高三生物微生物

第1讲微生物专题

/

新课标剖析

要求层次

具体内容

III

高

q微生物的类群

考

微生物的营养类型和培养基

要

无菌技术

求

微生物的培养、分离、纯化与计数

利用微生物进行发酵来生产特定的产物

1.微生物定义：个体微小，结构简单，通常要用光学显微镜和电子显微镜才能看清楚的生物，统称为微

生物。

2.常见微生物

微生物所包含的类群十分庞杂，在目前已经知道的大约10万种微生物中，既包括没有细胞结构的病

毒等，又包括原核生物界、真菌界以及原生生物界的生物。

细胞壁：主要成分为肽聚糖。

细胞膜

细胞质：含有核糖体、质粒（上面一般含有几个到几百个基因，控制着细菌的抗药性、固

结构

氮、抗生素生成等性状）和一些贮藏性颗粒（如淀粉粒、硫粒）。

细菌

拟核：由一个大型的环状DNA分子反复折叠缠绕而成，呈棒状、哑铃状或球状，控制着

细菌的主要遗传状。

繁殖二分裂：分裂时，细胞增大，分子复制，接着，细胞中部的细胞膜和细胞壁向内生长，形

方式成隔膜，将细胞质分成两半，形成两个子细胞。

一般由分枝状的菌丝构成，菌丝的宽度在l^m左右。放线菌的菌丝可以分为两类：伸

放线

结构入到培养基内部的菌丝称为基内菌丝，主要功能是吸收营养物质；伸展在空气中的菌丝称

菌

为气生菌丝，这类菌丝较粗，呈直线形或弯曲分枝形。

主要通过形成无性泡子的方式进行繁殖，放线菌生长发育到一定阶段，一部分气生菌

繁殖

丝便分化成布子丝。抱子丝有杆形的、波浪形的、螺旋形的等，上面生有成串的抱子。在

方式

适宜的条件下，抱子萌发长出菌丝。

分布

放线菌主要分布在土壤、空气和水中，尤其在富含有机质的土壤中较多，每克土壤中

及应

往往含有数万至数百万个放线菌狗子。多数抗生素都是由放线菌产生的。

用

结构蛋白质外壳与核酸：一种病毒只含一种核酸，即DNA或RNA。

病毒的繁殖过程只能在宿主的活细胞中进行，通常将病毒的繁殖过程称为增殖。例如，

噬菌体在侵染宿主细胞时，首先是吸附在宿主细胞表面，然后将核酸注入到细胞内部，衣

病毒繁殖壳则留在外面。核酸进入宿主细胞以后，就利用宿主细胞内的物质，复制出子代噬菌体的

方式核酸，并合成构成子代噬菌体衣壳的蛋白质。这些蛋白质和核酸进一步装配成子一代噬菌

体。装配完成的噬菌体，在细胞裂解以后，一齐被释放出来，释放量通常在1。2~105个左

右。

原生生物是单细胞（亦有部分是多细胞）生物，它们的细胞内具有细胞核和有膜的细

结构

原生胞器。生活于水中。

生物常见的原生生物包括原生动物（草履虫、变形虫等）与原生植物（硅藻、甲藻、矽藻

种类

等）两类。

叫■］例题精讲

【例1】关于微生物的叙述中，正确的是（）

A.所有的微生物都是形体微小、结构简单、对人类有害的

B.细菌、放线菌、酵母菌都属于原核生物

C.所有微生物在细胞结构上都无成形的细胞核

D.微生物是生态系统中的主要分解者

【答案】D

【例2】对下列几种微生物的叙述正确的是（）

①酵母菌②乳酸菌③硝化细菌④蓝藻⑤烟草花叶病毒

A.从生态系统的成分看，①②③是分解者，④是生产者

B.从同化作用的类型看，②是厌氧型，③④是需氧型

C.从异化作用类型看，①②是异养型，③④是自养型

D.从结构和成分看，①具有成形细胞核，⑤的遗传物质中不含胸腺喀咤

【答案】D

【例3】|在以下描述中，可以将病毒与其他微生物相区别的是（）

A.能够使人或动、植物患病B.没有细胞核，仅有核酸

C.具有寄生性D.由核酸和蛋白质装配进行增殖

【答案】D

【例4】病毒经常感染其他生物致病。干扰素（IFN）是一种广谱抗病毒剂，并不直接杀伤或抑制病毒，

而主要是使细胞产生抗病毒蛋白，抗病毒蛋白是一类酶类，对多数病毒均有一定抑制作用。下

列有关叙述，正确的是（）

A.流感病毒虽含有简单的细胞器，但必须在宿主细胞内才能合成多种蛋白质

B.流感病毒虽然含有DNA和RNA,但其遗传物质只可能是RNA,为RNA病毒

C.做相关致病病毒的研究时，可以在灭菌后的动物细胞培养液中培养病毒

D.干扰素对病毒复制的抑制作用是非特异的

【答案】D

二、微生物的营养类型和培养基

器知识点睛

（-）微生物的营养类型

营养类型电子供体碳源能源举例

光能自养型电、、、或光能光合细菌、蓝细菌、藻类

H2SS40co2

光能异养型有机物有机物光能红螺细菌

2+

H2、H2S^Fe>NH3、化学能氢细菌、硫杆菌、亚硝化单胞菌属、

化能自养型co

2（无机物氧化）硝化杆菌、甲烷杆菌属、醋酸杆菌属

或NO2

化学能假单胞菌属、芽抱杆菌属、乳酸菌属、

化能异养型有机物有机物

（有机物氧化）真菌、原生动物

光能自养型：这是一类能以CO?为唯一碳源或主要碳源并利用光能进行生长的微生物。它们能利用

无机物如水、硫化氢、硫代硫酸钠或其他无机化合物使C02固定还原成细胞物质，并且伴随

元素氧（硫）的释放。藻类、蓝藻和光合细菌属于这一类营养类型。

藻类和蓝藻：co,+H.O-^-U-<CH.O）+O.

