药物分析抗生素类药物的分析详解演示文稿

药物分析抗生素类药物的分析详解演示文稿本文档共93页；当前第1页；编辑于星期三\16点36分（优选）药物分析抗生素类药物的分析本文档共93页；当前第2页；编辑于星期三\16点36分抗生素质量的复杂性产品稳定性差分子结构大多不稳定，降解后疗效下降、失效或增加毒副作用发酵过程不易控制易受污染生产工艺复杂发酵液中杂质无机盐、脂肪、各种蛋白质、各种降解产物、色素、热原、毒性物质本文档共93页；当前第3页；编辑于星期三\16点36分增加异常毒性、细菌内毒素、热原、降压物质、无菌[检查]含量测定方法（一）生物学方法测定抗生素抑菌或杀菌的能力优点1、与临床效果一致2、灵敏度高3、干扰物质少缺点1、操作繁琐2、培养时间长2、测定误差大本文档共93页；当前第4页；编辑于星期三\16点36分（二）化学及物理化学方法以理化方法测定主药含量优点1.准确度高2.简单、快速1.不一定代表生物效价缺点2.易受杂质干扰分类（按结构与性质）：β–内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类、氯霉素类、多肽类、抗肿瘤类、林可霉素类、其他抗生素类本文档共93页；当前第5页；编辑于星期三\16点36分第二节β–内酰胺类抗生素

青霉素类本文档共93页；当前第6页；编辑于星期三\16点36分头孢菌素类青霉素（青霉素G、苄青霉素）本文档共93页；当前第7页；编辑于星期三\16点36分氨苄西林（氨苄青霉素）阿莫西林（羟氨苄青霉素）本文档共93页；当前第8页；编辑于星期三\16点36分普鲁卡因青霉素头孢氨苄本文档共93页；当前第9页；编辑于星期三\16点36分头孢拉定头孢羟氨苄本文档共93页；当前第10页；编辑于星期三\16点36分头孢噻吩钠本文档共93页；当前第11页；编辑于星期三\16点36分结构与性质一、Na与碱金属(Na+、K+)成盐，易溶于水

（一）羧基酸性本文档共93页；当前第12页；编辑于星期三\16点36分与有机碱(普鲁卡因)成盐，难溶于水普鲁卡因青霉素本文档共93页；当前第13页；编辑于星期三\16点36分（二）手性C旋光性(5%头孢唑啉钠溶液–18～–24°)头孢菌素类C6C7青霉素类C3C5C6

﹡﹡﹡﹡﹡本文档共93页；当前第14页；编辑于星期三\16点36分

（三）共轭体系UV头孢菌素类母核有共轭体系

青霉素类母核无明显UV多数有苯环取代基

本文档共93页；当前第15页；编辑于星期三\16点36分青霉素钠UV7-20本文档共93页；当前第16页；编辑于星期三\16点36分本文档共93页；当前第17页；编辑于星期三\16点36分（四）β–内酰胺环水溶液不稳定干燥纯净稳定不稳定性因素四元环张力大酰胺键易水解（某些金属离子）（温度）某些氧化剂本文档共93页；当前第18页；编辑于星期三\16点36分例青霉素的降解反应青霉素青霉噻唑酸H2O/OHˉ青霉素酶青霉酸H2OpH2100℃α–青霉噻唑酰基羟胺酸NH2OH青霉烯酸pH4青霉胺CO2青霉醛HgCl2本文档共93页；当前第19页；编辑于星期三\16点36分二、K+、Na+反应（一）鉴别焰色→鲜黄色+醋酸氧铀锌→↓黄

