核酸的结构和功能

第二章

核酸的结构和功能StructureandFunctionofNucleicAcid生化教研室本文档共132页；当前第1页；编辑于星期六\7点12分核酸(nucleicacidNA)

是存在于细胞中的以核苷酸为基本组成单位的一类大分子酸性物质，携带和传递遗传信息。本文档共132页；当前第2页；编辑于星期六\7点12分核酸的分类及分布存在于细胞核和线粒体分布于细胞质、细胞核、线粒体(deoxyribonucleicacid,DNA)(ribonucleicacid,RNA)脱氧核糖核酸

核糖核酸携带遗传信息，并通过复制传递给下一代。是DNA转录的产物，参与遗传信息的复制与表达。某些病毒RNA也可作为遗传信息的载体本文档共132页；当前第3页；编辑于星期六\7点12分1868年FridrichMiescher从脓细胞中提取“核素”。1944年Avery等人利用致病肺炎球菌中提取出来的DNA，使非致病肺炎球菌的遗传性状发生改变而成为致病菌，从而证实DNA是遗传物质。1952年Hershey等人用35S、32P标记噬菌体的蛋白质和DNA病感染宿主细菌大肠杆菌并进行传代，结果发现子代只含有32P标记的DNA，不含有35S标记的蛋白质，进一步证明DNA是遗传物质的基础，具有传递遗传信息的功能核酸的发现本文档共132页；当前第4页；编辑于星期六\7点12分第一节核酸的化学组成及其一级结构TheChemicalComponentandPrimaryStructureofNucleicAcid本文档共132页；当前第5页；编辑于星期六\7点12分一、核苷酸是构成核酸的基本组成单位

1、元素组成C、H、O、N、P（9～10%）本文档共132页；当前第6页；编辑于星期六\7点12分核酸的水解产物：核酸核苷酸磷酸核苷戊糖含氮碱（碱基）核糖脱氧核糖嘌呤碱嘧啶碱本文档共132页；当前第7页；编辑于星期六\7点12分2、分子组成碱基(base)：嘌呤碱、嘧啶碱戊糖(ribose)：核糖、脱氧核糖磷酸(phosphate)本文档共132页；当前第8页；编辑于星期六\7点12分碱基(base)是含氮的杂环化合物。碱基嘌呤嘧啶腺嘌呤鸟嘌呤尿嘧啶胸腺嘧啶胞嘧啶存在于DNA和RNA中仅存在于RNA中仅存在于DNA中碱基本文档共132页；当前第9页；编辑于星期六\7点12分嘌呤(purine，Pu)

腺嘌呤(adenine,A)（6－氨基嘌呤）鸟嘌呤(guanine,G)本文档共132页；当前第10页；编辑于星期六\7点12分嘧啶(pyrimidine)尿嘧啶(uracil,U)(2,4-二氧嘧啶)ONHOHN胸腺嘧啶(thymine,T)（5-甲基尿嘧啶）NHOOCH3HNNN132456胞嘧啶(cytosine,C)(2-氧，4-氨基嘧啶)NHNH2NO本文档共132页；当前第11页；编辑于星期六\7点12分本文档共132页；当前第12页；编辑于星期六\7点12分本文档共132页；当前第13页；编辑于星期六\7点12分本文档共132页；当前第14页；编辑于星期六\7点12分结构与命名：核苷酸：AMP,GMP,UMP,CMP脱氧核苷酸：dAMP,dGMP,dTMP,dCMP

磷酸本文档共132页；当前第15页；编辑于星期六\7点12分多磷酸核苷酸本文档共132页；当前第16页；编辑于星期六\7点12分体内重要的游离核苷酸及其衍生物含核苷酸的生物活性物质：NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD等都含有AMP

多磷酸核苷酸：NMP、NDP、NTP

环化核苷酸:cAMP、cGMPAMPADPATPcAMPNADP+NAD+本文档共132页；当前第17页；编辑于星期六\7点12分二、DNA是脱氧核苷酸通过3’,5’-磷酸二酯键

