蝴蝶兰工厂化生产及组培养殖技术

1PAGE1目录TOC\o"1-3"\u摘要31前言4研究的目的和意义4超群花卉公司概况42工厂化生产设施要求4组培室总体要求4准备间4灭菌室5操作间5培养室5温室设施要求5通风系统5室内外遮阴系统5内加温保温系统5湿帘降温系统6活动苗床63工厂化生产技术流程及在生产实践时的技术要求6生产流程图6诱导6外植体及其处理6花梗诱导7继代增殖7生根与炼苗7小苗阶段管理8移栽8光照8温度8水份8施肥8中大苗阶段管理9温度9水份9施肥10促花条件10病虫害防治10销售11包装标准11蝴蝶兰盆花质量等级划分标准124结论12致谢13参考文献14摘要本文主要对蝴蝶兰在新疆地区的气候条件下进行规模化生产所需具备的设施以及工厂化生产技术流程及在生产实践时的技术要求进行了阐述。组培技术具有生产流程短、繁殖速度快、整齐度高、品质稳定等特点，是进行工厂化生产的最正确方法，培养基的配置是组培技术中至关重要的一部，一般在诱导时使用：1/2MS+BA2.5mg/L+NAA0.2mg/L，继代增殖时使用：1/2MS+BA3.5mg/L+KT1.0mg/L+NAA0.5mg/L+耶乳10%，生根培养时使用：1/2MS+BA1.5mg/L+NAA0.3mg/L+80g/L香蕉泥。而温室是幼苗到成品苗养殖的必须场所。对于在苗期管理时温度应维持在20℃-30℃，光照维持在6000lx-8000lx，浇水那么需要间干间湿，施肥浓度不可过高要薄肥勤施，对于蝴蝶兰的病虫害防治要坚持预防为主，防治综合的原那么。所以本文主要对组培室的总体要求，温室设施的要求以及从对花梗诱导到成品苗的包装、销售、运输进行了系统化的阐述。关键词：蝴蝶兰，工厂化生产，设备要求1前言蝴蝶兰又称蝶兰，其花大、花期持久、花色艳丽、色泽丰富、花型别致，且不用泥土栽植、卫生清洁、具有极高的欣赏价值和经济价值，深受世界各国人民的喜爱。蝴蝶兰是兰科植物中栽培量最广泛、最普及的种类之一，喜高气温、高湿度、通风半阴环境，忌水涝气闷。越冬温度不低于15度。由于蝴蝶兰出生于热带雨林地区，本性喜暖畏寒。生长适温为18～30℃，冬季15C以下就会停止生长，低于10℃容易死亡。在热带兰中素有“兰花皇后〞的美称【1-2】。随着我国人民生活水平的日益提高，对花卉的需求和购置能力相对增加，尤其是对蝴蝶兰的消费明显增加，蝴蝶兰也慢慢成为了花卉市场的主角。现今小规模的生产已经远远不能够满足市场对其的需求，所以急需要求对蝴蝶兰进行工厂化生产。本文是笔者以超群花卉公司生产蝴蝶兰为蓝本介绍蝴蝶兰工厂化生产的程序及其相关技术，试图为扩大蝴蝶兰在新疆地区的产业化生产提供借鉴。超群花卉公司〔以下简称：超群〕位于江苏镇江，是一所外商独资公司。其先后投入200万美元建厂，近几年又建设了国内一流的蝴蝶兰组培室。幼嫩花梗扦插培养和丛生芽的增殖获得组培苗。具有生产流程短、繁殖速度快、整齐度高、品质稳定等特点，是进行工厂化生产的最正确方法。超群拥有来自台湾和日本养殖蝴蝶兰的先进经验，保守估计年创利润在2千万人民币左右。自从超群建设了蝴蝶兰组培室才真正意义上的踏入了对蝴蝶兰工厂化生产的领域，其生产规模和利润也直线上升。2工厂化生产设施要求育苗工厂选址时需要远离污染，水电供给充足，交通便利。建筑与装修材料要经得起消毒、清洁和冲洗；厂房的防水处理应高标准，不能有漏雨现象；地基最好高出地面30cm以上。其他大局部要求与实验室设计相似。操作间的是主要工作的地方，要求较封闭。要求墙壁光滑平整，地面平坦无缝，能够防止空气对流[3]。室内需定期灭菌。