第七章芳香胺类药物的分析演示文稿

第七章芳香胺类药物的分析演示文稿当前第1页\共有92页\编于星期六\14点优选第七章芳香胺类药物的分析当前第2页\共有92页\编于星期六\14点第一节芳胺类药物的分析芳胺类药物分为两类芳伯氨基未被取代芳伯氨基被酰化一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与主要化学性质（一）基本结构与典型药物对氨基苯甲酸酯母体当前第3页\共有92页\编于星期六\14点苯佐卡因盐酸普鲁卡因第一节芳胺类药物的分析当前第4页\共有92页\编于星期六\14点盐酸丁卡因盐酸普鲁卡因胺第一节芳胺类药物的分析当前第5页\共有92页\编于星期六\14点1.芳伯氨基特性：重氮化－偶合反应；芳醛缩合成Schiff碱；易氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。（二）主要理化性质水解特性：分子结构中的酯键或酰胺键易水解，除盐酸丁卡因外水产物为对丁基苯甲酸外，上述均为对氨基苯甲酸。弱碱性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的侧链，故具有弱碱性。4.其它特性：因结构中有芳伯氨基或同时具有脂烃胺侧链，其游离碱多为碱型油状液体或低熔点固体，难溶于水，可溶于有机溶剂。其盐酸盐则易溶于水。第一节芳胺类药物的分析当前第6页\共有92页\编于星期六\14点二、酰胺类药物的基本结构与主要化学性质第一节芳胺类药物的分析（一）基本结构与典型药物酰化NHCO当前第7页\共有92页\编于星期六\14点对乙酰氨基酚（扑热息痛）醋氨苯砜（一）酰胺类药物的基本结构与典型药物当前第8页\共有92页\编于星期六\14点盐酸布比卡因盐酸利多卡因（一）酰胺类药物的基本结构与典型药物当前第9页\共有92页\编于星期六\14点（一）酰胺类药物的基本结构与典型药物盐酸罗哌卡因盐酸妥卡尼当前第10页\共有92页\编于星期六\14点

1.水解后显芳伯氨基特性：分子结构中含有芳酰氨基，酸水解后显芳伯氨基的特性反应,可用重氮化—偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色。注意空间位阻的影响。

2.水解产物易酯化：对乙酰基酚和醋氨苯砜，酸水解生成醋酸，在硫酸中与乙醇反应，发出醋酸乙酯香味。

（二）主要化学性质二、酰胺类药物的基本结构与主要化学性质当前第11页\共有92页\编于星期六\14点3.酚羟基特性：对乙酰基酚有游离酚羟基；醋氨苯砜酸水解有酚羟基，可与FeCl3发生显色反应，可相互区别。4.弱碱性：利多卡因和布比卡因烃胺侧链有叔胺氮，显碱性，可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应，可相互区别。5.与金属离子发生沉淀反应：利多卡因和布比卡因酰氨基上氮可与Cu2+,Co2+生成有色配位化合物沉淀。二、酰胺类药物的基本结构与主要化学性质当前第12页\共有92页\编于星期六\14点三、鉴别试验（一）重氮化-偶合反应

分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物，均可发生此反应。Ar-NH2HClNaNO2重氮盐OH--萘酚橙黄~猩红色第一节芳胺类药物的分析生成偶氮染料当前第13页\共有92页\编于星期六\14点

直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺、对氨基水杨酸钠等间接反应：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、贝诺酯

（一）重氮化-偶合反应但盐酸利多卡因、盐酸布比卡因由于它们的空间位阻效应，很难发生重氮化-偶合反应。当前第14页\共有92页\编于星期六\14点1.苯佐卡因和盐酸普鲁卡因ChP（2000）[鉴别]（1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ）取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。（一）重氮化-偶合反应当前第15页\共有92页\编于星期六\14点2.对乙酰氨基酚ChP（2000）[鉴别]（2）取本品约0.1g，加稀盐酸5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性β-萘酚试液2m1，振摇，即显红色。（一）重氮化-偶合反应对氨基酚对乙酰氨基酚、¾¾®¾DHClH2O当前第16页\共有92页\编于星期六\14点（一）重氮化-偶合反应当前第17页\共有92页\编于星期六\14点

