高中-高考生物重点难点复习-教材基础实验-观察类实验和鉴定提取类实验课件

考点32观察类实验和鉴定提取类实验专题12教材基础实验静悟与梳理栏目索引排查与特训静悟与梳理依纲静悟1.观察类实验操作流程模板2.鉴定类实验的操作流程模板1.观察类实验核心梳理实验名称细胞的状态观察对象染色剂生物材料(及特殊要求)观察DNA和RNA在细胞中的分布死细胞DNA和RNA的分布吡罗红甲基绿染色剂人的口腔上皮细胞DNA、RNA同时存在时染色剂要混合使用且现配现用观察线粒体活细胞线粒体健那绿用生理盐水配制健那绿染液，用显微镜观察观察细胞的减数分裂死细胞染色体无(为固定装片)蝗虫精母细胞低温诱导染色体加倍死细胞改良苯酚品红染液洋葱根尖分生区细胞染色前需漂洗干净观察细胞的有丝分裂死细胞龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)用显微镜观察多种多样的细胞活或死细胞细胞无(无需染色)酵母菌细胞、水绵细胞、叶的保卫细胞、鱼的红细胞等观察叶绿体活细胞叶绿体藓类的叶(或菠菜叶、黑藻叶)观察植物细胞的质壁分离与复原活细胞紫色中央液泡的大小和原生质层的位置紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞2.鉴定提取类实验实验名称试剂颜色生物材料备注淀粉的鉴定碘液蓝色脱色的叶片等若材料有颜色，需先脱色还原糖的鉴定斐林试剂砖红色沉淀苹果或梨匀浆等现配现用、水浴加热脂肪的鉴定苏丹Ⅲ(或Ⅳ)染液橘黄(或红)色花生种子切片需用高倍镜观察蛋白质的鉴定双缩脲试剂紫色豆浆、稀蛋清等先加A液，后加B液，摇匀使用绿叶中色素的提取和分离提取液：无水乙醇；分离液：层析液①胡萝卜素：橙黄色；②叶黄素：黄色；③叶绿素a：蓝绿色；④叶绿素b：黄绿色新鲜的绿叶(如菠菜叶)加入二氧化硅是为了研磨得更充分；碳酸钙可防止在研磨中色素被破坏DNA的粗提取和鉴定二苯胺试剂蓝色鸡血细胞等沸水浴加热5min3.关注洋葱在实验中的“一材多用”取材部位实验名称取材原因叶鳞片叶植物细胞的质壁分离和复原外表皮细胞含紫色大液泡使用高倍显微镜观察细胞的多样性细胞较大，外表皮细胞有大液泡，内表皮细胞有明显的细胞核观察DNA和RNA在细胞中的分布内表皮细胞近于无色管状叶叶绿体中色素的提取和分离

根观察根尖分生组织细胞的有丝分裂材料易得，且分生区细胞分裂能力强，染色体数目少，易于观察低温诱导植物染色体数目的变化材料易得，且低温(4℃)下根尖也能分裂生长，诱导染色体变异率较高4.辨析有关颜色反应类实验的五种颜色颜色原理红①还原糖＋斐林试剂

砖红色沉淀②脂肪＋苏丹Ⅳ染液→红色③RNA＋吡罗红溶液→红色④染色体(质)＋醋酸洋红液→红色⑤叶绿素a和叶绿素b→主要吸收红光和蓝紫光黄①脂肪＋苏丹Ⅲ染液→橘黄色②叶绿体中色素分离的滤纸条中：胡萝卜素→橙黄色，叶黄素→黄色绿①DNA＋甲基绿染液→绿色②线粒体＋健那绿染液→蓝绿色③酒精＋橙色的重铬酸钾溶液