准备间准备间里应包括能够进行洗涤以及培养基配置的根本设备。需设置一间进入工作室内的缓冲间。缓冲间需设置风淋室，主要是为了尽量少得将细菌带入工作室内。灭菌室灭菌室里需要配备灭菌设备以及消防设施。在灭菌室里需要单设一间储藏室，用于存放已灭菌的培养基或未用完的培养基，以及操作间里所需要的无菌用具等。储藏室内宜保持较低温度和防止阳光直射。并定进行期消毒。操作间操作间是用来进行接种工作的场所，所以操作间里需要拥有超净工作台和通风换气设备。操作间的洁净程度要求非常高，需经常消毒。培养室培养室需要来存放组培材料，室内需定期消毒。培养室需拥有照明设备，一般可用日光灯，须有自动调温设备，温度保持25~28℃之间，另外还要安装温、湿度自动记录计。同时应有暗室设备，以便暗培养时使用。蝴蝶兰生长适温为18~30℃，光照强度5000~20210lx，生长最正确湿度为60~95%。新疆地区属于典型的温带大陆性气候，这种气候非常不适合蝴蝶兰的全年生长发育，所以只能进行温室栽培，温室不但能有效地改进小气候环境，而且能够根据生产的需要控制和调节小气候[4]，所以通风系统、室内外遮阴系统、内加温保温系统和湿帘降温系统对大规模的工厂化生产便显得尤为重要。通风系统此系统包括开窗系统和内循环系统。顶开窗系统是利用自然通风，最好的效果可以到达室内外温差3~5℃.内循环系统可以增强空气流通，可在温室的每跨设置5台风扇直径为400mm的循环风机来加强空气流通。室内外遮阴系统此系统分为遮阴和外遮阴。外遮阴采用遮光率为70%的遮阳网。内遮阴采用遮光率为64%的遮阴保温幕。内外遮阴都配有拉幕系统，可以根据天气情况和兰苗不同生长阶段对光的需求进行起闭。内加温保温系统新疆地区冬天非常寒冷，蝴蝶兰在这样的温度条件会很快死亡，因此可以使用燃油炉或水暖进行加温。湿帘降温系统此系统包括厚100mm、高1m的湿帘和流量为40000m/h、功率0.75KW的强风机。新疆地区夏天温度高达38℃。当温室温度超过28~30℃时，通过风机降温效果已很有限，需要使用湿帘降温。活动苗床我们建造的活动栽培床，由镀锌钢材制作床架和苗床边框，中间采用镀锌钢丝网，苗床宽度为1.9m，高度0.8m。活动苗床是通过多架苗床共用一条道路来提高温室使用率，通过苗床上盘沿宽度方向左右移动，使道路出现在不同的苗床侧边来提高温室的使用率，使用率可达80%[5]。苗床的下面用水泥地面与砾石低槽相间设置，这样有利于环境卫生和湿度的调控。3工厂化生产技术流程及在生产实践时的技术要求诱导诱导继代增殖生根炼苗小苗阶段中苗阶段大苗阶段种苗筛选销售外植体及其处理选用已开花花梗的下端休眠芽和分化苗的叶片作为外植体。将剪去上端花序的花梗剪切成10~15cm，用纯洁水冲洗1~2h，然后在超净工作台上先用75%酒精侵泡30s，无菌水冲洗后放入0.105%Hgcl2溶液中侵泡7~8min，无菌水冲洗5~8次。花梗诱导处理后的花梗切成2~3cm长的切断，每段一个侧芽，基部向下插入诱导培养基(1/2MS+BA2.5mg/L+NAA0.2mg/L,此时为细胞分裂素偏多)。先放置于培养室进行7~10d黑暗培养，然后光照培养，光照强度1000~2021lx，光照10h/d,培养温度〔26℃〕。5~10d后开始萌动，诱导率可达90%以上。需要注意的是：在花梗休眠芽的诱导过程中，80%左右的休眠芽萌发后，长成类似花梗侧枝的细嫩梗茎，约20d后，待其长至3~5cm，有2~3个芽点时将其切离花梗，并将其重新切断，基部向下重新放入诱导培养基中，约10~20d，下端切口、侧芽、上端切口等部位均出芽，其中以侧芽出芽率最高，较快地分化处丛生芽，下端切口的出芽次之，分化频率不高，但启动后出芽较多。