殖、分化产生记忆细胞和效应T细胞,效应T细胞与相应的靶细胞密切接触,进而导致靶细胞裂解死亡,抗原暴露出来,此时体液中抗体与抗原发生特异性结合形成细胞团或沉淀,最后被吞噬细胞吞噬消化。3.记忆细胞可以在抗原消失后很长时间内保持对这种抗原的记忆,当再接触这种抗原时,能迅速增殖、分化,快速产生大量的抗体,故二次免疫反应快而且强烈。【详解】(1)新型冠状病毒属于非细胞生物,是专性寄生物,其可遗传变异来源只有基因突变,因此,它可以通过基因突变这一可遗传变异产生新品种。因其遗传物质是RNA,故将其核酸进行初步水解,可得到的产物是4种核糖核苷酸。(2)由于病毒是胞内寄生物,因此当新型冠状病毒侵入人体后,需要通过体液免疫和细胞免疫共同将其消灭掉。首先通过体液免疫的作用阻止病毒的散播感染,当病毒进入肺细胞后,效应T细胞能识别被寄生的宿主细胞,并与之密切接触,使其裂解死亡;新型冠状病毒被释放出来,再由体液免疫产生的抗体所凝集,使之失去侵染能力,最后被吞噬细胞吞噬消化。(3)已被治愈的患者短期内不容易再次被冠状病毒感染,这是由于他们体内产生了对冠状病毒的记忆,即机体内含有相应的记忆细胞,当再次接触冠状病毒抗原时记忆细胞可以迅速增殖分化为浆细胞,浆细胞会分泌大量抗体,进而产生更强更快的免疫效应。【点睛】熟知细胞免疫和体液免疫的过程以及二次免疫的特点是解答本题的关键!病毒的生理特性也是本题的考查点。9、细胞免疫具有人体正常ada基因降低病毒侵染细胞的能力,从而减少病毒在宿主细胞中的增殖不会。利用病毒改造和修饰的是T淋巴细胞,不会通过生殖细胞而遗传给后代【解析】
基因治疗:把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的。过程①表示获取目的基因,然后将目的基因与病毒a相合形成病毒b,由此可看出运载体是病毒a,基因表达载体是病毒b,目的基因是腺苷酸脱氨酶(ada)基因;过程②表示将目的基因导入受体细胞(T淋巴细胞),常用显微注射法。过程③表示细胞的分离培养和细胞分化。【详解】(1)从图中分析可知,若病毒a侵染人体细胞,人体主要是通过T淋巴细胞对病毒a起免疫作用,因此属于细胞免疫;(2)从分子水平上可以看出病毒b与病毒a的不同地方是病毒b具有人体正常ada基因;(3)为保障治疗的安全性,科学家已将病毒a基因组RNA上编码病毒球壳的蛋白基因一律删除掉(基因编辑),以减少病毒的感染细胞能力,达到降低病毒在宿主细胞中的自我繁殖和侵入其他细胞能力;(4)如图治疗过程中,利用基因编辑技术对T淋巴细胞进行改造和修饰,然后再重新注入人体,不会造成人类基因污染,因为改造和修饰的是成体免疫细胞,不会通过生殖细胞而遗传给后代。【点睛】本题考查基因工程和免疫调节的相关知识,要求考生识记基因工程和免疫调节的知识,掌握基因工程的原理及操作步骤,了解基因工程的相关应用,尤其是基因治疗的相关知识,能从材料中获取相关的生物学信息,并能运用这些信息结合所学的知识解决相关的生物学问题。10、寄生RNA聚合酶黏性末端或平末端磷酸二酯键胶原蛋白酶细胞的接触抑制传代血清、血浆【解析】
1、基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。构建基因表达载体时需要用同种限制酶切割目的基因和载体,以产生相同的末端,然后用DNA连接酶连接,恢复被切开的核苷酸之间的磷酸二酯键,RNA聚合酶能够与启动子识别并结合催化转录的进行,这是是外源基因在受体细胞中启动表达的关键。2、动物细胞培养的流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。【详解】(1)腺病毒属于动物病毒,其无细胞结构,营寄生生活,必须寄生于宿主的活细胞中才能繁殖;用作转染的腺病毒载体上应具有RNA聚合酶识别和结合的部位启动子,这样才能驱动目的基因转录形成mRNA,最终合成相应的蛋白质。(2)构建腺病毒载体时,先用同种限制酶对腺病毒DNA和外源基因进行切割,可以获得相同的黏性末端或平末端,再用DNA连接酶恢复被限制酶切开的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。(3)对山羊耳缘组织块用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理得到单个成纤维细胞,便于细胞与培养液充分接触;培养至贴满瓶壁时,细胞就
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