灰绿色④叶绿体中色素分离的滤纸条中：叶绿素b→黄绿色，叶绿素a→蓝绿色蓝①淀粉＋碘液→蓝色②DNA＋二苯胺试剂

蓝色紫①染色体(质)＋龙胆紫溶液→紫色②蛋白质＋双缩脲试剂→紫色③胡萝卜素和叶黄素→主要吸收蓝紫光5.常用试剂的种类及作用试剂体积分数或质量浓度作用原理相关实验酒精50%洗去浮色(溶剂)脂肪的鉴定70%消毒微生物的培养95%解离观察细胞的有丝分裂；低温诱导染色体加倍100%溶解、提取色素叶绿体色素的提取和分离盐酸5%营造酸性环境探究pH对酶活性的影响8%改变细胞膜通透性，使染色质中DNA与蛋白质分离观察DNA、RNA在细胞中的分布15%解离观察细胞的有丝分裂；低温诱导染色体加倍NaOH0.1g/mL斐林试剂、双缩脲试剂的成分检测还原糖、蛋白质5%营造碱性环境探究pH对酶活性的影响0.1%遇酚酞呈紫红色探究细胞表面积与体积的关系CuSO40.05g/mL斐林试剂的成分检测还原糖0.01g/mL双缩脲试剂的成分检测蛋白质6.常见疑难辨析(1)在观察类实验中低倍镜和高倍镜的使用情况如何？除观察类实验外，还有什么实验中也用到了显微镜呢？提示观察类实验中除了“观察植物细胞的质壁分离和复原”使用低倍镜即可外，其余均需要使用高倍显微镜；还有“脂肪的切片法鉴定”“探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化”也用到了显微镜。(2)“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中能否选用哺乳动物的成熟红细胞？为什么？提示不能。因为哺乳动物的成熟红细胞中无细胞核和细胞器，几乎不含有DNA和RNA。(3)能否用观察叶绿体的材料来观察线粒体？为什么？提示不能。因为叶绿体中的色素的颜色会掩盖线粒体被健那绿染色后的颜色变化。(4)在“观察细胞的有丝分裂”实验中为什么应注意观察呈正方形的根尖分生区细胞？提示呈正方形的根尖分生区细胞分裂旺盛，而呈长方形的细胞可能是伸长区或成熟区的细胞，没有分裂能力。(5)在观察减数分裂实验中为什么不宜选择动物的卵巢和植物的雌蕊？提示因为雄配子的产生数量远远多于雌配子，更易观察到减数分裂。(6)选用菠菜叶观察叶绿体时，为什么要取稍带些叶肉细胞的下表皮？提示因为靠近下表皮的叶肉细胞中的叶绿体较大而数目较少。(7)为什么应选取成熟的植物细胞观察质壁分离与复原实验？提示因其含有中央大液泡，易于发生质壁分离与复原的实验现象。(8)斐林试剂能否用于蛋白质的鉴定？为什么？提示不能，因为用于蛋白质鉴定的双缩脲试剂B液是0.01g/mL的CuSO4溶液，两种试剂的本质不同。斐林试剂的本质是新制的Cu(OH)2，故应将甲液和乙液等量混匀后使用，而双缩脲试剂的本质是碱性条件下的Cu2＋，故应先加A液1mL造成碱性环境，再加B液4滴摇匀使用。(9)脂肪的鉴定是否一定要借助显微镜？提示不一定，因为脂肪的鉴定有两个方案，可磨碎后在试管内鉴定，肉眼观察即可，也可做切片借助显微镜观察。(10)绿叶中色素的提取和分离有何区别？提示前者用无水乙醇提取法，原理是色素能够溶于有机溶剂无水乙醇中；而后者用纸层析法，原理是色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的色素随层析液在滤纸条上扩散得快，反之扩散得慢。排查与特训题组一观察类实验1.(1)(2014·新课标Ⅰ，4)下列关于植物细胞质壁分离实验的叙述，错误的是A.与白色花瓣相比，采用红色花瓣有利于实验现象的观察B.用黑藻叶片进行实验时，叶绿体的存在会干扰实验现象的观察C.用紫色洋葱鳞片叶外表皮不同部位观察到的质壁分离程度可能不同D.紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞的液泡中有色素，有利于实验现象的观察√解析答案1234解析

红色花瓣是因为液泡内花青素的颜色呈红色，所以用红色花瓣作为实验材料有利于实验现象的观察，A项正确；黑藻叶片中的叶绿体显绿色，液泡中细胞液的颜色接近无色，两者之间有颜色差异，因此叶绿体的存在不会干扰实验现象的观察，B项错误；紫色洋葱鳞片叶外表皮不同部位的细胞细胞液浓度可能不同，观察到的质壁分离程度可能不同，C项正确；通常做植物细胞质壁分离实验时用紫色洋葱的鳞片叶外表皮细胞，因为外表皮细胞的液泡中有较多色素，发生质壁分离时容易观察，D项正确。

12341234(2)(2014·新课标Ⅰ，29节选)在观察大蒜根尖细胞有丝分裂的实验中，常用盐酸酒精混合液处理根尖，用龙胆紫溶液染色，实验中，盐酸酒精混合液的作用是_________________________，龙胆紫溶液属于____性染料，能够使细胞中的_______着色。答案杀死细胞，并使细胞分散开碱染色体1234(3)(2010·新课标全国，3)若要在普通显微镜下观察到质壁分离、RNA和脂肪，下列四组材料中应选择的一组是A.水稻胚乳和花生子叶B.天竺葵叶和水稻胚乳C.紫色洋葱和花生子叶D.天竺葵叶和紫色洋葱解析

在普通光学显微镜下观察细胞质壁分离所选择的材料应为成熟的植物组织细胞；观察RNA和脂肪时均需对材料进行染色处理，取材时应选用白色或近于白色的组织，以免造成对实验观察效果的干扰，而且花生子叶中脂肪的含量较多，所以C选项正确。√解析答案真题重组判断下列有关观察类实验的叙述：(1)人的口腔上皮细胞经处理后被甲基绿染色，其细胞核呈绿色(2014·重庆，1A)(

)(2)使用显微镜观察装片，在10倍物镜下观察到的图像清晰、柔和，若直接转换至40倍物镜观察时，除调节细调节器外，还需要调用凹面镜(或调高亮度)、放大光圈(2013·上海，13改编)(