花梗和叶片诱导出从生芽，接种于继代培养基〔1/2MS+BA3.5mg/L+KT1.0mg/L+NAA0.5mg/L+耶乳10%，此时需加大生长素的浓度〕，培养温度〔26℃〕，光照强度2021lx，光照时间10h/d。每40~50d继代1次，增殖倍数2~3倍。继代增殖的初期宜用5~10mg/ml浓度的62BA较快地积累材料，随着继代次数的增加，特别是10代以后或变异株开始出现以后，只能用1~5mg/ml浓度62BA促进丛生芽的生长，并在生产中及时去除变异株[6]。需要注意的是：丛生芽的增殖生长表现出一定的群体效应，即当丛生芽切割成只有1~2个芽时，丛生芽的增殖大大减少，大多数1个继代周期后几乎没有增殖，但丛生芽有一定的长大。当有3~5个芽或更多时，丛生芽的增殖较为正常。切割丛生芽时，只能将丛生芽轻轻分开，不可对丛生芽的四周进行分割，否那么会切割伤口太多而导致培养基褐化较快，不利于丛生芽的生长与分化，甚至会造成丛生芽的死亡。对一些较大的芽〔芽高115cm以上，单轴茎直径0.15cm上〕进行横切可以提高增值率，横切后会在切口的下部长出一轮丛生芽，增值率可以提高3~5倍。因蝴蝶兰单轴茎较短小，在切割时对切割部位的掌握要准，否那么会将芽切死或因没有切去顶芽而达不到应有的增值率。当芽长至115~3cm高，2~3片叶时，即可转入生根培养基〔1/2MS+BA1.5mg/L+NAA0.3mg/L+80g/L香蕉泥，此时要减少细胞分裂素的浓度，这阶段主要是需要作物生根〕，光照强度2021~3000lx，光照时间12h/d瓶苗生长阶段，最适生长温度白天为25℃-28℃，夜间18-20℃，20d左右开始生根。生根后将苗置于光照强度8000~10000lx、光照时间8~12h/d的环境条件下15~20d，可以明显提高瓶苗的质量和种植成活率。当苗高3~5cm，叶片数3~5片时，即可出瓶种植。试管苗机体脆弱，移植前要逐渐增强光线，出瓶前两周可以接受稍强光源照射或放在散射光充足处锻炼。但不宜直接放到阳光下，否那么瓶内温度很快升高，往往导致幼苗死亡。经1-2周后，瓶内幼苗变得青绿健壮，移出瓶外后轻易成活。出瓶前1-2天，将待出苗的培养瓶翻开瓶盖，亦起炼苗作用。移栽刚出瓶的试管小苗生长势弱，应特别注意，应用洁净〔少感染病菌〕疏松通气、透水而且具有一定的保水能力的植料。我们大多使用水草作为基质，水草不仅柔软且湿润时间长，透气性强。移栽后的小苗到大苗我们都使用水草作为基质。试管苗移植过程中易受损伤，而幼苗抵抗力弱，始感染病菌易发病死亡，故应做好消毒灭菌工作。植料，花盆及工具可用的消毒处理方法是：0.1%水杨酸苯胺，水溶液浸泡10分钟或0.3%多菌灵溶液浸泡20分钟，捞起后用清水冲洗三四次。试管苗出瓶后的幼苗消毒可用新洁尔灭或0.1%高锰酸钾溶液浸泡5-10分钟，然后捞起凉干。消毒清洗后,滤去水分即可栽培。洗好的试管苗经消毒晾干，〔或不消毒〕将幼苗分成大、中、小苗，移栽到经消毒的育苗框内植料中，出瓶苗按大、中、小分别移植，不要混栽，否那么较小的苗受到抑制会成僵苗。移植时不宜种植过深，叶片要全部外露。否那么埋在植料中易腐烂。要将其向四面理直，薄盖一层植料并压紧，以喷水时幼苗不松动为适宜。幼苗移栽后，2-3天内不能浇水，刚出瓶的兰花试管苗对环境适应性较差，在移栽一周内，应将试管苗置于低温、高湿、弱光的保护设施中，确保存活后再移入温室大棚。光照蝴蝶兰喜弱光，不宜曝晒[见表〔1〕。