--叶妹素--

这与高等植物光合作用是一致的。

光能

光合细菌：CO2+2H2S=^>9凡0）+&0+25

菌绿素

这与藻类、蓝藻和高等植物是不同的。

化能自养型：这类微生物利用无机物氧化过程中放出的化学能作为它们生长所需的能量，以C02或碳

酸盐作为唯一或主要碳源进行生长，利用电子供体如氨气、硫化氢、二价铁离子或亚硝

酸盐等使co?还原成细胞物质。属于这类微生物的类群有硫化细菌、硝化细菌、氢细菌

与铁细菌等。

氢细菌：H,+1O,-H,O+56.7千卡

2222

光能异养型：即光能有机营养型。这类微生物不能以C02作为唯一碳源或主要碳源，需以有机物作为供氢

体，利用光能将CO2还原为细胞物质。红螺属的一些细菌就是这一营养类型的代表：

2（CH）CHOH+C0—2cHCOCH+（CH0）+H0

322光合色素33'2/2

光能有机营养型细菌在生长时通常需要外源的生长因子。

化能异养型：即化能有机营养型。这类微生物生长所需的能量来自有机物氧化过程放出的化学能，生长所

需要的碳源主要是一些有机化合物，如淀粉、糖类、纤维素、有机酸等，有机物通常既是它

们生长的碳源物质又是能源物质。

目前在已知的微生物中大多数属于化能有机营养型：绝大多数的细菌、全部真菌、原生

动物以及病毒。

如果化能有机营养型微生物利用的有机物不具有生命活性，则是腐生型；若是生活在生

活细胞内从宿主体内获得营养物质，则是寄生型（组织培养物培养基含有动、植物细胞，用

来培养病毒、衣原体、立克次氏体及某些螺旋体等专性活细胞等生的微生物。尽管如此，有

些病毒和立克次氏体目前还不能利用人工培养基来培养，需要接种在动植物体内、动植物组

织中才能增殖。常用的培养病毒与立克次氏体的动物有小白鼠、家鼠和琢鼠，鸡胚也是培养

某些病毒与立克次氏体的良好营养基质，鸡瘟病毒、牛痘病毒、天花病毒、狂犬病毒等十几

种病毒也可用鸡胚培养）。

（二）培养基

1.定义：人们按照微生物对营养物质的不同要求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。

2.培养基中的营养成分

来源作用备注

①不同种类的微生物，对碳源的需要差

无机碳源：

用于合成微生物的细胞别比较大。

CC>2、NaHCC）3等

物质和一些代谢产物；②自养微生物所需的碳源来自含碳的

碳源有机碳源：

异养微生物的主要能源无机物，而异养微生物需要的碳源来

糖类（最常用）、脂肪酸、

物质自含碳的有机物，因此可根据培养基

花生粉饼、石油等

虫营养物质判断微生物的代谢类型。

①对于异养微生物，含c、H、0、N

无机氮源：

的化合物既是碳源又是氮源；

N2、氨、锈盐、硝酸盐等主要用于合成蛋白质、

②含氮无机物不但能给自养微生物提

氮源有机氮源：核酸以及含氮的代谢产

供氮源，也能作为能源物质，提供能

尿素、牛肉膏、蛋白陈、酵物

量，如NH既作为硝化细菌的氮源也

母膏、玉米浆、豆饼粉等3

作为能源。

维生素、氨基酸、碱基，牛

微生物之所以需要补充生长因子，往往

生长肉膏、酵母膏、蛋白陈、动一般是酶和核酸的组成

是由于缺乏合成这种物质所需要的酶

因子植物组织提取液（肝脏浸出成分

或合成能力有限

液、麦芽汁）

为微生物生长繁殖及其

无机磷酸盐、硫酸盐、钾、钠、