丁卡因虽无芳伯氨基，但分子中的芳香仲胺在酸性溶液中可与NaNO2反应生成N－亚硝基化合物的乳白色沉淀。特例：盐酸丁卡因：当前第18页\共有92页\编于星期六\14点（二）与三氯化铁反应对乙酰氨基酚+FeCl3蓝紫色化合物三、鉴别试验3+当前第19页\共有92页\编于星期六\14点

1.与铜和钴离子反应：（芳酰氨的特征）

利多卡因与硫酸铜生成蓝紫色配位化合物，该有色物质溶入氯仿显黄色；与氯化钴生成亮绿色细小钴盐沉淀。（三）与重金属离子反应三、鉴别试验当前第20页\共有92页\编于星期六\14点具体反应如下：当前第21页\共有92页\编于星期六\14点2.羟肟酸铁盐反应

基于普鲁卡因胺分子中的

芳酰胺结构。（三）与金属离子反应芳酰胺羟肟酸当前第22页\共有92页\编于星期六\14点3.与汞离子反应盐酸利多卡因+H2NO3+Hg(NO3)2黄色对氨基苯甲酸酯＋H2NO3+Hg(NO3)2红色或橙黄色（三）与金属离子反应当前第23页\共有92页\编于星期六\14点1.盐酸普鲁卡因的鉴别(四)水解产物反应盐酸普鲁卡因+NaOH普鲁卡因油状物对氨基苯甲酸钠+二乙氨基乙醇（使湿润的红色石蕊试纸变兰色）对氨基苯甲酸钠+HCl对氨基苯甲酸（白色）（白色沉淀）当前第24页\共有92页\编于星期六\14点具体的化学反应：当前第25页\共有92页\编于星期六\14点2.苯佐卡因的鉴别

苯佐卡因+NaOH乙醇乙醇+I2

+NaOHCHI3（碘仿臭气，黄色沉淀）(四)水解产物反应当前第26页\共有92页\编于星期六\14点(五)制备衍生物测熔点1.三硝基苯酚衍生物的制备：盐酸利多卡因和盐酸布比卡因黄色沉淀黄色沉淀当前第27页\共有92页\编于星期六\14点

2.硫氰酸盐衍生物的制备：盐酸丁卡因

(五)制备衍生物测熔点白色结晶强酸制弱酸当前第28页\共有92页\编于星期六\14点(六)紫外特征吸收光谱法

1.在λmax处测定供试液的吸光度。

例如：盐酸布比卡因在0.01mol/L%盐酸中于λmax=263nm和λmax=271nm测定最大吸收，其吸光度分别为0.53～0.58与0.43～0.48

2.在规定的浓度测定λmax

例如：醋氨苯砜5μg/ml;在λmax=256nm;284nm处有最大吸收。

当前第29页\共有92页\编于星期六\14点(七)红外吸收光谱法

盐酸普鲁卡因ChP（2005）

盐酸普鲁卡因胺[鉴别]（3）本品的红外光吸收图谱与对照的图谱一致。见书P164-165当前第30页\共有92页\编于星期六\14点四、特殊杂质检查（一）对乙酰氨基酚中特殊杂质检查对硝基氯苯对硝基酚水解对氨基酚还原对乙酰氨基酚乙酰化对乙酰氨基酚的合成路线当前第31页\共有92页\编于星期六\14点（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查