蝴蝶兰自然条件下多附生于热带雨林高树枝干上有树荫庇护。忌烈日直射，否那么会大面积灼伤叶片，但也不耐室内过阴，会导致生长缓慢不利于养分存储和开花。蝴蝶兰喜弱光，不宜曝晒。要求较弱，只蝴蝶兰需遮光70%即可。温度蝴蝶兰属热带高温兰，适宜生长温度为20-30摄氏度。低于15度即进入休眠，低于10度容易死亡。但高于35度高温影响生长并容易患病。应控制在于20—320C之间，而生根前和生根后的温度又有所不同，大体上前段低些后段高些[见表〔1〕]。水份应保持较高的空气湿度。夏秋季高温季节，每天喷水2-3次由于没有匍匐茎和假鳞茎，蝴蝶兰不耐旱，又由于气生性质蝴蝶兰也畏涝湿。夏季高温时期保持材质湿润即可，可用喷雾洒水降温增湿，浇水水质要求pH值6.5左右,EC值0.6左右。不同规格的蝴蝶兰种苗要求的EＣ值不同,小苗控制在0.6～0.8,冬春酌减。施肥蝴蝶兰施肥原那么为薄肥勤施，切忌过浓化肥幼苗移栽初期不可施肥，，幼苗移植一周后，根叶开始生长，可薄施无机肥，一般是根外追肥。可自行配制液肥：磷酸二氢钾、硝硫钙、硫酸镁各10克，总浓度为0.064%，药剂溶于50kg清水中与920植物激素2ml搅匀，进行根外喷雾点要雾点要细，喷湿叶面和底部即可生长期每周喷施一次，夏秋季在黄昏喷施最有效，冷天和雨天不宜喷施[7]。肥料的酸碱度以PH值5.2-5.8最为适定。就一般而言，小苗期应适当增施氮肥以利枝叶生长。定植后一个月后可喷施液肥，少用有机肥。表〔1〕蝴蝶兰小苗阶段的培育条件温度〔℃〕肥料工程湿度光照强度复合肥浓度〔倍〕昼温夜温%lx〔N-P-K〕长根前26-292370-906000-800020-10-20和20-20-205000长根后26-292370-906000-800020-10-206000-8000经4个月培育后，小苗长成中苗，此时应换盆。温度蝴蝶兰属热带高温兰，适宜生长温度为20-30摄氏度。低于15度即进入休眠，低于10度容易死亡。但高于35度高温影响生长并容易患病。开花需经历一个月的15-18度低温才能促成花芽分化，此后如果继续持续低温那么花梗萌发缓慢。空气蝴蝶兰喜欢空气高湿且通风的环境。要求空气经常保持湿度60%～80%，并且保持空气流通最好有微风吹拂，盆内不能积水过多，根如果被液态水包围达6-8小时，极易烂根，所以通气是养好蝴蝶兰的关键，质料需酥松透气那么根生长强健。忌干热风吹拂。阳光蝴蝶兰自然条件下多附生于热带雨林高树枝干上有树荫庇护。忌烈日直射，否那么会大面积灼伤叶片，但也不耐过阴，会导致生长缓慢不利于养分存储和开花。最好能放于朝北朝东的阳台或窗台旁，使之接受到散射光，那么生长强健病害少。水份对于中大苗浇水水质要求pH值6.5左右,EC值0.6左右。可控制在0.8～1.0,大苗控制在1.0～1.2之间。生产中可用放置1d～2d的自来水。生长旺期多浇水，花后休眠期少浇水。春秋两季每天下午五时前后浇水一次；夏季植株生长旺盛，每天上午九时和下午五时各浇一次水；冬季光照弱，温度低，隔周浇水即可。栽培基质应见干见湿，花开时应注意水雾不要溅到花朵上。夏季高温时期保持材质湿润即可，可用喷雾洒水降温增湿〔但不能使叶心留水容易烂心〕。根不能长时间过分阴湿，特别是被液态水长时间包围极易腐烂，如夏日每日浇水量以当日能自然风干为好，间干间湿，这样会大大减少腐根和病害的发生率。冬季少浇水仅保持材质微湿即可。施肥蝴蝶兰施肥原那么为：薄肥勤施，切忌过浓化肥。中小苗要求肥料浓度3000～7000倍液,大苗要求肥料浓度3000～5000倍液，催花阶段的大苗使用高Ｐ肥,N:P:K比为10:30:20。