连接形成的大分子一个脱氧核苷酸3的羟基与另一个核苷酸5的α-磷酸基团缩合形成磷酸二酯键。

多个脱氧核苷酸通过磷酸二酯键构成了具有方向性的线性分子，称为多聚脱氧核苷酸，即DNA链。本文档共132页；当前第18页；编辑于星期六\7点12分5´-末端3´-末端CGA磷酸二酯键磷酸二酯键本文档共132页；当前第19页；编辑于星期六\7点12分交替的磷酸基团和戊糖构成了DNA骨架(backbone)。DNA链的方向是5

→

3本文档共132页；当前第20页；编辑于星期六\7点12分三、RNA也是具有3’,5’-磷酸二酯键的线性大分子RNA也是多个核苷酸分子通过酯化反应形成的线性大分子，并且具有方向性；RNA的戊糖是核糖；RNA的嘧啶是胞嘧啶和尿嘧啶。本文档共132页；当前第21页；编辑于星期六\7点12分DNA是脱氧核苷酸通过3’,5’-磷酸二酯键

连接形成的大分子;RNA是多个核苷酸通过3’,5’-磷酸二酯键

连接形成的大分子1997NO20A、2002NO20A核酸中核苷酸之间的连接方式是

A．2’，3’磷酸二酯键B．3’，5’磷酸二酯键C．2’，5’磷酸二酯键

D．1’，5’糖苷键E．氢键本文档共132页；当前第22页；编辑于星期六\7点12分定义核酸中核苷酸的排列顺序。由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列。5′端3′端CGA四、核酸的一级结构是核苷酸的排列顺序本文档共132页；当前第23页；编辑于星期六\7点12分AGP5PTPGPCPTPOH3书写方法5pApCpTpGpCpT-OH

35

ACTGCT

3本文档共132页；当前第24页；编辑于星期六\7点12分核酸分子的大小常用碱基(base或kilobase)数目来表示。小的核酸片段(<50bp)常被称为寡核苷酸(oligonucleotide)。自然界中的DNA和RNA的长度可以高达几十万个碱基。

本文档共132页；当前第25页；编辑于星期六\7点12分DNA和RNA的区别核糖

G、C、A、URNA脱氧核糖

G、C、A、TDNA碱基核糖核酸本文档共132页；当前第26页；编辑于星期六\7点12分第二节DNA的空间结构与功能DimensionalStructureandFunctionofDNA本文档共132页；当前第27页；编辑于星期六\7点12分本文档共132页；当前第28页；编辑于星期六\7点12分DNA的空间结构又分为二级结构(secondarystructure)和高级结构。DNA的空间结构(spatialstructure)构成DNA的所有原子在三维空间具有确定的相对位置关系。本文档共132页；当前第29页；编辑于星期六\7点12分一、DNA的二级结构是双螺旋结构本文档共132页；当前第30页；编辑于星期六\7点12分本文档共132页；当前第31页；编辑于星期六\7点12分不同生物种属的DNA的碱基组成不同同一个体的不同器官或组织的DNA碱基组成相同。[A]=[T]，[G]=[C]Chargaff规则（一）DNA双螺旋结构的研究背景获得了高质量的DNA分子的X射线衍射照片。提出了DNA分子双螺旋结构(doublehelix)模型。本文档共132页；当前第32页；编辑于星期六\7点12分2007NO164A按照Chargaff规则,下列关于DNA碱基的组成的叙述,正确的是A与C的含量相等

