复杂体系中成药的X射线付里叶

复杂体系中成药的X射线付里叶指纹图谱分析方法项目完成单位：国家药物及代谢分析产物研究中心项目完成人：吕扬摘要本项目选择了16种不同的中成药品种：柏子养心丸、全天麻胶囊、牛黄解毒片、活血通脉片、普乐安片、冠脉宁片、牛黄解毒丸、安神补心胶囊、益脑胶囊、参芪降糖胶囊、金水宝胶囊、六味地黄丸、杞菊地黄丸、龙胆泻肝（水丸，颗粒，片剂）、脑得生（颗粒、胶囊）、双黄连（胶囊，片剂）等复杂体系作为研究对象。通过对不同种类中成药、相同种类不同生产厂家样品、相同品种的同一厂家生产不同批号样品、相同种类不同剂型（片剂、颗粒、胶囊、水丸、丸剂等）的样品、组方相似中成药等中成药共计104个样品进行了系统的研究。完成了全部样品的X射线衍射实验、计算和分析，分别获得了每种中成药和不同剂型的对照X射线的指纹图谱。并建立了中成药对照X射线Fourier指纹图谱数据库系统。一、研究背景中成药是中医药学宝库中的重要组成部分，发展历史悠久，种类繁多并已从传统剂型丸、散、膏、丹发展至今逾35种剂型近万个品种，对于人类防病治病起到了重要作用。所谓中成药是指以中医药理论为指导，以中药材为原料，按规定的处方和工艺加工成一定的剂型，供医生临床辨证使用的一类制剂。中成药的历史可以追溯到夏商时代，大约公元前就有了药酒的记载。实际上，自晋代葛洪在《肘后备急要方》中首次提出“成药”概念以来，中成药也有一千七百多年的历史了。对于中成药的质量控制，在我国现存最早的药学著作《神农本草经》中即有“新陈真伪”的记载。尤其是在南宋时期由国家政府颁布了我国第一部中成药制剂规范《太平惠民和剂局方》，所载质量对照的项目虽只是药品性状、气味之类的鉴别但至今仍是中成药质量初步考察时不可缺少的检查项目。此后历代药典、医药典籍都对中成药的质量进行考察并对质量对照进行补充，但由于受科学技术条件的限制，中成药的内在质量控制上缺乏科学检验方法，造成“丸散膏丹，神仙难辨”的局面。中成药是由多味中药材配伍而成的复方，其化学成分复杂，有效成分不清楚使其质量鉴别和含量测定存在许多困难。有关中成药有效成分及质量鉴别的研究日益为人们所关注。上世纪八十年代未，我国开始将X射线衍射法用于中药材的鉴别。近年来，随着仪器分析技术及计算机信息处理技术的迅猛发展，中药指纹图谱技术应运而生，采用适当的处理程序获取某种中药提取物特征，用光谱指纹图谱或色谱指纹图谱表征其组成与结构，经宏观综合分析，达到鉴别真伪优劣的目的。但这些指纹图谱仅表征了中药材或中成药部分提取物中所含有的化学组分，故不能对中药的整体质量进行全面而综合的评价。中成药的质量控制从无到有，从不完善到逐步完善，至今已经有了很大的提高，但还存在许多问题，如中成药是多味中药材配伍而成的复方，药效为协同作用，其有效成分还不十分清楚，真正有效的物质可能是中成药中含量较多的物质，也可能是含量少的物质，亦或是复方中单味中药的协同影响，或是复方中多种化学成分的协同作用。另外，中成药有效成分与无效成分的概念是相对的，某种成分在防治某一疾病是有效成分，在防治另一疾病是则可能是无效成分。如含有人参的中成药，人参中具有药理活性的组分不只是人参皂苷，炔醇类有抗癌活性，多糖类有降血糖活性，三七素有抗凝血活性等。这些都是人参的临床使用的依据。因此仅仅根据人参皂苷的含量并不能完全评价人参质量的优劣。因此目前中成药质量对照中只是对一种或少数几种成分进行定性定量分析，不能真正反映中成药的内在质量。中成药质量对照化学定性检测方法缺乏专属性，化学定性鉴别反应一般是一类化学成分共有的反应，特异性不强，如三氯化铁的显色反应只能说明是酚类或酚酸类等成分。类似的定性规定对投料中出现的混淆品，代用品，缺用品，或含有与规定中药材同类成分的混淆品，就不能进行有效的鉴别。这样就影响了中成药质量评价的客观性和准确性。综上所述，可以看到随着科学技术的发展和各种新技术的应用，中成药的质量控制与真伪鉴别已跃上一个新阶段，但如何评价中成药的整体质量还是一个远未解决的问题。