Na+

焰色→紫色+0.1%四苯硼钠+Ac→↓白

K+（二）呈色反应1.羟肟酸铁反应β-内酰胺类NaOH呈色Fe3+/3H+本文档共93页；当前第20页；编辑于星期三\16点36分H+Fe3+/3（红、棕、褐）本文档共93页；当前第21页；编辑于星期三\16点36分2、与H2SO4-HNO3反应头孢菌素类3.茚三酮反应△α-氨基本文档共93页；当前第22页；编辑于星期三\16点36分α-氨基、伯胺某些羟基胺类酮式烯醇式茚三酮茚三酮缩合蓝紫色本文档共93页；当前第23页；编辑于星期三\16点36分4.双缩脲反应β-内酰胺类（开环分解）似肽键蓝紫色本文档共93页；当前第24页；编辑于星期三\16点36分（三）沉淀反应1.遇酸→↓在过量HCl或有机溶剂中溶解2.有机胺盐反应重氮化-偶合反应重氮化-偶合反应芳伯氨基本文档共93页；当前第25页；编辑于星期三\16点36分普鲁卡因普鲁卡因青霉素本文档共93页；当前第26页；编辑于星期三\16点36分光谱法（四）1、UV法样品、分解产物Cu2+头孢氨苄λmax=262nm青霉素V钠A280nm/A264nm=1.30～1.50本文档共93页；当前第27页；编辑于星期三\16点36分Cu2+pH3.8△本文档共93页；当前第28页；编辑于星期三\16点36分本文档共93页；当前第29页；编辑于星期三\16点36分氯唑青霉素3410.682双氯青霉素3420.653苯唑青霉素3391.328(nm)本文档共93页；当前第30页；编辑于星期三\16点36分2、IR法β-内酰胺环酰胺本文档共93页；当前第31页；编辑于星期三\16点36分色谱法（五）1、TLC法对照品对照法2、HPLC法本文档共93页；当前第32页；编辑于星期三\16点36分三、含量测定（水解）碘量法（一）1.原理水解产物定量过量剩余β-内酰胺类ChP本文档共93页；当前第33页；编辑于星期三\16点36分反应分两步进行：1.水解反应(按化学计算量进行)2.氧化-还原反应(无固定的量关系，受温度、PH值和时间等因素影响，应严格控制反应条件并采用标准品平行对照测定)第一步第二步本文档共93页；当前第34页；编辑于星期三\16点36分V样空V样对照液+缓冲液+碘液+回滴+碱+酸+缓冲液+碘液+回滴V对空V对2.方法供试液+缓冲液+碘液+回滴+碱+酸+缓冲液+碘液+回滴空白试验A、消除样品已降解产物的干扰B、消除样品中其他消耗碘的杂质的干扰C、消除碘挥发造成的误差以未经水解的样品作空白测定本文档共93页；当前第35页；编辑于星期三\16点36分空白样品I2Na2S2O3I-I2采用标准品平行对照测定A、可消除温度、pH、操作、环境等条件的影响B、使本法测定结果与微生物检定法一致本文档共93页；当前第36页；编辑于星期三\16点36分3.条件（1）弱酸性pH4.5碱↑I2→IO3-+I-酸↑普鲁卡因与碘在酸性条件下会产生复盐沉淀（2）温度24～26℃温度＞38℃未水解的供试品亦消耗碘（3）水解时间以水解20分钟后的耗碘量最大（4）反应时间反应20分钟后，耗碘量随时间的变化较小，可减小含量测定的误差。本文档共93页；当前第37页；编辑于星期三\16点36分4.特点（1）灵敏度高样品:碘=1:8（2）反应条件、实验操作要求高V对、V对空V样、V样空1份含量加试剂次序、反应时间、滴定速度相同4I2→8I-5.计算原料本文档共93页；当前第38页；编辑于星期三\16点36分汞量法（二）1.原理（水解）青霉素族ChP2.方法醋酸盐缓冲液pH4.6滴定水解pH4.6滴定样品以未经水解的样品作空白测定本文档共93页；当前第39页；编辑于星期三\16点36分3、讨论（1）以第二次滴定突跃为终点电位法指示终点（2）反应摩尔比1:1（3）空白试验消除已降解产物干扰（4）优点

不需标准品4、计算本文档共93页；当前第40页；编辑于星期三\16点36分精密称取含水量为0.5%的青霉素钠0.0502g，按药典方法测定总青霉素含量时，用去硝酸汞滴定液(0.02009mol/L)6.97ml。另精密称取上述样品0.5013g，按药典方法测定降解物含量时，用去硝酸汞滴定液(0.02009mol/L)1.33ml。以干燥品计算，求样品中青霉素的含量。(去硝酸汞滴定液的理论浓度为0.02mol/L)homework酸碱滴定法（三）1、原理△（钠盐）β-内酰胺类ChP本文档共93页；当前第41页；编辑于星期三\16点36分△2、方法本文档共93页；当前第42页；编辑于星期三\16点36分3、讨论（1）水解前先中和溶剂和样品（2）加热时避免吸收CO2△不能使酚酞变红（3）空白试验校正(消除Na2CO3干扰)（4）特点简便快速，不适用于有残留酯的产品本文档共93页；当前第43页；编辑于星期三\16点36分（水解）可见-紫外分光光度法（四）1、酸水解法（铜盐法）（1）原理稳定剂JP青霉素族（2）计算2、硫醇汞盐法（1）原理（咪唑）青霉素族ChP本文档共93页；当前第44页；编辑于星期三\16点36分咪唑本文档共93页；当前第45页；编辑于星期三\16点36分（2）方法对照品法计算pH9（3）讨论a.咪唑催化的水解产率高，硫醇汞盐稳定（≥3h）b.侧链有-NH2时，需加醋酐先将其乙酰化后才能发生上述反应本文档共93页；当前第46页；编辑于星期三\16点36分pH9（4）特点A、简便快速B、用标准品对照，重现性良好，RSD≤1%本文档共93页；当前第47页；编辑于星期三\16点36分HPLC法（五）特点快速、高效、灵敏专属性强、重现性好