1.乙醇溶液的澄清度与颜色：因其生产工艺用铁粉作还原剂，可能带入，致使乙醇溶液产生混浊，中间体对氨基酚易氧化产生有色氧化产物，在乙醇溶液中显橙红色或棕色。

四、特殊杂质检查检查方法：配制0.1g/ml本品乙醇溶液，溶液应澄清，无色；如显混浊，与1号浊度标准液比较，不得更浓；如显色，与棕红色2号或橙红色2号标准液比较，不得更深。当前第32页\共有92页\编于星期六\14点2.有关物质检查：Ch.P是以对氯苯乙酰胺为对照品，采用TLC法中的杂质对照品法。3.对氨基酚检查：利用对氨基酚在碱性条件下可与

亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化合物，采用比色法。四、特殊杂质检查当前第33页\共有92页\编于星期六\14点(二)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查为什么要检查？怎样检查？采用TLC法中的杂质对照品法进行检查。四、特殊杂质检查杂质来源：水解产生、脱羧、氧化当前第34页\共有92页\编于星期六\14点五、含量测定Ch.P中的苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因胺及其制剂可直接采用本法；醋氨苯砜及注射液水解后用本法。Ar-NH2;Ar-NHCOR;Ar-NO2均可采用此法。即：具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。（一）亚硝酸钠滴定法

当前第35页\共有92页\编于星期六\14点还原当前第36页\共有92页\编于星期六\14点1.原理：Ar-NHCOR+H2OAr-NH2+RCOOHH+Ar-NH2+NaNO2+2HClAr-N2+Cl-+NaCl+2H2O五、含量测定（一）亚硝酸钠滴定法

当前第37页\共有92页\编于星期六\14点测定主要条件：(1)加KBr增加反应速度重氮化的反应历程为：NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2OKHCl（一）亚硝酸钠滴定法

五、含量测定当前第38页\共有92页\编于星期六\14点重氮化的反应历程为：控速步骤当前第39页\共有92页\编于星期六\14点KBr+HClHBr+KClHNO2+HBrNOBr+H2OKHBr∵

KHBr比KHCl大300倍∴生成NOBr量大得多∴加快反应速度重氮化的反应历程为：当前第40页\共有92页\编于星期六\14点

(2)加过量HCl加速反应：

①重氮化速度加快；

②重氮盐在酸性介质中稳定；

③防止生成氨基偶氮化合物。

Ar-N2+Cl-+H2N-Ar

Ar-N=N-NH-Ar+HCl

一般摩尔比为Ar-NH2:HCl=1:2.5~6。（一）亚硝酸钠滴定法

五、含量测定当前第41页\共有92页\编于星期六\14点(3)室温条件下滴定:温度高反应速度快；每升高10℃加快2.5倍但太高,可使Ar-N2+Cl-+H2OAr-OH+N2+HCl(4)滴定管尖端插入液面下滴定（一）亚硝酸钠滴定法

五、含量测定当前第42页\共有92页\编于星期六\14点3.指示终点的方法(实验装置见书P171)

(1)永停滴定法

溶液检流计

终点前：

无过量无电流

HNO2

终点时：有过量有电流（使指针偏离零

HNO2永停在某一位置）

(2)外指示剂法

用KI-淀粉指示剂指示终点的原理：

2NaO2+2KI+4HCl

2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2OVV五、含量测定（3）内指示剂法

中性红不可逆指示剂当前第43页\共有92页\编于星期六\14点(二）非水溶液滴定法

基于盐酸丁卡因、盐酸利多卡因和盐酸布比卡因侧链叔胺氮具有弱碱性，因此采用非水溶液滴定法测含量。在滴定盐酸丁卡因时，因其在冰醋酸中碱性弱，加醋酐可增加其碱性。因醋酐合乙酰氧离子比醋酸和质子的酸性强，可增加碱性。2(CH3CO)2O(CH3CO)3O++CH3COO-2［B]HCl+Hg(Ac)22[B]HAc+HgCl2[B]HAc+HClO4[B]HClO4+HAc五、含量测定盐酸利多卡因非水溶液滴定法反应过程如下：当前第44页\共有92页\编于星期六\14点