一系列生命活动提供不

士卜钙、镁、铁等盐类

rm.可缺少的矿质元素

微生物细胞的组成成

水分，溶解物质，生物化

学反应的介质

3.培养基的类型及应用

分类依据培养基类型特点用途

液体培养基不加凝固剂工业生产、扩大培养

物理性质半固体培养基加入较少凝固剂观察微生物的运动、厌氧菌的分离和菌种鉴定等

固体培养基加入较多凝固剂微生物的分离、鉴定、活菌计数及保藏菌种等

化学成分天然培养基由天然成分配制而成，工业生产，降低成本

培养基成分不明确

由已知成分配制而成，微生物营养需求、代谢、分类鉴定，菌种选育及遗

合成培养基

培养基成分明确传分析等

培养基中加入某种化学

培养、分离出特定微生物。如分离酵母菌和霉菌时，

物质，以抑制不需要的

选择培养基可在培养基中加入青霉素；分离金黄色葡萄球菌

微生物的生长，促进需

时，可在培养基中加入高浓度的食盐。

用途要的微生物的生长

根据微生物的代谢特鉴别不同种类的微生物。如可用伊红-美蓝培养基

鉴别培养基点，在培养基中加入某鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌（菌落呈深

种指示剂或化学药品紫色，并带有金属光泽）。

4.培养基配制流程：计算一称量-溶化T调pH一灭菌

5.培养基的配制原则

①目的要明确：根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。

②营养要协调：培养基中的各种营养物质的浓度和比例要适宜。

③pH要适宜：一般，细菌、放线菌适宜pH7〜7.5,酵母菌和霉菌适宜pH4.5〜6。

例题精讲

【例5】|下表是关于4种生物的能源、C源、N源和代谢类型的描述，其中描述正确的一组是（）

硝化细菌乳酸菌根瘤菌衣藻

能源分解乳酸固定利用光能

氧化NH3N2

C源CO糖类糖类

2co2

N源NH

3N2N2NO3-

代谢类型自养需氧型异养需氧型异养需氧型自养需氧型

A.硝化细菌、乳酸菌B.乳酸菌、根瘤菌

C.根瘤菌、衣藻D.硝化细菌、衣藻

【答案】D

【例6】美国黄石国家公园是一片神奇的土地，研究人员在这里发现了一种罕见细菌，这种细菌内有许

多集光绿色体，每个集光绿色体含有大量叶绿素。正是这些叶绿素使得细菌能够在菌苔上同其

他生物争夺阳光，维持生存。这种细菌是人们迄今发现的第一种含有集光绿色体的喜氧微生物。

在能源问题日益突出的今天，这种细菌的发现有助于人们更好地开发利用光能。下列有关该菌

的叙述，正确的是（）

A.该菌有核膜和染色体

B.该菌是好氧细菌，其生命活动所需能量主要由线粒体提供

C.该菌是分解者

D.该菌可以利用光能制造自身代谢所需的有机物，属光能自养型生物

【答案】D

【例7】硫小杆菌是能在含有丰富硫化物环境中生长的细菌。这类菌能氧化H?S、硫磺和硫化物为硫酸,

并能利用在氧化硫或硫化物过程中释放的能量来同化C02进行生长。推理下列哪一种生物的结

构和代谢类型与硫小杆菌一致（）

A.乳酸菌B.硝化细菌C.小麦D.酵母菌

【答案】B

【例8】有关微生物的营养物质，下列说法正确的是（）

A.以C02为惟一碳源的微生物碳源物质也是它的

B.无机氮源不能提供任何能量

C.生长因子不是所有微生物都需要的，它的成分一般是酶或核酸

D.