在生长期每10d进行一次肥水浇灌。在生长期施氮钾肥催花期施用磷钾肥。每周或半月施用一次即可。开花期休眠期不施肥，但在花前期和花后期应注意适当补充肥料。促花条件蝴蝶兰一般出瓶18个月后开花。为使蝴蝶兰应市开花，须做好生产安排。当蝴蝶兰大苗的茎部膨大饱圆时即标志大苗成熟，此时便可施用浓度为3000～7000倍的1:5:2的开花肥，约一个月后，大苗的叶色由原来的绿色转为浅绿，便可促花处理。促花时白天要求20℃～24℃，夜间17℃～20℃，低温处理后20d～35d的促成栽培即可露出花梗，第2至第3个月开始形成花苞,第4个月开始开花。在作低温处理前一个月作高温处理,更易抽出花梗。蝴蝶兰开花主要受温度影响。花芽分化需要低温刺激。在日间20-23度夜间18度以下低温〔但不可长时间低至15度以下〕刺激一月后即可使茎内的潜伏芽转化为花芽。此后当花芽突破表皮长为花梗后，就需要较高温度，以正常的生长温度为宜，持续低温会致使花梗抽发缓慢，花朵偏小甚至中途萎焉。开花期适当增加日照有助于花大色艳提早开花。病虫害防治由于蝴蝶兰生长于高温高湿环境。容易遭受病菌侵害且一旦发病蔓延迅速，所以以预防为主。蝴蝶兰以真菌性病害发生最普遍，其分布广、危害大。常见的病毒性病害有叶斑病和根腐病炭疽病等〔表2〕，平时可用农药百菌清〔此药预防效果好病菌抗药性低，但对已患病植株无治疗效果。〕或甲基托布津〔此药可防可治但病菌易产生抗药性不可长时间单一施用〕1000-1500倍防治，每隔七八天喷1次，连喷3次。这些药液沾在叶上留有白色痕迹，可不必抹去，以利于继续发挥杀菌作用。以上同类产品又以悬浮制剂比粉制剂效果好，持效长。操作上人体吸毒性更低。与病害相比虫害对蝴蝶兰的破坏性稍小，在温室窗户外加防虫网，可预防体型较大的害虫侵入[8]。常见害虫有红蜘蛛、介壳虫等〔表2〕。表〔2〕蝴蝶兰栽培中常见病虫害及防治农药名称感病部位病症种类浓度〔倍〕施药方式施药时间病害煤污病叶片叶片局部呈黑色，50%甲基托布津1000、700喷施每周1次2-3次手摸时有粘着感75%百菌清粉剂叶斑病叶片初期叶片上出现小斑点，以后开展成近75%百菌清可湿800喷施每周1次2-3次圆形，病斑边缘有水性粉剂渍状黄色圈褐斑病叶片叶片上出现圆形小斑点，以后逐渐成扩72%农用硫酸链4000喷施每周1次2-3次大斑，病斑黑褐色，严重时叶片变黑枯萎霉素可湿性粉剂灰霉病叶片叶片产生极少的水及花瓣渍状斑点，以后逐渐50%甲基托布津800、700喷施扩大，并成为黑褐色75%百菌清粉剂圆形病斑，花瓣亦形成病斑，严重脱落软腐病叶片初期叶端出现水渍及根茎状斑点，以后叶片组72%农用硫酸链4000喷施织冲水、腐烂并伴有霉素可湿性粉剂臭味，后期整株呈水渍状腐烂虫害红蜘蛛叶片初期叶片呈现黄白色小斑点，以后逐渐40%三氯杀螨醇1000、800喷施扩展至全叶，造成叶40%氧化乐果片卷曲、枯黄、脱落介壳虫叶片叶片暗淡，严重时50%大灭松乳剂1000喷施叶片黄化枯萎脱落40%氧化乐果包装标准〔1〕小苗包装：包装纸盒与纸箱同中苗包装同。每盒150株。每箱750株。包装方法可将小苗竖直摆放并让叶片按对角线排列于纸盒中，一盆挨一盆摆放，最后在上面盖上一层软纸后封箱。××12cm开孔纸盒作内包装，用95××65cm开孔纸箱作外包装，每盒56株，每箱5盒共280株。分二层四排，叶片上下排列，包装方法参照方法。〔3〕大苗的包装：大苗用72×49×39cm纸箱按每箱72株包装，包装时将苗平放，叶片按上下或左右同方向排列，分两排四层重叠，花盆底部贴近长边，并用透明胶纸固定。