1.对乙酰基酚原料的含量测定在0.4%NaOH介质中；257nm

D%＝［E1%1cm]样／［E1%1cm]标×100％；E1%1cm＝715含量应为98.0%～102.0%

2.对乙酰基酚片溶出度测定（测定条件同上）1片＋稀HCl24ml+H2O1000ml精密量取5ml+0.4%NaOH10ml+H2O100mlλ257nm测定A。

W×1／1000×5／100×100＝C（g/100ml)

W(g)=200×C;C=A/715∴溶出度＝W／标示量×100％＞80％为合格（三）分光光度法五、含量测定当前第45页\共有92页\编于星期六\14点此法主要用于盐酸普鲁卡因注射液的测定。因该注射液中常含有降解产物对氨基苯甲酸；可以苯甲酸为内标同时测定两者的含量，该法简单准确。

色谱条件：色谱柱为μBondapakC18300mm×4mm

流动相为甲醇－1％HAc(40:60);UV检测器250nm.

（四）HPLC法五、含量测定当前第46页\共有92页\编于星期六\14点98：133．盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有（）A.重氮化—偶合反应B.羟肟酸铁盐反应C.氧化反应D.磺化反应E.碘化反应相关练习题当前第47页\共有92页\编于星期六\14点97：137．采用亚硝酸钠法测定含量的药物有（）A.苯巴比妥B.盐酸丁卡因C.苯佐卡因D.醋氨苯砜E.盐酸去氧肾上腺素

相关练习题当前第48页\共有92页\编于星期六\14点95：85．下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者（）A.乙酰水杨酸B.对氨基水杨酸钠C.对乙酰氨基酚D.普鲁卡因E.苯佐卡因

相关练习题当前第49页\共有92页\编于星期六\14点96：81（99：72）.亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是（）A.添加BrB.生成NO+·Br

，加快反应速度C．生成HBrD.生成Br2E.抑制反应进行

相关练习题当前第50页\共有92页\编于星期六\14点95：75．中国药典所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为（）A.电位法B.永停法C.外指示剂法D.内指示剂法E.自身指示剂法

相关练习题当前第51页\共有92页\编于星期六\14点96：127．亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（）A.自身指示剂法B.内指示剂法C.永停法D.外指示剂法E.电位法

相关练习题当前第52页\共有92页\编于星期六\14点例1.ChP（2000）亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为（）A.自身指示终点法B.电位法指示终点C.永停滴定法D.氧化还原指示剂法E.酸碱指示剂法

相关练习题当前第53页\共有92页\编于星期六\14点例2.以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸（）A.盐酸普鲁卡因B.盐酸普鲁卡因胺C.注射用盐酸普鲁卡因D.盐酸普鲁卡因胺片E.盐酸普鲁卡因注射液

相关练习题当前第54页\共有92页\编于星期六\14点例3.盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是（）A.强酸B.加入适量溴化钾C.室温（10～30℃）下滴定D.滴定管尖端深入液面E.永停法指示终点

相关练习题当前第55页\共有92页\编于星期六\14点第二节苯乙胺类药物的分析一、苯乙胺类药物的基本结构与主要化学性质（一）基本结构与典型药物*R1为苯环类取代基.HX当前第56页\共有92页\编于星期六\14点常见的苯乙胺类药物第二节苯乙胺类药物的分析当前第57页\共有92页\编于星期六\14点常见的苯乙胺类药物当前第58页\共有92页\编于星期六\14点常见的苯乙胺类药物当前第59页\共有92页\编于星期六\14点常见的苯乙胺类药物当前第60页\共有92页\编于星期六\14点常见的苯乙胺类药物盐酸克仑特罗当前第61页\共有92页\编于星期六\14点常见的苯乙胺类药物硫酸沙丁胺醇当前第62页\共有92页\编于星期六\14点