B.A+T=G+CC.同一生物体,不同组织的DNA碱基组成不同D.不同生物体来源的DNA,碱基组成不同本文档共132页；当前第33页；编辑于星期六\7点12分2011NO26A一个DNA分子中，若G所占的摩尔比是32.8%，则A的摩尔比应是A．67.2%B．65.6%C．32.8%D．17.2%本文档共132页；当前第34页；编辑于星期六\7点12分双螺旋结构的直径为2.37nm,螺距为3.54nm。（二）DNA双螺旋结构模型要点1.DNA是反向平行、右手螺旋的双链结构脱氧核糖和磷酸组成亲水性骨架位于双螺旋外侧，疏水碱基位于内侧。双螺旋结构的表面形成了一个大沟和一个小沟。本文档共132页；当前第35页；编辑于星期六\7点12分本文档共132页；当前第36页；编辑于星期六\7点12分亲水性的骨架位于双链的外侧。疏水性的碱基位于双链的内侧。骨架与碱基本文档共132页；当前第37页；编辑于星期六\7点12分2.DNA双链之间形成了互补碱基对碱基配对关系称为互补碱基对(complementarybasepair)。DNA的两条链则互为互补链(complementarystrand)。碱基对平面与螺旋轴垂直。本文档共132页；当前第38页；编辑于星期六\7点12分碱基互补配对:鸟嘌呤/胞嘧啶本文档共132页；当前第39页；编辑于星期六\7点12分碱基互补配对:腺嘌呤/胸腺嘧啶本文档共132页；当前第40页；编辑于星期六\7点12分相邻两个碱基对会有重叠，产生了疏水性的碱基堆积力(basestackinginteraction)。碱基堆积力和互补碱基对的氢键共同维系着DNA结构的稳定。3.疏水作用力和氢键共同维系着DNA双螺旋结构的稳定。本文档共132页；当前第41页；编辑于星期六\7点12分碱基堆积作用力本文档共132页；当前第42页；编辑于星期六\7点12分2000N021．下列关于DNA双螺旋结构模型的叙述正确的是

A．由两条完全相同的多核苦酸链绕同一中心轴盘旋成双螺旋

B．一条链是左手螺旋，另一条链为右手螺旋

C．A十G与C十T的比值为1

D．A十T与G十C的比值为1

E．两条链的碱基间以共价键相连

本文档共132页；当前第43页；编辑于星期六\7点12分（三）DNA双螺旋结构的多样性本文档共132页；当前第44页；编辑于星期六\7点12分旋向螺距(nm)碱基数（每圈）螺旋直径（nm）骨架走行存在条件A型右手2.3112.5平滑体外脱水B型右手3.4102.3平滑DNA生理条件Z型左手4.5121.8锯齿型CG序列三种DNA构型的比较本文档共132页；当前第45页；编辑于星期六\7点12分（四）DNA的多链螺旋结构在酸性的溶液中，胞嘧啶的N-3原子被质子化，可与鸟嘌呤的N-7原子形成氢键；同时，胞嘧啶的N-4的氢原子也可与鸟嘌呤的O-6形成氢键，这种氢键被称为Hoogsteen氢键。

Hoogsteen氢键Hoogsteen氢键，不破坏Watson-Crick氢键，由此形成了C＋GC的三链结构(triplex)。本文档共132页；当前第46页；编辑于星期六\7点12分三链结构本文档共132页；当前第47页；编辑于星期六\7点12分鸟嘌呤之间通过Hoogsteen氢键形成特殊的四链结构(tetraplex)。四链结构本文档共132页；当前第48页；编辑于星期六\7点12分真核生物DNA3-末端是富含GT的多次重复序列，因而自身形成了折叠的四链结构。本文档共132页；当前第49页；编辑于星期六\7点12分二、DNA的高级结构是超螺旋结构超螺旋结构(superhelix或supercoil)DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。

正超螺旋(positivesupercoil)盘绕方向与DNA双螺旋方同相同。

负超螺旋(negativesupercoil)盘绕方向与DNA双螺旋方向相反。

自然界本文档共132页；当前第50页；编辑于星期六\7点12分本文档共132页；当前第51页；编辑于星期六\7点12分意义DNA超螺旋结构整体或局部的拓扑学变化及其调控对于DNA复制和RNA转录过程具有关键作用。本文档共132页；当前第52页；编辑于星期六\7点12分（一）原核生物DNA的环状超螺旋结构原核生物DNA多为环状，以负超螺旋的形式存在，平均每200碱基就有一个负超螺旋形成。本文档共132页；当前第53页；编辑于星期六\7点12分（二）真核生物DNA的高度有序和高度致密的结构真核生物DNA以非常有序的形式存在于细胞核内。在细胞周期的大部分时间里，DNA以松散的染色质(chromatin)形式存在，在细胞分裂期，则形成高度致密的染色体(chromosome)。

本文档共132页；当前第54页；编辑于星期六\7点12分DNA染色质呈现出的串珠样结构。染色质的基本单位是核小体(nucleosome)。DNA染色质的电镜图像本文档共132页；当前第55页；编辑于星期六\7点12分各两分子构成八聚体的核心组蛋白，DNA双螺旋缠绕在这一核心上形成核小体的核心颗粒。