)(3)若比较有丝分裂细胞周期不同时期的时间长短，可通过“观察多个装片、多个视野的细胞并统计”以减少实验误差(2013·福建，4D改编)(

)(4)在光镜的高倍镜下观察新鲜菠菜叶装片，可见叶绿体的结构(2014·重庆，1D)(

)1234答案√√√×1234(5)制作细胞的有丝分裂装片时，洋葱根尖解离后直接用龙胆紫溶液染色(2014·山东，4B)(

)(6)用改良苯酚品红染色观察低温诱导的植物染色体数目变化(2014·四川，4A)(

)(7)用显微镜观察洋葱根尖装片时，需保持细胞活性以便观察有丝分裂过程(2015·山东，3C)(

)(8)用光学显微镜可观察到月季成熟的紫红色叶表皮细胞染色体的形态和数目(2017·天津，5D改编)(

)答案×√××2.(2017·南充二模)在生物学实验中，材料的选择及临时装片制作对于实验能否成功都是非常关键的，下列有关说法均正确的一组是解析答案1234序号实验课题生物材料装片制作过程A观察DNA和RNA在细胞中的分布人口腔上皮细胞制片→水解→用蒸馏水冲洗→染色B用显微镜观察叶绿体蔬菜叶上表皮细胞滴清水→加标本→盖盖玻片C观察植物细胞有丝分裂洋葱根尖2～3cm解离→漂洗→染色→压片D探究培养液中酵母菌种群数量的变化酵母菌滴稀释后的培养液于计数室→盖盖玻片√解析

用人口腔上皮细胞观察DNA和RNA在细胞中的分布，装片制作过程为：制片→水解→用蒸馏水冲洗→染色，A正确；蔬菜叶上表皮细胞通常不含叶绿体，B错误；观察植物细胞有丝分裂，应该取洋葱根尖2～3mm，装片制作过程为：解离→漂洗→染色→制片→观察，C错误；探究培养液中酵母菌种群数量的变化，装片制作过程为：先盖盖玻片，再滴稀释后的培养液于计数室，D错误。12341234思维延伸判断下列叙述的正误：(1)利用低倍镜可确认细胞染色体组数是否变化(

)(2)健那绿染液处理的口腔上皮细胞中的线粒体已失去活性(

)(3)在“质壁分离与复原”的实验中，第二次与第三次观察间隔时间的长短对实验现象的影响相同(

)(4)在“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”实验中，解离时间的长短对实验现象的影响相同(

)答案√×××1234(5)在紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞的失水和吸水实验中，显微镜下可依次观察到甲、乙、丙三种细胞状态。则由乙转变为丙的过程中，没有水分子从胞内扩散到胞外(

)答案(6)低温诱导染色体数目加倍实验中，须将大蒜根尖制成装片后再进行低温处理(

)××题组二鉴定提取类实验3.(2017·全国Ⅰ，2)下列关于细胞结构与成分的叙述，错误的是A.细胞膜的完整性可用台盼蓝染色法进行检测B.检测氨基酸的含量可用双缩脲试剂进行显色C.若要观察处于细胞分裂中期的染色体可用醋酸洋红液染色D.斐林试剂是含有Cu2＋的碱性溶液，可被葡萄糖还原成砖红色解析答案√1234解析

台盼蓝用于鉴定细胞的死活，被染色的细胞是死细胞，因为死细胞的细胞膜失去了对台盼蓝的选择透过性，如果细胞膜结构不完整，台盼蓝也能进入细胞进行染色，故也能判断细胞膜结构的完整性，A正确；双缩脲试剂是用来检测蛋白质中肽键的，不能检测氨基酸的含量，B错误；

若要观察处于细胞分裂中期的染色体，可以用碱性染料醋酸洋红、龙胆紫、改良苯酚品红等试剂染色，C正确；斐林试剂是由0.1g/mL的NaOH与0.05g/mL的CuSO4等量混合配制而成的，其中的Cu2＋可与还原糖在水浴加热的条件下，发生氧化还原反应，生成砖红色沉淀，D正确。

12341234真题重组判断下列有关鉴定提取类实验的叙述：(1)鉴定待测样液中的蛋白质时，先加NaOH溶液，振荡后再加CuSO4溶液(2014·山东，4A)(

)(2)还原糖的鉴定实验中隔水加热时，试管中液体的液面应低于烧杯中水的液面(2014·江苏，22B)(

)(3)还原糖的鉴定实验结束时将剩余的斐林试剂装入棕色瓶，以便长期保存备用(2014·江苏，22D)(

)(4)在叶绿体色素提取实验中，在95%乙醇中加入无水Na2CO3后可提高色素的溶解度(2013·重庆，3D)(

)答案√√×√1234(5)叶绿体色素滤液细线浸入层析液，可导致滤纸条上色素带重叠(2015·山东，3A)(

)(6)“利用双缩脲试剂检测生物组织中的蛋白质和利用