兴安杜鹃组培育苗技术规程

PAGE3杜鹃组培育苗技术规程1范围本标准规定了XX杜鹃（RhododendrondauricumL.）组培育苗技术的外植体采集制作、培养条件、培养基配制、组织培养、炼苗移栽和生产档案。本标准适用于XX杜鹃组培育苗。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T2306—2013花卉种苗组培快繁技术规程3外植体采集制作3.1采集5月末至7月末的晴天，选择生长健壮的植株做采集母树，剪取当年生未木质化枝条水培备用，长度20cm～30cm为宜。3.2制作将枝条剪成带1个～2个腋芽的幼嫩茎段，长度2cm～3cm，去掉下端叶片，顶端叶片保留1/2。4培养条件4.1分化诱导及继代增殖培养培养室的温度控制在25℃±3℃，相对空气湿度控制在70%～80%，光照强度为27μmol•m-2•s-1～36μmol•m-2•s-1，光照时间为12h/d。4.2生根培养光照时间为14h/d，其他同4.1。5培养基配制5.1培养基选择5.1.1诱导分化培养基诱导分化培养基配方;1/4MS+GA3（1.0mg/L）+IBA（0.5mg/L）+蔗糖（30g/L）+X脂（7g/L），pH=5.4。MS培养基配方参见NY/T2306—2013中附录F.1。5.1.2继代增殖培养基继代增殖培养基配方：1/4MS+6-BA（1.0mg/L）+IBA（0.5mg/L）+蔗糖30g/L+X脂7.0g/L，pH=5.4。5.1.3生根培养基生根培养基配方：1/4MS+IBA（1.0mg/L）+GA3（0.5mg/L）+蔗糖30g/L+X脂7.0g/L，pH=5.4。5.2培养基制备将蒸馏水、基本培养基、蔗糖、X脂混合加热溶解，再加入生长调节剂（IBA、6-BA、GA3），调节pH值，分装入水洗干燥后的培养瓶中，封口。生长调节剂配制方法参见NY/T2306—2013中附录H。5.3培养基灭菌瓶装培养基应在10h内完成高压灭菌，压力0.105MPa、温度121℃、灭菌20min。5.4培养基保存灭菌后的培养基放入接种室，常温条件下7d内使用，2℃～4℃条件下15d内使用。培养基应保存于洁净环境中，避光和防尘。6组织培养6.1外植体消毒6.1.1清洗用去污粉洗涤外植体2min～3min，流水冲洗干净。6.1.2酒精处理用75%的酒精灭菌15s～30s，无菌水冲洗3次。6.1.3次氯酸钠处理用1%的次氯酸钠溶液浸泡经酒精处理的外植体，浸泡过程中不断轻摇培养瓶，浸泡10min～15min后倒出次氯酸钠溶液，再用无菌水冲洗3次～5次。6.2接种外植体经过消毒，放在无菌滤纸上吸干水分，去掉两端损害部分，放入培养瓶中，每个培养瓶放3个～4个外植体，盖上瓶盖儿，标注日期。6.3分化诱导培养将消毒好的茎段接种到5.1.1分化诱导培养基上，待分化成高1.5cm～3cm的不定芽时进行继代增殖培养。6.4继代增殖培养将不定芽接种到5.1.2继代增殖培养基上，待分化为3cm～5cm高的丛生芽时进行生根培养。6.5生根培养选取生长健壮的丛生芽，接种到5.1.3生根培养基上，待丛生芽基部长出3条～5条主根且有二级根出现时即可进行炼苗移栽。7炼苗移栽7.1炼苗将培养瓶放置在散色光的温室内，温度控制在25℃±3℃，封口培养3d。7.2移栽7.2.1基质准备将泥炭土+珍珠岩按1:1比例混合好装入育苗容器中，育苗容器宜选用高为8cm、口径为8cm的营养钵，用2‰的高锰酸钾溶液喷淋灭菌后备用。7.2.2洗苗取出已生二级根的组培苗放入清水中，清洗干净根部培养基。7.2.3移栽将洗净的组培苗移栽至已备好的营养钵中，保持根系舒展，幼苗直立，基质覆盖至组培苗基部，稍压实。7.3管理7.3.1温度苗期温度控制在18℃～28℃。宜用遮光度30%～50%的遮荫网控制小拱棚内温度，当温度过高时，可适时通风降温。7.3.2空气湿度采用薄膜小拱棚保持空气湿度在70%～80%，当第一片新叶完全展开时，可逐渐打开薄膜降低湿度；30d后完全打开薄膜，空气湿度保持在60%～70%。7.4露地栽植标准当