本课题小组从上世纪90年代末始，探索了应用X射线Fourier指纹图谱分析方法实现对中药材的识别、鉴定与质量控制的研究。本项目的中成药X射线Fourier指纹图谱分析研究是在此基础上获取客观、全面地评价中成药整体质量问题。二、样品与仪器1、样品制备对中成药样品的处理方法：片剂(剥去糖衣)、胶囊剂(除去外壳)、颗粒剂、散剂、水丸等样品进行机械粉碎、研磨，过100目筛，制得X射线衍射实验用粉末样品。对蜜丸可直接压制成光滑薄片后进行X射线衍射实验。2、实验仪器及条件彻日本往理学奏Ri纽ga盖ku绪D希/m取ax宵-2垄40带0缠型粉司末衍屈射仪悲。实为验条萌件：徒Cu铸K夕1辐瓜射，趟石墨染单色登器，丸管压么4镜0k需V芬，管行流1捏5蛋0m轨A罢，扫马描范符围散2轮θ愉值氧3雾～6潮0免，扫缠描速需度叔8轨/m塑in凯，发宅散狭攻缝旁DS袍=1遍，接阀收狭灿缝甩RS扰=0窄.1耽5m委m达，散君射狭豪缝乱SS佳=1但。丙3、缝数据匙格式酷说明戚(1犹)抄以海下的煌衍射叙峰值报将用劲晶面克间距科d(顿Å)锻和相得对强悄度抄(铺I/蒜I照0垃)侄表示丙，记述为d共/(弊I/括I稼0风)。离(2塌)悬中成雄药的玉对照冠X射疏线晌Fo显ur屈ie谈r荣指纹银图谱浮编号美采用影本组注已建故立的柜“融中成往药X载射线缴F追ou转ri斥er唐指纹孩图谱数库系驱统多”描中的传序列性号。旅三、赤研究悄结果习本项晓目共颗完成踪了1秧6种犁中成蔬药共留计1蚀04蝴个样致品的它衍射挤实验祖和分倘析计侧算研顾究工弱作。筑样品聚涵盖恐中成路药的只不同准品种献、相乏同品蓬种不窑同厂菜家、逮相同您厂家膀不同臣生产喊批号柔、同友品种乐不同悬剂型补等样滑品，惕分别及获得堂了1袭6种爪中成梁药及何其不里同剂拴型的爷对照别X射貌线F宽ou狭ri他er热指纹胸图谱飞，具宰体分缠析结既果如雪下：驼1、然不笋同批泪号中毁成药坏X射贪线F萌ou虾ri便e进r猫指纹径图谱补分析泳(假1出)射柏子井养心滋丸划柏子别养心扩丸是筛《中对国药愉典》庆一部锻收载枝品种厨，由阳柏子骄仁盛(支25吼g)昼、党童参乔(略25侧g)湖、炙湖黄芪谎(稍10公0售g)违、川便芎丽(柄10嗽0仆g)畏、当谢归刃(接10亦0枪g)魂、茯良苓饺(引20挺0茶g)勒、远墓志娃(询制吐)(铺25对g)缘、酸哗枣仁然(门25休g)漫、肉忌桂则(糊25在g)菊、五懒味子葛(歼蒸鼠)(诞25钉g)挣、半府夏曲昆(缩10口0字g)妇、炙粥甘草臂(萍10召g)奸及朱掘砂枣(宇30均g)求等1价3味貌中药粮材配犯伍加面工而由成。活它具冶有补鹊气、咳养血犁、安誉神之驼功效吓，可赌治疗巴心气呈虚寒绳、心茎悸易云惊等肯病症丸。颂取市胖售检3格个批毕号柏把子养特心丸救，样嗓品的稀编号渣、图扶号、烘生产捞厂家悦及批魄号等挎见下到表众。罢柏子季养心拣丸样纹品的考编号匠、图谣号、蔑生产劣厂家覆及批经号腔编号哄率屋扣样斜品名蹲称龙代锐罪航类图茅号宴贪埋默眨怖芦生柿产厂探家叨磨批号少1毛#赖柏子贞养心流丸黑W1秧00谨1-打1疾同仁讲堂集棕团公各司北丧京中预药五社厂什90漆30读02变4墨2块#桌柏子梦养心晚丸唯W1梨00严1-休2往同仁讲堂集衰团公扯司北轰京中始药五寺厂拣90啄30温03堡0售3屠#买柏子苦养心假丸赔W1没00蔑1-点3旦同仁晓堂集终团公喂司北筹京中脖药五叫厂晚90语30黎03招9农(a挨)苍分析寒比较取3个秀柏子津养心敞丸样致品的驼X射支线衍吊射图堡谱的便几何附拓扑该特征针完全牛一致袭，从鸽而获代得柏拣子养情心丸碰的对筝照X恩射线澡Fo兆ur芬ie谷r扎指纹宰图谱萍，见侵下图接所示李。琴(b言)冒计算仆3个撞柏子茎养心割丸样孝品中垄共同仅存在她的2升0个喇衍射鹅峰，宰其平掏均值稍为：突3.萌49伞/4孩2监，谊3.肚36召/1喜00姐，3疑.1利6/酿46宋，2剂.8扰66珍/9肺7，巩2.帝37毙5/岗26块，2甲.2拜35控/2蚊3，势2.简20哲3/爽23丧，2僻.0村77产/3典0，冒2.栗06岁7/育28壤，座2.好06柔1/愿25蛇，止2.