DNA：约150bpH1＋60bpDNA连接区

H2AH2BH3H4组蛋白：(histone)核小体的组成真核生物染色体由DNA和蛋白质构成，其基本单位是核小体(nucleosome)。核小体的组成本文档共132页；当前第56页；编辑于星期六\7点12分核小体串珠样的结构本文档共132页；当前第57页；编辑于星期六\7点12分本文档共132页；当前第58页；编辑于星期六\7点12分双链DNA的折叠和组装本文档共132页；当前第59页；编辑于星期六\7点12分DNA经过多次折叠，被压缩了8000～10000倍，组装在直径只有为数微米的细胞核内。本文档共132页；当前第60页；编辑于星期六\7点12分本文档共132页；当前第61页；编辑于星期六\7点12分真核生物的染色体本文档共132页；当前第62页；编辑于星期六\7点12分DNA的基本功能是以基因的形式荷载遗传信息，并作为基因复制和转录的模板。它是生命遗传的物质基础，也是个体生命活动的信息基础。基因从结构上定义，是指DNA分子中的特定区段，其中的核苷酸排列顺序决定了基因的功能。三、DNA是遗传信息的物质基础本文档共132页；当前第63页；编辑于星期六\7点12分第三节

RNA的结构与功能StructureandFunctionofRNA本文档共132页；当前第64页；编辑于星期六\7点12分RNA与蛋白质共同负责基因的表达和表达过程的调控。RNA通常以单链的形式存在，但有复杂的局部二级结构或三级结构。RNA比DNA小的多。RNA的种类、大小和结构远比DNA表现出多样性。本文档共132页；当前第65页；编辑于星期六\7点12分RNA的种类、分布、功能本文档共132页；当前第66页；编辑于星期六\7点12分hnRNA内含子(intron)mRNA*mRNA成熟过程

外显子(exon)hnRNA是mRNA的前体，

由内含子(intron)和外显子(exon)。即氨基酸的编码区和非编码区一、mRNA是蛋白质合成中的模板本文档共132页；当前第67页；编辑于星期六\7点12分真核生物mRNA结构特点1、5´末端帽结构：m7GpppNm-mRNA的帽结构可以与帽结合蛋白(capbindingprotein，CBP)结合本文档共132页；当前第68页；编辑于星期六\7点12分加帽过程本文档共132页；当前第69页；编辑于星期六\7点12分2、3´末端多聚A尾：AAA……An

大多数真核mRNA的3´末端有一个多聚腺苷酸(polyA)

结构，称为多聚A尾。多聚A尾结构在细胞内与polyA结合蛋白（polyA-bingprotein，PABP）结合，每10-20个腺苷酸结合一个。本文档共132页；当前第70页；编辑于星期六\7点12分加尾过程本文档共132页；当前第71页；编辑于星期六\7点12分mRNA核内向胞质的转位mRNA的稳定性维系翻译起始的调控帽子结构和多聚A尾的功能本文档共132页；当前第72页；编辑于星期六\7点12分从AUG开始，每三个核苷酸为一组编码了一个氨基酸，称为三联体密码(codon)。位于起始密码子和终止密码子之间的核苷酸序列称为开放阅读框(openreadingframe,ORF)，决定了多肽链的氨基酸序列。本文档共132页；当前第73页；编辑于星期六\7点12分mRNA的功能

蛋白质合成的直接模板DNAmRNA蛋白质转录翻译原核细胞

细胞质细胞核DNA内含子外显子转录转录后剪接转运mRNAhnRNA翻译蛋白质真核细胞

本文档共132页；当前第74页；编辑于星期六\7点12分二、tRNA是蛋白质合成中的氨基酸载体tRNA的一级结构特点核苷酸在74－95之间(分子量最小)

