药物量效曲线及竞争性拮抗剂的A的测定

药物量效曲线及竞争性拮抗剂的pA2的测定[适用对象]药学、药剂学专业[实验学时]3学时一、实验目的学习激动剂量效曲线的测定方法，计算竞争性拮抗剂的pA2值二、实验原理在一定范围内药物随剂量或浓度的增加，效应也相应增加。以效应为纵坐标，剂量的对数值为横坐标，可绘制出对称的“S”型曲线。本实验选择对M、N受体有兴奋作用的乙酰胆碱（ACh），应用蟾蜍腹直肌为标本（含N2受体）进行实验，按累积浓度进行实验，观察ACh剂量的增加，肌肉收缩效应的变化，从而绘制量效关系曲线。三、仪器设备动物：蟾蜍1只器材：氧气瓶、器官浴槽、铁支架、双凹夹、肌张力换能器、蛙板、探针、100μl微量注射器、10ml注射器、手术剪、眼科剪、眼科镊、培养皿、烧杯、丝线、计算机试剂：10-4～10-1mol·L-1乙酰胆碱，10-3mol·L-1筒箭毒碱，任氏液四、相关知识点本课程知识点：受体激动药与受体拮抗药、竞争性拮抗、传出神经药物作用机制、量效曲线、pA2多课程知识点：受体学说、计算机操作、数学计算五、方法与步骤1.实验装置的连接：①通过进水口对恒温槽内供水至红线处，接通电源。按下加温开关，使恒温在37℃。②排液口用橡皮管连接到水杯，将任氏液装入浴管内，调节气泡至每秒3～4个。③将张力换能器固定，使其对准浴管的上口。2.标本制备与固定：取蟾蜍一只，断头处死，用探针破坏脑和脊髓，背位固定于蛙板上。剪开腹部皮肤，暴露腹直肌。在耻骨端及胸骨端，各以细线结扎，并自腹白线将两片腹直肌分离。将剪下的腹直肌标本，其一端固定于标本板固定钩上，迅速移至含有10ml任氏液的器官浴槽中，通入混合气体；另一端与张力传感器相连，调节微调器，使标本负荷1g，平衡0.5h，平衡期间每间隔15min更换一次营养液。谅3．都给药滨方法揉及曲呀线描辱记闲按半驻对数悲摩尔倾浓度殊累积爹给药毫法，股依次筑加入锤激动队剂A乱C睁h，奋其方躺法见敬表：绝原始粱浓度匙（m落ol涨·棋L放-1跃）若抽取孤量（浮μl帅）妈浴槽棵终浓邮度（自mo烛l劳·悄L高-1明）馋10狡-5挤10孤1×贱10轻-8椒10外-5经20破3×兆10抬-8悦10弹-5元70遇1×于10违-7孝10叛-4辛20闪3×私10述-7北10乖-4溉70臂1×容10横-6撕10锻-3汽20捆3×孙10选-6字10柜-3证70敬1×黑10况-5拦10旅-2私20镜3×晓10率-5丰10衰-2烧70泰1×偏10知-4危10愿-1振20注3×处10奔-4吊10栗-1吉70扭1×炕10括-3附……近……砖……赵按上祸述方暗法给哪药，语当达闲到最党小有禁效浓举度后爷，每葛加一渣次药匠，将鲜出现赶一次餐收缩非，待燃收缩山反应填达最肆大时步，立绍即加览入下存一剂例量，承直至疮加药宪后收枕缩反称应不林再增胁加，应即达安最大己效应若，即租描记鸣出A免C汉h的课量效柱曲线尝（第指一条便量效销曲线江）。拐连续鄙用1艘0m亦l营洁养液甲冲洗涌标本留两次插，再驰每间匆隔1群5分姻钟更常换一炮次营蠢养液站，直志至收其缩张赛力恢矛复到腥正常疏（收青缩张伐力曲恢线回腐至基勉线）鄙。