（二）主要化学性质

1.弱碱性本类药物结构中有烃氨基侧链，为仲胺氮显弱碱性。

2.酚羟基特性本类药物结构中有酚羟基，可与

FeCl3反应;易发生氧化反应变色。

3.光学活性多数药物结构中有手性碳原子，具有旋光性。一、苯乙胺类药物的基本结构与主要化学性质4.溶解性

游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。当前第63页\共有92页\编于星期六\14点二、鉴别试验(一)与三氯化铁反应Ar-OH＋FeCl3络合显色＋碱液紫红色

(二）甲醛－硫酸反应书上表7-2

在此试剂中形成醌式结构而显色。

药物

三氯化铁

甲醛－硫酸

肾上腺素0.1mol/LHCl显绿色,甲氨试液显红－紫红红色

重酒石酸去甲肾上腺素绿色,加NaCO3试液显紫色－红色淡红色

盐酸去氧肾上腺素紫色玫瑰红橙红棕红

盐酸异丙肾上腺素深绿色,加5％NaCO3试液显蓝紫色－红色棕色暗紫色当前第64页\共有92页\编于星期六\14点(三）氧化反应

本类药物具有Ar-OH，易被氧化剂I2,H2O2,K3Fe(CN)6氧化而显色，例如：肾上腺素在中性或酸性条件下，被I2,H2O2

氧化后，生成肾上腺素红；

盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被I2氧化，生成异丙肾上腺素红。二、鉴别试验当前第65页\共有92页\编于星期六\14点(四）紫外特征吸收与红外吸收光谱例如：

盐酸异丙肾上腺素0.05mg/mlλmax=280nmA=0.50这一类药物均可采用红外吸收光谱进行鉴别二、鉴别试验(五）与亚硝基铁氰化钠(Rimini试验）是鉴别脂肪伯氨基的特殊反应；可用于重酒石酸间羟胺鉴别。D＋亚硝基铁氰化钠＋丙酮＋NaHCO3红紫色当前第66页\共有92页\编于星期六\14点(六)双缩脲反应

是鉴别芳环氨基醇的特殊反应；可用于盐酸麻黄碱，盐酸伪麻黄碱以及盐酸去氧肾上腺素的鉴别：D＋CuSO4+NaOH显蓝紫色＋乙醚，醚层(紫红色)，水层(蓝色)二、鉴别试验当前第67页\共有92页\编于星期六\14点

(一)酮体检查

本类药物在生产过程中多采用酮体氢化还原制得，若氢化不完全，易引入酮体杂质。

采用UV法检查：

利用酮体在310nm有最大吸收，而药物本身无吸收。例如：肾上腺素本项检查：配2.0mg/mlλ=310nmA＜0.05

盐酸去氧肾上腺素：配2.0mg/mlλ=310nmA＜0.20盐酸异丙肾上腺素：配2.0mg/mlλ=310nmA＜0.15

三、特殊杂质检查当前第68页\共有92页\编于星期六\14点(二)有关物质的检查盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇、盐酸苯乙双胍、盐酸氨溴索等药物，采用TLC法中的高低浓度对比法进行检查。

(三)盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查三、特殊杂质检查采用PC法中的杂质对照法进行检查。首先纸色谱法（PC）分离后，洗脱，照分光光度法于232nm波长处测定吸收度，不得超过0.48。控制吸收度以控制有关双胍的量当前第69页\共有92页\编于星期六\14点

(一)非水溶液滴定法（具体见书表7-5，P179）

本类药物的原料药多采用此法。本法重点将在第八章讨论。

1.重酒石酸去甲肾上腺素的测定

相当于［B］的有机酸盐可直接滴定。

2.盐酸克仑特罗的测定

相当于［B］的HX酸盐不能直接滴定，需加Hg(Ac)2处理后滴定。

3.硫酸沙丁醇的测定

相当于［B］的H2SO4盐可直接滴定,也可处理后滴定。四、含量测定当前第70页\共有92页\编于星期六\14点(二)溴量法本类药物重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素原料药及其注射液用此法。基本原理：四、含量测定3当前第71页\共有92页\编于星期六\14点