含10~20%稀有碱基，如DHU3´末端为CCA-OH5´末端大多数为G

具有TC本文档共132页；当前第75页；编辑于星期六\7点12分（一）tRNA中含有多种稀有碱基本文档共132页；当前第76页；编辑于星期六\7点12分（二）tRNA具有茎环结构tRNA的二级结构——三叶草形氨基酸臂DHU环反密码环TψC环附加叉接纳茎反密码环附加叉本文档共132页；当前第77页；编辑于星期六\7点12分tRNA的反密码子环上有一个由三个核苷酸构成的反密码子(anticodon)。tRNA上的反密码子依照碱基互补的原则识别mRNA上的密码子。tRNA的反密码子识别mRNA的密码子本文档共132页；当前第78页；编辑于星期六\7点12分*tRNA的三级结构——倒L形tRNA的功能转运氨基酸的工具本文档共132页；当前第79页；编辑于星期六\7点12分核蛋白体RNA(ribosomalRNA，rRNA)是细胞内含量最多的RNA(>80％)。rRNA与核蛋白体蛋白结合组成核蛋白体(ribosome)，为蛋白质的合成提供场所。三、以rRNA为组分的核蛋白体是

蛋白质合成的场所本文档共132页；当前第80页；编辑于星期六\7点12分核蛋白体的组成*rRNA的种类（根据沉降系数S）原核生物：

16SrRNA；

23SrRNA、5SrRNA真核生物：

18SrRNA；

28SrRNA、5.8SrRNA、5SrRNA本文档共132页；当前第81页；编辑于星期六\7点12分本文档共132页；当前第82页；编辑于星期六\7点12分大肠杆菌的核蛋白体本文档共132页；当前第83页；编辑于星期六\7点12分rRNA的二级结构

——呈花状rRNA的功能：

参与组成核蛋白体，作为蛋白质生物合成的场所。大肠杆菌16SrRNA的二级结构本文档共132页；当前第84页；编辑于星期六\7点12分RNA组学是研究细胞内snmRNA的种类、结构和功能。同一生物体内不同种类的细胞、同一细胞在不同时空状态下snmRNAs表达谱的变化，以及与功能之间的关系。四、snmRNA参与了基因表达的调控细胞的不同部位存在的许多其他种类的小分子RNA，统称为非mRNA小RNA(smallnon-messengerRNAs,snmRNAs)。snmRNAs本文档共132页；当前第85页；编辑于星期六\7点12分核内小RNA核仁小RNA胞质小RNA催化性小RNA小片段干涉RNA

参与hnRNA和rRNA的转录后加工、转运及基因表达过程的调控。snmRNAs的种类snmRNAs的功能本文档共132页；当前第86页；编辑于星期六\7点12分核酶某些小RNA分子具有催化特定RNA降解的活性，这种具有催化作用的小RNA亦被称为核酶(ribozyme)或催化性RNA(catalyticRNA)。本文档共132页；当前第87页；编辑于星期六\7点12分siRNA是生物宿主对外源侵入的基因表达的双链RNA进行切割所产生的特定长度和特定核酸序列的小片段RNA。siRNA可以与外源基因表达的mRNA相结合，并诱发这些mRNA的降解。基于此机理，人们发明了RNA干扰(RNAinterference，RNAi)技术。小片段干扰RNA本文档共132页；当前第88页；编辑于星期六\7点12分原核生物基因表达的特异性五、核酸在真核细胞和原核细胞中表现了不同的时空特性本文档共132页；当前第89页；编辑于星期六\7点12分真核生物基因表达的特异性本文档共132页；当前第90页；编辑于星期六\7点12分总结1、RNA一般特性及与DNA比较RNA一般特性DNA一般特性碱基AGCUAGCT

戊糖β-D-核糖β-D-2脱氧核糖连接键3’,5’-磷酸二酯键3’,5’-磷酸二酯键分子量tRNA=2800（最小），mRNA=106rRNA=0.5-1.0ⅹ106>2ⅹ109碱基配对tRNA含稀有碱基最多（占10%-20%）不含稀有碱基，A=TG≡C形状单链，tRNA约75%碱基配对双螺旋结构结合物

rRNA与核蛋白体结合组蛋白、鱼精蛋白对碱水解敏感（RNA具有较强的酸性）不敏感分布主要在胞浆，核与核仁中丰富主要在核内、部分在线粒体本文档共132页；当前第91页；编辑于星期六\7点12分