然约后，能加入杆拮抗床剂筒辨箭毒抖碱1左0杰-3利mo怠l·悠L坟-1劲3辟0μ庄l，鼻即浴疤槽终剩浓度毛为3庄×1苗0难-6扣m脖ol央·L行-1突。1慧0m陆in绍后按丘上述跑方法蛾重复慢制作桑A受C扎h第陕二条贩量效断曲线啄。茂拣4.奔实验户结果木分析刺详1典）从所剂量铜反应峰曲线倡上求锡出涛未加装入拮寺抗剂疲前激夺动剂极引起妄50纲%反迹应所坊需要似的浓习度（轰mo凶l·者L在-1幅），削以[虚A合0堤]表部示。盒加入诚不同程浓度价筒箭哑毒碱景后，继AC轿h烛的剂痛量反师应曲愿线右捧移。跑从曲拴线上盈求出怒筒箭早毒碱作存在指时，畅AC住h爬产生皂50吼%反筝应所孝需的牛浓度赠（岩mo驻l·骑L喂-1茂），般以[耗A孙B菜]表欣示。难2）甜pA恒2箱值的茫计算代黑以l推og红（A素B私/A眯0滔-1搅）为录纵坐隆标，句相应垦的筒催箭毒覆碱浓煤度诊的朵负对木数（坚-l笋og刮[B北]）姐为横窄坐标执，作捆图得饿一直界线，纸此直谋线的兄方程挡式为白：铸pA糟x=陈-l灶og熊[B俩]+驱lo也g（软[A短B筹]/乌[A暂0代]-饿1）哑令[朱A勾B莲]/器[A垦0钥]=汽X，嘴则p荐Ax送=-庸lo狂g[渐B]柳+l盈og现(X貌-1热)，浓其中英[B拌]为垄拮抗穿药的确浓度偏（m离ol读·序L未-1饥）。冰pA蹲x反们映拮递抗药库的拮钉抗效比能，恨表示炭在[漏B]覆浓度禾的拮援抗药免存在院时，悉激动拴剂误需加属在X田倍浓仅度才恢能达灿到未农加拮啊抗药乐时的棍效应幼。帜pA裤2愉表示耗当某课浓度碌拮抗琴药存牢在时庭，需述将激鄙动药呜的浓认度加高大1析倍才橡能达岸到未完加拮市抗药霉时的堡效应烂，即另当[瘦A调B奴]=索2[毁A联0攻]时麻，l串og小2[雕A腰0守]/辅([愿A免0圾]-抱1)品=0宿，p址A摄2设=-矩lo远g[淡B]白。柔上式糕表示夫当l委og案(X壳-1朽)=遭0时养，-欣lo倦g[蓬B]青轴的稻截距伶即为遍pA畜2尿值。我5．摸注意惭事项匹1）但标本纳勿用亭手拿舟，应吴以镊甩子取汉，亦挑不能偶在空老气中炭暴露救久，京以免佩失去祸敏感颗性。领2）验标本义不要趴触及准浴管郑壁躲3）欣浴管议中的糠任氏付液量小应始控终保强持一饱致，脆否则社将影扶响药题效。计4）筹加药禽时不询要滴遮在管滨壁上商，应尊直接位滴在碑液面残上。详5）尤每只县注射坚器只依能用加来抽乒取一樱种浓维度的劝药液曲。猪六、摇实验券报告并要求排实验父报告蓬内容页应包碌括：秩【实镜验目缓的】鹿、【史实验苗原理响】、连【器拉材】压、【妨药品混与试辽剂】着、【销动物夹】、仿【实赏验方该法】轨、【引结果帐】及上【讨外论】蛋等部愚分。价【结蓝果】沉要对衔所得保实验朴数据脊进行劲统计刃分析硬；【懂讨论凉】要巾对实籍验中逢遇到牌的问者题进争行描尤述并千分析器原因蒸。雄七、废思考版题戴从量载效曲由线分馆析效尊应强冻度与咽药物梁剂量绕的关大系，字并指疲出其匹重要串意义天。死合用准具有着协同赞或拮调抗作尊用的播药物皮，对萌