羞03美2/舞22佳，2脉.0工23烧/2仅2，盘1.勿99阅1/此26梁，1节.9余81惧/3燕1，霜1.缘76艘8/飘21歉，1嗽.7死39锈/2意1，场1.创73疲3/默22删，1欲.6脑81经/2剧2，唇1.准67祖61掏/2字0貌，米1.矛58这4/敌12底，以父此作送为柏全子养系心丸冲的特道征标拳记峰或值。皆由柏抹子养圣心丸骆的X榜射线迅衍方柏子裁养心黑丸对龟照X泡射线跃Fo奉ur微ie稼r你指纹网图谱海射特猜征标缝记峰放与X湿射线饲Fo晶ur厉ie释r令图谱们的几见何拓埋扑图困形规孙律构旬成柏效子养捡心丸要的对滋照X棉射线患Fo洗ur墙ie漂r指丘纹图裹谱。渡(c汁)钓在柏耕子养途心丸领的X挂射线细衍射邀特征寻标记翻峰中宇，可州以找戏到朱间砂的缘衍射玉峰，求对照晒国际骆衍射阳数据柿中心条(俱IC厉DD羞In倘te塑rn鹊at拜io走na艳l菜Ce辉nt最re之D爹if舌fr泳ac希ti吐on拜D蜘at需a鞋)，牧粉末悟衍射木文件那PD缸F份06观-0浓25套6误，朱脏砂的幼峰值警为：悠3.见36警/1桂00颗-3溜.3边59嫩/1贺00裙，3花.1虹6/画46报-3玻.1达65舌/渐30代，2狗.8积66辈/9捷7-租2.虽86朝3/狐95其，2盆.3困75高/2开6-秒2.毅37径5/隙10炕，2即.0杨77门/3纺0-绝2.优07或4/病25陪，2肝.0院23洒/2反2-窜2.闯02涉6/牺12黎，1冬.9稠81剂/3锦1-伟1.暮98限0/很35笼，1闯.7赖68肉/2特1-董1.潜76决5/瓣20僚，1兽.7工33捐/2遥2-素1.勺73岩5/歉25妨，1逮.6丸81僻/2储2-毁1.阅67恐9/伏25傲，1桃.5启84份/1逮2-武1.灰58勿3/辟6烤。二水者一巡致，墓符合泛X射认线衍铸射数士据对恢照偏乱差范恒围。每表明盛该方澡法可冰以识拔别中恳成药断中以凉晶态替形式付存在贸的矿宇物中傲药，症若采秃用内励标法蛙可发膜展为序对中兵成药辽中矿吊物中余药进覆行定恰量分钉析的邀方法贷。酱(d危)量中成霞药的投对照兔X射足线途Fo宴ur挡ie徒指纹伞图谱帐反映胞了中习成药解中所柱含全限部化狠学组丰分的捎整体俊结构钳特征烈，因猛此利联用柏白子养色心丸谁的对桂照X穷射线砍Fo料ur苦ie补r广指纹泄图谱诊可以胶实现屑其鉴螺定和融质量滔控制谎。携(2邪)怨全天诱麻胶宰囊馆全天畏麻胶真囊是熔《中伞国药脆典》佛一部从收载集品种谊，由魔中药幸材天卷麻经顶机械俊粉碎利加工弯成细桌粉后觉制成览的胶烦囊剂牌。它悟具有姻平肝柱，息验风，怜止痉惧之功陕效，继可治更疗头榴痛眩伤晕，秋肢体香麻木厦，癫铲痫抽拾搐等爱病症少。本煮文应施用粉子末X腐射线沉衍射弱图谱可分析核方法写对贵刘州益冶康药吃业有己限公苏司生应产的把3伴个批补号的金全天景麻胶容囊样水品进匪行分渴析计唤算，泛获得蠢了能哄够表缝现其氧整体经结构景特征渐的对贺照X雪射线貌Fo化ur颗ie编r富指纹趴图谱占的几逼何拓攀扑图急形及愧其特纤征标件记峰毅值，券并以郊此作吊为全时天麻使胶囊辱的质盼量鉴带定对丑照。相取市貌售巨3香个批改号全愚天麻如胶囊饭，样廊品的批编号饰、图朵号、国生产寄厂家恩及批境号等鸟见下古表棕。胜全天棚麻胶贱囊样所品的蒸编号艳、图遭号、滑生产仔厂家肌及批判号呈编号朽牲的医样俊品名间称倘踪图号结循稀生轿产厂恰家场取碎掀滩安滋批号墙1寨#客全天饱麻胶舱囊出J1冈01辜4祖-1咱贵州三益康怀药业塘有限勾公司牛97集04素02愚2厘#营全天的麻胶码囊僚J1全01皂4覆-2蕉贵州遍益康匆药业屿有限闭公司粮20耐00定05临04亩3冷#棵全天抵麻胶宋囊婶J1咬01盾4奇-3敏贵州列益康踩药业肚有限德公司倚20聚00奸05掠05菌(a愁)肿分析输比较供3个剪全天转麻胶决囊样更品的营X射骄线衍许射图地谱的乞几何划拓扑夸规律篇一致危，从倾而获享得全皂天麻加胶囊亿的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