2、RNA的种类和功能mRNAtRNArRNA功能合成蛋白质模板

转运氨基酸

组成核蛋白体比例占总RNA5%10%-15%>80%(最多)分子量1062800（最小）差异大。0.5-1.0ⅹ106二级结构单链三叶草形花状结构特点5´帽：

m7GpppN-

3´polyA尾有遗传密码半衰期最短（min-h）tRNA含稀有碱基最多（DHU环、反密码环、TψC环）大、小亚基大：5S/5.8S/28S小：18S分布胞核、胞液、Mt胞核、胞液、Mt胞核、胞液、Mt本文档共132页；当前第92页；编辑于星期六\7点12分2001NO143X．下列关于tRNA三叶草结构的叙述，正确的是

A．5’端第一个环是DHU环B．有一个密码子环C．有一个Tψ环D.3’端具有相同的CCA-OH结构2010NO26．下列选项中．符合tRNA结构特点的是A．5’末端的帽子B．3’末端多聚A尾C.反密码子D．开放阅读框本文档共132页；当前第93页；编辑于星期六\7点12分2011NO27．下列关于tRNA的叙述，错误的是A．分子中含稀有碱基较多B．分子序列中含有遗传密码C．tRNA分子具三叶草形二级结构D．所有tRNA的3’末端均为—CCA-OH本文档共132页；当前第94页；编辑于星期六\7点12分核酸的理化性质ThePhysicalandChemicalCharactersofNucleicAcid第四节本文档共132页；当前第95页；编辑于星期六\7点12分核酸的酸碱及溶解度性质核酸为多元酸，具有较强的酸性。核酸的高分子性质粘度：DNA>RNAdsDNA>ssDNA沉降行为:不同构象的核酸分子的沉降的速率有很大差异，这是超速离心法提取和纯化核酸的理论基础。核酸的一般理化性质本文档共132页；当前第96页；编辑于星期六\7点12分一、核酸的紫外吸收原因：碱基的共轭双键240～290nm强烈的吸收最大吸收值在260nm附近

（OD260）本文档共132页；当前第97页；编辑于星期六\7点12分本文档共132页；当前第98页；编辑于星期六\7点12分DNA或RNA的定量A260=1.0相当于50μg/ml双链DNA(dsDNA)40μg/ml单链DNA(ssDNAorRNA)20μg/ml寡核苷酸确定样品中核酸的纯度

纯

DNA:A260/A280=1.8＞1.8含有RNA污染

纯

RNA:A260/A280=2.0＜1.8含有蛋白质污染★紫外吸收性质-OD260的应用本文档共132页；当前第99页；编辑于星期六\7点12分二、DNA的变性(denaturation)是

双链解离为单链的过程定义：在某些理化因素作用下，DNA双链的互补碱基对之间的氢键断裂，使DNA双螺旋结构松散，成为单链的现象。方法：过量酸，碱，加热，变性试剂如尿素、酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等。变性后其它理化性质变化：

OD260粘度比旋度浮力密度酸碱滴定曲线改变 生物活性丧失本文档共132页；当前第100页；编辑于星期六\7点12分DNA变性的本质：双链间氢键的断裂变性复性本文档共132页；当前第101页；编辑于星期六\7点12分部分变性DNA的电镜图像本文档共132页；当前第102页；编辑于星期六\7点12分例：DNA变性引起紫外吸收值增高－增色效应DNA的紫外吸收光谱增色效应：DNA变性时其溶液OD260增高的现象。应用：监测DNA双链是否发生变性的常用指标本文档共132页；当前第103页；编辑于星期六\7点12分解链曲线：

如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260值作图，所得的曲线称为解链曲线。本文档共132页；当前第104页；编辑于星期六\7点12分

定义：DNA的热变性过程中，紫外光吸收值的变化（△A260

）达到最大变化值的一半时所对应的温度称为DNA的解链温度，又称融解温度。

＊Tm值与DNA分子中G+C含量成正比。

Tm=69.3+0.41×（G+C）\(G+C+A+T)×100%小于20bpTm=4（G+C）+2(A+T)解链温度(meltingtemperature,Tm）：本文档共132页；当前第105页；编辑于星期六\7点12分1998NO20．不同的核酸分子其解链温度（Tm）不同，以下关于Tm的说法正确的是

