医学专题-国家药品审评中心

注射剂的无菌保证

与工艺(gōngyì)研究

国家(guójiā)食品药品监督管理局

药品审评中心黄晓龙

2008.10第一页，共三十八页。编辑ppt药品(yàopǐn)管理法与药品(yàopǐn)生产2001年2月28日修订的《药品管理法》第十条，经修订后明确要求：“药品必须按照(ànzhào)（原法规：工艺规程）国家药品标准和国务院药品监督管理部门批准的生产工艺进行生产，…。改变影响药品质量的生产工艺的，必须报原批准部门审核批准。”生产工艺的源头：药品研发中经工艺研究与验证获得的申报工艺第二页，共三十八页。编辑ppt目录一、注射剂的特点二、注射剂的无菌三、相关知识(zhīshi)简介四、注射剂的无菌保证工艺研究五、总结第三页，共三十八页。编辑ppt一、注射剂的特点(tèdiǎn)不通过人体固有的保护屏障，直接(zhíjiē)进入血液起效快、安全性要求高。无菌严格控制热原及杂质第四页，共三十八页。编辑ppt二、注射剂的无菌历史的教训：1970-1975年，美国因输液污染(wūrǎn)导致败血症400多起，但问题产品全部通过了无菌检查。2006年，安徽华源的“欣氟”事件：灭菌工艺与无菌检查第五页，共三十八页。编辑ppt方法本身是否经过充分验证——05版药典的新要求。检测结果有无代表性。抽检，样本数一般为20/批。样本数、污染率及通过无菌检查（取不到(bùdào)污染样）的概率遵循二项式定律（泊松分布）通过无菌检查(jiǎnchá)的概率P=(1-q)n式中：q为批产品污染率

n为样本数无菌检查(jiǎnchá)的局限性第六页，共三十八页。编辑ppt计算实例假设当某批药品的实际染菌率为5%时，如果根据(gēnjù)通常取样的数量为20支，则该批药品通过无菌检查的概率P=(1-q)n=（1-0.05）20=0.359

即有35.9%的可能性，该批药品将会被判定为无菌。

第七页，共三十八页。编辑ppt无菌检查(jiǎnchá)特性数据表编号污染率通过无菌检查的概率n=1n=2n=4n=10n=15n=20n=30001595908160463621090816635211231585725220944208064411141577.6422.36560.1%5%中国药典现取样(qǔyàng)数为：20，如污染率为5%，从曲线得，检出概率为64%。第八页，共三十八页。编辑ppt如何(rúhé)保证注射剂无菌合格呢？第九页，共三十八页。编辑ppt质量控制(kòngzhì)的三种模式检验控制质量（QualitybyTest）不够全面生产控制质量（QualitybyManufacture）将质控延伸(yánshēn)到生产环节设计控制质量（QualitybyDesign，QbD）

全方位的控制、发展的方向三者互为补充，后者包括前者

第十页，共三十八页。编辑ppt保证(bǎozhèng)注射剂无菌的措施研究阶段研究设计出符合无菌要求的产品（包括合适的剂型、灭菌工艺、包装材料）——前提与源头生产(shēngchǎn)阶段批产后应严格按照研究验证后的工艺进行生产第十一页，共三十八页。编辑ppt三、相关知识(zhīshi)简介D值（微生物的耐热参数(cānshù)）：在一定温度下，将微生物杀灭90%所需的时间，以分钟为单位。一般小于1分钟。F0值：产品在121℃下的标准灭菌时间。灭菌率L：某温度下灭菌1分钟所对应的F0值。第十二页，共三十八页。编辑pptZ=10℃时，不同(bùtónɡ)温度下的灭菌率和所相当的灭菌时间温度（℃）灭菌率L灭菌时间（分钟）1211.001.001200.7941.2591150.2513.9841100.07912.6001050.02540.0001000.008125.00第十三页，共三十八页。编辑ppt湿热灭菌法：将物品置于灭菌柜内利用高压(gāoyā)饱和蒸汽、过热水喷淋等手段使微生物菌体中的蛋白质、核酸发生变性而杀灭微生物的方法。湿热灭菌法通常分为过度杀灭法和残存概率法两种。第十四页，共三十八页。编辑ppt过度(guòdù)杀灭法F0不低于12适用于热稳定性好的产品以彻底杀灭任何(rènhé)污染的微生物为实现无菌的手段无菌保证值不小于6第十五页，共三十八页。编辑ppt残存(cáncún)概率法灭菌(mièjūn)过程8≤F0<12分钟适用于热稳定性不很好的产品通过控制工艺过程的微生物污染和灭菌工艺参数使产品无菌无菌保证值不小于6第十六页，共三十八页。编辑ppt其它湿热灭菌(mièjūn)工艺F0值低于8的灭菌工艺热稳定性很差的产品以无菌生产工艺为基础，灭菌是提高无菌保证(bǎozhèng)水平的辅助手段不计算F0值，污染概率不大于0.1%除血液制品外，发达国家的大容量注射剂很少采用此类工艺小容量注射剂也较少采用第十七页，共三十八页。编辑pptSAL