一法多用（鉴别、检查、含测）本文档共93页；当前第48页；编辑于星期三\16点36分第三节氨基糖苷类抗生素链霉素双氢链霉素新霉素卡那霉素庆大霉素巴龙霉素链霉素链霉胍+链霉糖+N-甲基-L-葡萄糖胺

苷元糖链霉双糖胺本文档共93页；当前第49页；编辑于星期三\16点36分链霉胍链霉糖N-甲基-L-葡萄糖胺本文档共93页；当前第50页；编辑于星期三\16点36分链霉胍链霉糖N-甲基-L-葡萄糖胺本文档共93页；当前第51页；编辑于星期三\16点36分庆大霉素

糖苷元绛红糖胺+脱氧链霉胺+加洛糖胺

糖本文档共93页；当前第52页；编辑于星期三\16点36分绛红糖胺紫素胺2-脱氧链霉胺加洛糖胺N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺本文档共93页；当前第53页；编辑于星期三\16点36分绛红糖胺紫素胺2-脱氧链霉胺加洛糖胺N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺本文档共93页；当前第54页；编辑于星期三\16点36分庆大霉素C复合物庆大霉素C1R=HR1、R2=CH3庆大霉素C2R=R2=H

R1=CH3庆大霉素C1aR、R1、R2=H庆大霉素C2aR=CH3R1=R2=H庆大霉素C2bR=R1=HR2=CH3本文档共93页；当前第55页；编辑于星期三\16点36分一、结构与性质多与硫酸成盐链霉素3个庆大霉素5个碱性中心碱性（一）水溶性溶解性（二）本文档共93页；当前第56页；编辑于星期三\16点36分链霉素pH5～7.5庆大霉素pH2～12稳定UV（三）稳定性（四）链霉素水解产物反应（五）本文档共93页；当前第57页；编辑于星期三\16点36分坂口反应N-甲基葡萄糖胺反应麦芽酚反应本文档共93页；当前第58页；编辑于星期三\16点36分二、鉴别茚三酮反应（一）△羟基胺结构本文档共93页；当前第59页；编辑于星期三\16点36分N-甲基葡萄糖胺反应（二）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物对二甲氨基苯甲醛H+红色（Elson-Morgan反应）本文档共93页；当前第60页；编辑于星期三\16点36分(缩合)本文档共93页；当前第61页；编辑于星期三\16点36分红色对二甲氨基苯甲醛H+本文档共93页；当前第62页；编辑于星期三\16点36分麦芽酚反应（三）

链霉糖特有反应H+分子重排本文档共93页；当前第63页；编辑于星期三\16点36分紫红麦芽酚本文档共93页；当前第64页；编辑于星期三\16点36分链霉胍特有反应（或α-萘酚）8-羟基喹啉坂口反应（四）α-萘酚本文档共93页；当前第65页；编辑于星期三\16点36分本文档共93页；当前第66页；编辑于星期三\16点36分（四）反应H+UV法（五）IR法（六）庆大霉素无UV吸收TLC法（七）本文档共93页；当前第67页；编辑于星期三\16点36分三、检查链霉素杂质（一）链霉素B（甘露糖链霉素）方法TLC中的对照品法（BP）1.来源反应中间体本文档共93页；当前第68页；编辑于星期三\16点36分对微生物的活性无明显差异毒副作用和耐药性不同发酵菌种不同工艺差别C组分比例不一致规定控制各组分的相对百分含量ChPUSPBPJP庆大霉素C组分的测定（二）本文档共93页；当前第69页；编辑于星期三\16点36分λmax=330nm衍生化原理1.本文档共93页；当前第70页；编辑于星期三\16点36分1-烷基硫代-2-烷基异吲哚衍生物本文档共93页；当前第71页；编辑于星期三\16点36分本文档共93页；当前第72页；编辑于星期三\16点36分第四节四环素类抗生素ABCD本文档共93页；当前第73页；编辑于星期三\16点36分123456789101112本文档共93页；当前第74页；编辑于星期三\16点36分四环素（TC）tetracycline本文档共93页；当前第75页；编辑于星期三\16点36分金霉素(CTC)chlortetracycline氯四环素本文档共93页；当前第76页；编辑于星期三\16点36分土霉素(OTC)oxytetracycline氧四环素本文档共93页；当前第77页；编辑于星期三\16点36分多西环素(DOTC)doxycycline脱氧土霉素本文档共93页；当前第78页；编辑于星期三\16点36分美他环素（METC）metacycline本文档共93页；当前第79页；编辑于星期三\16点36分本文档共93页；当前第80页；编辑于星期三\16点36分一、结构与性质两性（一）1.与酸、碱均能成盐2.强酸或强碱中溶解度↑