(三)提取酸碱滴定法硫酸苯丙胺的含量测定：［B］H2SO4+NaOH+NaCl乙醚提取［B］+H2SO4蒸去乙醚终点NaOH标准液滴定四、含量测定当前第72页\共有92页\编于星期六\14点(四)比色法

利用药物分子结构中的Ar-OH与Fe3＋络合显色，进行比色测定；也可利用药物分子结构中的Ar-NH2重氮化偶合显色，进行比色。四、含量测定当前第73页\共有92页\编于星期六\14点例如：盐酸克伦特罗栓的含量测定上述偶合剂可与HNO2显色，干扰比色测定，可先加氨基磺酸铵分解过量的HNO2。HNO2

＋2H2NSO3NH42N2+(NH4)2SO4+H2SO4+H2O具芳伯氨基，可发生重氮化—偶合反应四、含量测定当前第74页\共有92页\编于星期六\14点(五)紫外分光光度法肾上腺素测定：λex410nm、λem520nm处测定荧光强度，对照法定量。肾上腺素+I2

肾上腺红一定条件下N-甲基-3,5,6-三羟基吲哚四、含量测定当前第75页\共有92页\编于星期六\14点(六)HPLC法例一、重酒石酸去甲肾上腺素注射液的测定

离子对反相高效液相色谱法，内标法定量。调节溶液pH为3.8，加入离子对试剂十二烷基磺酸钠

例二、血浆中儿茶酚胺类（肾上腺素类）药物的测定

采用离子对反相高效液相色谱法，电化学检测器（EChD）法；用标准曲线法进行定量测定。四、含量测定当前第76页\共有92页\编于星期六\14点第三节苯丙胺类药物的分析一、药物结构与主要理化学性质321.（一）基本结构与典型药物作用于肾素-血管紧张素系统，转化酶抑制剂当前第77页\共有92页\编于星期六\14点典型药物（一）基本结构与典型药物盐酸贝那普利马来酸依那普利当前第78页\共有92页\编于星期六\14点（一）基本结构与典型药物雷米普利当前第79页\共有92页\编于星期六\14点（一）基本结构与典型药物西拉普利当前第80页\共有92页\编于星期六\14点（一）基本结构与典型药物赖诺普利当前第81页\共有92页\编于星期六\14点（一）基本结构与典型药物盐酸喹那普利当前第82页\共有92页\编于星期六\14点（二）主要理化性质酸碱性

本类药物中含有一个或者两个羧基，显中等酸性，可用于水溶液体系或醇-水溶液体系的酸碱滴定法测定含量。另外由于分子中含有烃氨基侧链，为仲胺氮，故显一定的弱碱性，能用非水滴定测含量。脯氨酸衍生物

本类药物大部分可看成脯氨酸衍生物。故具体氨基酸的特性。光学活性

本类药物分子结构中具有手性碳原子，都是纯对映体，具有旋光性。脯氨酸衍生物

本类药物大部分可看成脯氨酸衍生物。故具体氨基酸的特性。光学活性

本类药物分子结构中具有手性碳原子，都是纯对映体，具有旋光性。水解特性

本类药物大多数是前体药物，能被酶水解生成活性代谢产物。其他的理化性质：熔点、溶解性、紫外吸收等等。。。。当前第83页\共有92页\编于星期六\14点二、鉴别试验（一）物理与化学鉴别反应熔点测定BP（2005）规定马来酸依那普利的熔点为143~145度。

USP规定雷米普利的熔距为105~112度，作为定性鉴别。2.高锰酸钾反应Ch.P（2005）规定用高锰酸钾氧化反应作为马来酸依那普利及其片剂、胶囊等的定性鉴别方法。溴-间苯二酚反应

BP（2005）采用溴-间苯二酚显色反应来鉴别马来酸依那普利。溶液会显棕红色。4