〔4〕花梗株的包装：包装前先将花梗株按花枝长短分级，并用开孔三角薄膜袋套住以保护花梗芽及叶片。30cm内的花梗株用72×49×39cm纸箱按每箱72株进行包装，包装时将苗平放，叶片按上下或左右同方向排列，分两排四层重叠，花盆底部贴近长边，并用透明胶纸将植株固定。花梗芽超过30cm苗按每箱48株包装，花盆底部贴近宽边。〔5〕开花株的包装：开花株由于花朵盛开，包装时应特别小心以免折断花枝或折伤花朵。用110×46×11cm开孔纸盒包装，每盒10株。包装时花盆底部贴近宽边，叶片左右排列，纸盒内部上、下及花朵重叠处用干净软纸隔开，植株及花枝用胶纸固定。每5盒用113××60cm的开孔纸箱包装成一箱，每箱50株，方便运输。〔6〕标志：待出售的蝴蝶兰盆花要在花盆上加贴标签，注明产品等级、商标、产品名称、生产单位等。〔7〕运输：使用盆花专用运输车，盆花包装完毕后，紧密排列在运输箱或纸箱内，分层放置在车厢内，注意不要倒置和挤压。长途运输过程中温度≥10℃、湿度保持60～75％。蝴蝶兰盆花质量等级划分标准工程一级二级三级单支花朵〔蕾〕数，朵≥97-85-6叶片数，片>554叶长，cm≥16≥14≥21叶宽，cm≥7≥6≥64结论总的来说要进行蝴蝶兰的工厂化生产就必须把握其各个时期的特点和所需的环境。工厂化生产最大的优势就是数量多，速度快和质量整齐度高，要保证这种优势就要求我们严格按照工作标准的标准进行批量生产。在组培阶段更多的是要注意培养室的洁净程度，其次便是培养基的成份。一般来说培养基用来诱导时使用：1/2MS+BA2.5mg/L+NAA0.2mg/L，继代增殖时使用：1/2MS+BA3.5mg/L+KT1.0mg/L+NAA0.5mg/L+耶乳10%，生根培养时使用：1/2MS+BA1.5mg/L+NAA0.3mg/L+80g/L香蕉泥。对于在苗期管理时温度应维持在20℃-30℃，光照维持在6000lx-8000lx，浇水那么需要间干间湿，施肥浓度不可过高要薄肥勤施，对于蝴蝶兰的病虫害防治要坚持预防为主，防治综合的原那么。只有严格控制这些条件才能为工厂化生产奠定基础。当然，没有永恒不变的标准。这还需要我们在日常工作中总结生产经验规划出一个适合自己的生产标准。致谢本论文是在生物科技学院阿依先木老师的精心指导下完成的。老师严谨的治学态度、平易进人，给我留下极为深刻的印象，在生活和学习中给予我的悉心关心和深刻的教诲，将使我终生受益，至此论文完稿之际，特向导师致以诚挚的敬意和最由衷的感谢。感谢生物科技学院的老师和我班同学们在工作和学习中对我的关心和帮助！参考文献[1]吴应详.中国兰花[M].北京:中国林业出版社,1992(6):15-18.[2]胡一民.蝴蝶兰生产的世界水平[J].花木盆景,1996(6):44.[3]王振龙.植物组织培养[M].北京:中国农业大学出腩社,2021.6(3):62-68[4]黄胜琴,郭建军,叶庆生,等,温度对蝴蝶兰成花诱导的研究初探结果[J].中山大学学报(自然科学版),2021,42(4):132-133[5]王悦锋,程俊峰.温室用移动式苗床的设计[J].现代农业装备,2021(7):47-48[6]谭文澄,戴策刚.欣赏植物组织培养技术[J].北京:中国林业出版社,1991(2):22-25[7]吴海虹,赵兴华,裴新辉,等.蝴蝶兰栽培技术要点[J].辽宁农业科学,2021(1):58,细菌性病害及防治措施.北方园艺,2021(2):128-129

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