【答案】D

【例9】下列有关细菌培养的叙述，正确的是（）

A.以尿素为唯一氮源的培养基上长出的都是尿素分解菌

B.在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长

C.培养基中的营养物质浓度越高对细菌的生长越有利

D.在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动

【答案】D

【例10】分离出的微生物还要进行鉴定，而微生物的鉴定需要鉴别培养基，下列不是鉴别培养基的是

（）

A.加入酚红的培养基B.加入刚果红的培养基

C.加入伊红一美蓝的培养基D.加入纤维素粉的培养基

【答案】D

【例11】F表为某培养基的配方，有关叙述正确的是（）

成分牛肉•膏葡萄糖K2HPO4伊红美蓝青霉素琼脂蒸储水

含量10g10g2g0.4g().065g1万单位适量1()00mL

A.能在此培养基上生长的大肠杆菌，拟核上有抗青霉素的基因

B.此培养基是天然鉴别培养基

C.此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准

D.此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中

【答案】D

三、无菌技术

知识点睛

1.无菌技术的原理：在高温高压、化学药剂或强酸强碱等条件的作用下，使微生物蛋白质凝固变性，从

而达到杀菌的目的。

2.无菌技术的内容

①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒

②用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌

③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行

④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触

3.消毒和灭菌

条件结果常用方法主要操作适用对象

煮沸消毒法100℃开水煮沸5~6min耐高温的液体或物品

70〜75℃煮30min或80℃牛奶、啤酒、酱油等不宜进

较为仅杀死物体巴氏消毒法

煮15min行高温灭菌的液体

温和表面或内部

接种室、接种箱、超净工作

消的物部分的微生紫外线消毒30W紫外灯照射30min台

主

母理或物（不包括

用体积分数为70%~75%的

化学芽抱和抱用于皮肤、伤口、动植物组

乙醇、碘酒涂抹，来苏水（又

方法子）化学药物消毒织表面消毒，空气、手术器

名来苏尔，其主要成分为甲

械、塑料或玻璃器皿等

基苯酚）喷洒等

微生物接种工具或其他金

灼烧灭菌酒精灯火焰灼烧

杀死物体内属工具，试管口或瓶口等

强烈

外所有的微干热灭菌箱160〜170℃加热耐高温的、需要保持干燥的

灭的理干热灭菌

生物（包括l~2h玻璃器皿、金属用具等

菌化因

芽抱和抱培养基、无菌水、工作服等

素lOOkpa,121℃维持

子）高压蒸汽灭菌物品的灭菌，也可用于玻璃

15~30min

器皿的灭菌

例题精讲

【例12】消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒

仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列适于消毒处理的是

（）

①皮肤②饮用水③牛奶④注射器⑤培养皿

⑥接种环⑦培养基⑧果汁⑨酱油⑩手术刀

A.①②③⑧⑨B.④⑤⑥⑦⑩C.①②⑤⑥⑧D.以上全部

【答案】A

【例13】无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中错误的是（）

A.对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌

B.将用于微生物培养的培养皿、接种用具和培养基等进行灭菌

C.为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行

D.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触

【答案】A

【例14】某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是（）

A.培养基分装到培养皿后进行灭菌B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线

C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D.使用过的培养基及其培养物可直接丢弃

【答案】B

【例15】高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是（）

A.将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中B.将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上

C.将转基因植物叶片接种到无菌培养基上D.将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上

【答案】C

（-）纯化大肠杆菌

1.制备牛肉膏蛋白陈固体培养基

（1）步骤：计算-称量-溶化一调pH-灭菌-倒平板

注意：

①倒平板的温度一般在50℃左右，温度过高会烫手，过低培养基容易凝固

②倒平板时，左手将培养皿打开一条缝，倒入培养基后立刻盖上皿盖

③培养基凝固后平板需倒置。这样既可以使培养基表面水分更好挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基,