A．DNA中GC对比例愈高，Tm愈高B．DNA中AT对比例愈高，Tm愈高

C．核酸愈纯，Tm范围愈大D．核酸分子愈小，Tm范围愈大

E．Tm较高的核酸常常是RNA

本文档共132页；当前第106页；编辑于星期六\7点12分2009NO27下列DNA分子中，可以使Tm值达到最高的是：A、腺嘌呤和胸腺嘧啶含量为20%B、腺嘌呤和胸腺嘧啶含量为60%C、鸟嘌呤和胞嘧啶含量为30%D、鸟嘌呤和胞嘧啶含量为50%80、40、30、50本文档共132页；当前第107页；编辑于星期六\7点12分三、变性的核酸可以复性或形成杂交双链

DNA复性(renaturation)的定义在适当条件下，变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为复性。减色效应：DNA复性时，其溶液OD260降低。热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火(annealing)

。本文档共132页；当前第108页；编辑于星期六\7点12分本文档共132页；当前第109页；编辑于星期六\7点12分本文档共132页；当前第110页；编辑于星期六\7点12分研究DNA分子中某一种基因的位置鉴定两种核酸分子间的序列相似性检测某些专一序列在待检样品中存在与否是基因芯片技术的基础核酸分子杂交的应用本文档共132页；当前第111页；编辑于星期六\7点12分2005NO24．DNA受热变性时，出现的现象是

A、多聚核苷酸链水解成单核苷酸

B．在260nm波长处的吸光度增加

C．碱基对以共价键连

D．溶液黏度增加

E．最大光吸收峰波长发生转移本文档共132页；当前第112页；编辑于星期六\7点12分第五节

核酸酶

Nuclease本文档共132页；当前第113页；编辑于星期六\7点12分核酸酶

是指所有可以水解核酸的酶依据底物不同分类

DNA酶(deoxyribonuclease,DNase)：专一降解DNA

RNA酶

(ribonuclease,RNase)：专一降解RNA本文档共132页；当前第114页；编辑于星期六\7点12分依据切割部位不同核酸内切酶：

限制性核酸内切酶非特异性限制性核酸内切酶核酸外切酶：

5´→3´核酸外切酶3´→5´核酸外切酶。本文档共132页；当前第115页；编辑于星期六\7点12分5’5’3’3’外切位点外切位点内切位点内切位点本文档共132页；当前第116页；编辑于星期六\7点12分参与DNA的合成与修复及RNA合成后的剪接等重要基因复制和基因表达过程负责清除多余的、结构和功能异常的核酸，同时也可以清除侵入细胞的外源性核酸

降解食物中的核酸体外重组DNA技术中的重要工具酶细胞内外催化核酸的降解

核酸酶的功能

本文档共132页；当前第117页；编辑于星期六\7点12分

核酶催化性DNA(DNAzyme)

人工合成的寡聚脱氧核苷酸片段，也能序列特异性降解RNA。催化性RNA

(ribozyme)

作为序列特异性的核酸内切酶降解mRNA。本文档共132页；当前第118页；编辑于星期六\7点12分2007NO26．下列关于ribozyme的叙述，正确的是A．即核酸酶B．本质是蛋白质C．本质是核糖核酸D．其辅酶是辅酶A本文档共132页；当前第119页；编辑于星期六\7点12分思考题1．试从分子组成、分子结构、功能和存在部位四方面阐述DNA和RNA的区别。

2.

用32P标记的病毒感染细胞后产生有标记的后代，而用35S标记的病毒感染细胞则不能产生有标记的后代，为什么？

本文档共132页；当前第120页；编辑于星期六\7点12分1、下列哪种碱基只存在于mRNA

而不存在于DNA中

A．腺嘌呤

B．胞嘧啶

C．尿嘧啶

D．鸟嘌呤

E．胸腺嘧啶单选题本文档共132页；当前第121页；编辑于星期六\7点12分2、通常不存在RNA中，也不存在DNA中的碱基是

A．腺嘌呤

B．黄嘌呤

C．鸟嘌呤

D．胸腺嘧啶

E．尿嘧啶单选题本文档共132页；当前第122页；编辑于星期六\7点12分3、核酸中核苷酸之间的连接方式是

A．3′,5′－磷酸二酯键

B．糖苷键

C．2′,3′－磷酸二酯键

D．肽键

E．2′,5′－磷酸二酯键单选题本文档共132页；当前