高中生物课件多聚酶链式反应扩增片段

高中生物课件多聚酶链式反应扩增片段第一页，共四十七页，编辑于2023年，星期二㈠.DNA分子的结构C、H、O、N、P1.元素组成：脱氧核苷酸2.基本单位:知识回顾脱氧核苷酸脱氧核苷磷酸脱氧核糖含氮碱基嘌呤嘧啶腺嘌呤（A）鸟嘌呤（G）胞嘧啶（C）胸腺嘧啶（T）第二页，共四十七页，编辑于2023年，星期二一个核苷酸上的磷酸基团上的“－OH”和另一个核苷酸分子的第3位碳原子上的羟基之间失去一分子水，形成磷酸二酯键，即在相邻的两个脱氧核苷酸的3’和5’碳原子之间形成磷酸二酯键。数量庞大的四种脱氧核苷酸通过3’、5’、磷酸二酯键彼此连接起来形成脱氧核苷酸链。通常将DNA的羟基“－OH”末端称为3’端，而磷酸基团的末端称为5’端3.多脱氧核苷酸链的形成多脱氧核苷酸链结构简图第三页，共四十七页，编辑于2023年，星期二OOPOHO碱基OOHOOPOHOOH碱基5’3’3’5’碱基脱氧核糖磷酸基团碱基脱氧核糖碱基脱氧核糖5’3’多脱氧核苷酸链结构简图第四页，共四十七页，编辑于2023年，星期二连接ATGC第五页，共四十七页，编辑于2023年，星期二连接ATGCATGC5'端含磷酸基团3'端（含羟基）第六页，共四十七页，编辑于2023年，星期二连接ATGCATGC5'端含磷酸基团3'端（含羟基）3'端5'端第七页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第八页，共四十七页，编辑于2023年，星期二3.DNA分子的双螺旋结构⑴DNA分子是由

的脱氧核苷酸长链盘旋而成的规则

结构。⑵

与

交替连结，排列在外侧，构成基本骨架；

排列在链的内侧。⑶两条链上的碱基通过

连结起来，形成碱基对。碱基对的组成有特定的规律：即腺嘌呤一定与

配对，

一定同胞嘧啶配对。双螺旋两条反向平行脱氧核糖磷酸碱基氢键胸腺嘧啶鸟嘌呤第九页，共四十七页，编辑于2023年，星期二㈡.DNA的复制2.时期有丝分裂间期减数第一次分裂前的间期。3.场所细胞核（主要）、线粒体、叶绿体。1.概念由一个DNA形成两个完全相同的DNA的过程。4.基本条件酶:解旋酶、DNA聚合酶能量:ATP原料:四种脱氧核苷酸模板:DNA的两条链第十页，共四十七页，编辑于2023年，星期二⑴.边解旋边复制(过程）5.复制特点⑵.半保留复制（结果）6.遵循原则：碱基互补配对原则7.精确复制的原因8.复制的意义DNA分子通过复制使遗传信息从亲代传给了后代，从而保持了遗传信息的连续性⑴规则的双螺旋结构为复制提供了精确的模板⑵碱基互补配对能力保证了复制准确无误的进行第十一页，共四十七页，编辑于2023年，星期二参与的组分在DNA复制中的作用解旋酶DNA母链4种脱氧核苷酸DNA聚合酶引物总结：胞内DNA复制的基本体系打开DNA双链提供DNA复制的模板合成子链的原料催化合成DNA子链使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸第十二页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第十三页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第十四页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第十五页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第十六页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第十七页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第十八页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第十九页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第二十页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第二十一页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第二十二页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第二十三页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第二十四页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第二十五页，共四十七页，编辑于2023年，星期二1.DNA

分子的热变性原理DNA双链单链变性（加热80-100℃）复性（缓慢冷却）变性的目的：复性的目的：解开双链有利于引物与两条单链结合

在80~100℃的温度范围内，DNA的双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称为变性总结第二十六页，共四十七页，编辑于2023年，星期二PCR技术总结利用DNA分子的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解旋与结合，从而完成体外DNA分子的扩增。

四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶、引物、DNA模板、缓冲溶液和控制温度的温控设备。子链的5’端向3’端延伸

具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出。原理条件方向特点第二十七页，共四十七页，编辑于2023年，星期二5/3/3/5/5/3/引物Ⅰ5/3/引物Ⅱ变性95oC复性55oC5/3/3/5/第二十八页，共四十七页，编辑于2023年，星期二5引物15引物2第二次复制第一次复制55

55

5

5模板DNA55

555

5

55经n次循环（复制）后，DNA的含量理论上可以扩大到

倍。2n延伸72oC第二十九页，共四十七页，编辑于2023年，星期二每次循环分为：PCR的反应过程总结变性——复性——延伸②DNA聚合酶只能特异性地复制处于两个引物之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增。①从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，并且由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合，进行DNA的延伸PCR的反应结果第三十页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第三十一页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第三十二页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第三十三页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第三十四页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第三十五页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第三十六页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第三十七页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第三十八页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第三十九页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第四十页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第四十一页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第四十二页，共四十七页，编辑于2023年，星期二第四十三页，共四十七页，编辑于2023年，星期二4.下列属于PCR扩增区别于

DNA体内复制的是()①需要解旋酶②需要引物③常温常压下进行④以四种脱氧核苷酸为原料⑤需要耐高温的TaqDNA聚合酶⑥边解旋边复制⑦可以短时间得到大量拷贝⑧需要模板A．①②③④⑤⑥⑦⑧C．⑤⑦B．②③④⑤⑥⑦D．③④⑥⑧第四十四页，共四十七页，编辑于2023年，星期二

【名师点拨】：体内复制与PCR扩增既有区别又有联系，PCR体外扩增概念很明确，在体外，加热解旋，因此需要耐高温的TaqDNA聚合酶，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA。【答案】：C第四十五页，共四十七页，编辑于2023年，星期二【配对练习1】真核生物细胞质中也有DNA，例如叶绿体、线粒体等，关于细胞质DNA复制不正确的是()

A．需要解旋酶

B．需要DNA聚合酶

C．两条链同时复制只有一个起点

D．不是半保留复制

解析：真核生物细胞质中DNA复制需要解旋酶、DNA聚合酶、两条链同时复制只有一个起点，是半保留复制。

答案：D第四十六页，共四十七页，编辑于2023年，星期二【配对练习