造成污染。

2.纯化的原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个单个的菌落就是一

个纯化的细菌菌落。

3.方法：平板划线法、稀释涂布平板法

方法平板划线法稀释涂布平板法

通过接种环在琼脂固体培养基表面连将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同

续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体表面进行培

定义到培养基表面。在数次划线后培养，可以分养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微

离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面

细胞群体，这就是菌落。形成单个的菌落。

①第一次划线及每次划线之前都需要灼烧

①将涂布器末端浸在盛有体积分数为70%的酒精

接种环。

的烧杯中。取出时，要让多余的酒精在烧杯中

②灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，

注意滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上

以免温度太高杀死菌种。

事项引燃。

③划线时最后一区不要与第一区相连。

②操作中一定要注意防火！不要将过热的涂布器

④划线用力大小要适当，防止用力过大将培

放在盛有酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精。

养基划破。

目的在培养基上形成由单个菌体繁殖而来的子细胞群体——菌落（为单一菌种）

优点可以观察菌落特征；对混合菌进行分离可以计数，可以观察菌落特征

缺点不能计数操作相对复杂；平板不干燥效果不好，容易蔓延

（二）分解尿素细菌的分离和计数

1.菌株筛选的原理：选择培养

能合成服酶的细菌才能分解尿素。在选择培养基的配方中，把尿素作为培养基中的唯一氮源，原则上

只有可以利用尿素的微生物才能够生长。

2.细菌分离与计数的实验流程

土壤取样一样品稀释一取样涂布一微生物培养T观察并记录结果一计数菌落

3.测定微生物数量的方法

显微镜直接计数法活菌计数法

利用特定细菌计数板或血细当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌

原理胞计数板，在显微镜下计算一定落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的

容积的样品中微生物的数量菌落数，可以推测样品中的活菌数量

方法计数板计数稀释涂布平板法

缺点无法区分死菌与活菌过程较复杂

①设置重复组，增强实验说服力及准确性

操作显微镜观察②为保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进

行计数

每克样品中的菌落数=（C+V）xM

其中C代表某一稀释浓度下平板生长的平均菌落数

计算

V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（ml）

M代表稀释倍数

（三）分解纤维素的微生物的分离

1.分离原理：选择培养

在选择培养基的配方中，把纤维素作为培养基中的唯一碳源，原则上只有可以分解纤维素的微生物才

能够生长。

2.鉴定原理

刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖

和葡萄糖发生这种反应。当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红

色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解

菌为中心的透明圈。

3.实验流程：

土壤取样一选择培养一梯度稀释一将样品涂布到鉴别培养基上一挑选产生透明圈的菌落

附表1：主要微生物的鉴定

所用化学试剂过程

刚果红指示剂可以与纤维素形成红色复合物。随纤维素的分解，

纤维素分解菌刚果红指示剂

培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌

尿素分解菌酚红指示剂后若pH升高（尿素被分解为氨），指示剂变红，可以鉴定该菌为

尿素分解菌。

在某细菌培养基中加入伊红-美蓝指示剂，若菌落呈现深紫色，且

大肠杆菌伊红-美蓝指示剂

有金属光泽，则为大肠杆菌。

附表2：微生物的生长规律及影响微生物生长的因素

\生长

稳定期'

调整期对数期/X"衰亡期

\④

项目\①③

形成原因适应新环境条件适宜生存条件恶化生存条件极度恶化

繁殖〉死亡，繁殖X死亡，

不立即繁殖，较缓繁殖V死亡，

增殖特点迅速增殖，呈指数函活菌数量最多，

慢活菌数目急剧下降

数形式增长接近K值

细胞多种形态，出现

代谢活跃，体积增个体形态及生理特大量积累代谢

形态生理特征畸变、自溶等现象，

长较快征稳定产物

释放代谢产物

增长速率曲线

K值

儿乎不存在种内斗种内斗争最激与无机环境斗争最

说明增长繁殖最快

争烈激烈

①条件：只接种■一种细菌，以免杂菌干扰；恒定容积的液创，培养基。

②方法：取样调］查法（测细菌细胞数或测菌体干重）.

③注意：不要把生长曲线看成是自然种群的增长曲线，因为自然种群不存在衰亡期。但调整期和对

数期类“以于自然种群的"J”型增长，而纵观调整期、对数期和稳定期正好反映了“S”型增长。

附表3：影响微生物生长的环境因素

环境因素影响的原因最适条件不适宜因素导致的结果

影响蛋白质和低温时反应速率降低，高温时蛋白质和核酸的结构发生

温度25〜37℃

核酸的结构不可逆的破坏

影响酶的活性细菌：6.5〜7.5

PH酶失活或膜的稳定性改变，新陈代谢受阻

和膜的稳定性真菌：5.0~6.0

①严格厌氧型：短时间的有氧也会造成生长停滞或死亡

影响微生物的②兼性厌氧型：无氧时进行无氧呼吸，有氧时进行有氧

不同微生物所

氧呼吸作用或生呼吸

需条件不同

命③一般厌氧型：有氧无氧都进行无氧呼吸

④好氧型：只进行有氧呼吸，无氧时难以生存

0®例题精讲

【例16】从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是采集菌样—富集培养—纯种分离一性能测定。如

图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解。下列叙述错误的是（）

OQ。

甲乙

A.不同微生物的生存环境不同，培养噬盐菌的菌样应从海滩等高盐环境采集

B.对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择以淀粉为唯一碳源的培养基，并在高温下培养

C.获得图甲、乙效果的接种方法分别是平板划线法、稀释涂布平板法

D.配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行pH调整

【答案】C

【例17】如图表示从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。下列与该实验相

关内容的叙述中不正确的是（）

将土壤样品接种到含

有对羟茄基甲酸的液涂布到含有对羟

体选择培养基中基笨甲酸的培养

基平板表面

菌落在平

板上生长

①④

A.实验中所用的培养基①②③④均属于选择培养基

B.图中I、n过程实现了对目标微生物的稀释

C.统计⑤培养基中的菌落数并不一定代表接种到④上的活菌数

D.在⑤培养基上形成菌落的微生物同化作用类型为异养型

【答案】B

【例18】图甲表示酵母菌、硝化细菌和乳酸菌在半固体培养基中的生长情况，图乙表示这三种微生物的

增殖速度与氧气浓度之间的关系。下列有关叙述正确的是（）

对

OOQ微

M4增

殖

M物

速

UH的

度

NH相

1230.010.1110O,浓度

图甲图乙

A.图甲中1、2、3号试管中分别培养的是酵母菌、硝化细菌和乳酸菌

B.图乙中a、b、c分别表示2、3和1号试管中的微生物在不同氧气浓度中的增殖速度

C.将混杂在一起的三类微生物接种到不含有机碳源的培养基中，可分离出硝化细菌

D.用混有酵母菌的乳酸菌制酸奶，向牛奶中加入青霉素，密封即可

【答案】C

【例19】组氨酸缺陷型沙门氏菌是由野生菌种突变形成的，自身不能合成组氨酸。将其接种在缺乏组氨

酸的平板培养基上进行培养，有极少量菌落形成。2-氨基笏是一种致突变剂，将沾有2-氨基笏

的滤纸片放到上述平板培养基中，再接种组氨酸缺陷型沙门氏菌进行培养，会有较多菌落出现。

以下叙述不正确的是（）

A.在接种前，2-氨基笏和滤纸片须进行灭菌处理

B.若用划线法接种可以根据菌落数计算活菌数量

C.基因突变的可逆性与是否存在致突变剂无关

D.此方法可以用于检测环境中的化学致突变剂

【答案】B

【例20】临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然

后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：

（1）为了从样本中获取致病菌单菌落，可用法或法将样

本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。

（2）取该单菌落适当稀释，用法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养

24h,使其均匀生长，布满平板。

（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均

匀至于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致

病菌对抗生素A；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗

生素B；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明；

含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污

染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的。

（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素。

【答案】（1）划线稀释涂布（或涂布）（2）涂布

（3）敏感不敏感该致病菌对C的敏感性比对A的弱耐药菌（4）A

【例21】幽门螺杆菌（Hp）感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制

成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：

|配制培养基|—“灭菌、倒平板|—＞因——画一■醺

请回答:

（1）在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有,它能以尿素作

为氮源；若有Hp,则菌落周围会出现___色环带。

（2）步骤X表示o在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液到培养

基平面上•菌液稀释的目的是为了获得_______菌落。

（3）在培养时，需将培养皿倒置并放在______________中。若不倒置培养，将导致。

（4）临床上用l4C呼气试验检测人体是否感染Hp,其基本原理是Hp能将14C标记的

分解为NH.3和14co2。

【答案】（1）臊酶红（2）接种涂布单（3）恒温培养箱无法形成单菌落（4）尿素

【例22】某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、

镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（