（无菌保证水平）：产品经灭菌后微生物残存概率的负对数。国际上规定，湿热(shīrè)灭菌法的SAL不得低于6。SAL＝F0/D121–lgN0N0：灭菌前的染菌量

SAL除了和F0有关，还与染菌量（N0）及所染菌的耐热参数（D121）有关。第十八页，共三十八页。编辑pptF0和SAL的关系：

F0=8N0=100SAL＝8/1–lg100

=6D121=1时注意：污染菌在不同的产品中的耐热性可能不同，故验证时应采用实际的药液。

eg:嗜热脂肪芽孢杆菌（常规D值在分钟）在复方(fùfāng)氨基酸注射液中的D值为0.8分钟左右，在30％的葡萄糖溶液中的D值为2.2分钟。第十九页，共三十八页。编辑ppt无菌保证水平应用(yìngyòng)实例1假定N0为100cfu/瓶，D值为1分钟，要达到(dádào)SAL不小于6，灭菌F0值应达到多少？相当于115℃下灭菌多少分钟？F0=（SAL＋lgN0）×D=（6+lg100）×1=8分钟。换算成115℃下的F0/L115=8/0.25=32分钟。残存概率法有效的基础：N0≤100，D≤1。第二十页，共三十八页。编辑ppt某输液(shūyè)采用110℃，30分钟的灭菌程序，起始污染微生物仍为100cfu/瓶，D值为0.5分钟，经计算此时的无菌保证值和残存微生物污染的概率为：SAL=F0/D-lgN0=L110×t/D-lg100=0.08×30/0.5-2=2.8残存微生物的概率为10-2.8＝0.158％通过无菌检查的概率为(1-0.158％)20=96.9%。无菌检查的结果不能保证产品的SAL符合要求（

≤6）。无菌保证水平应用(yìngyòng)实例2第二十一页，共三十八页。编辑ppt四、注射剂的无菌保证工艺(gōngyì)研究无菌保证理化指标灭菌(mièjūn)和化学指标的平衡点？第二十二页，共三十八页。编辑ppt工艺选择的考虑(kǎolǜ)要点无菌产品必须达到规定的无菌保证水平。不得以理化性质等硬指标来压无菌的软指标。可最终灭菌产品一定(yīdìng)要首选最终灭菌方式，以保证产品的无菌特性。无菌制造工艺的基本特征是：低安全+高成本。应尽可能避免采用。当灭菌可能会造成副产物等问题时，尽可能从工艺上创造条件，使灭菌成为可行。第二十三页，共三十八页。编辑ppt国食药监注[2008]7号通知(tōngzhī)

08年1月10日国家局发布了化学药品注射剂基本技术要求。国家局已受理但尚未批准注册的化学药品注射剂应参照《技术要求》进行研究。已经批准注册的化学药品注射剂也应参照《技术要求》进行相关研究（完善灭菌工艺等），并在申报(shēnbào)再注册时提供相关研究资料。第二十四页，共三十八页。编辑ppt剂型(jìxíng)选择的合理性要权衡考虑各剂型的无菌保证水平、杂质的控制水平、工艺的可行性、临床使用的方便等。首先要考虑被选剂型可采用(cǎiyòng)的灭菌工艺的无菌保证水平的高低。原则上首选剂型应能采用(cǎiyòng)终端灭菌工艺，并保证SAL不小于6。对于有充分的依据证明不适宜采用终端灭菌工艺且临床必需注射给药的品种，可考虑选择采用无菌生产工艺的剂型。通常无菌生产工艺仅限于粉针剂或部分小容量注射剂。

第二十五页，共三十八页。编辑ppt输液产品灭菌(mièjūn)工艺的选择原则

应采取终端灭菌工艺，建议首选过度杀灭法（F0≥12）。例如：氯化钠大输液。如产品不能耐受，可采用残存概率法(8≤F0<12)，但均应保证产品灭菌后的SAL不小于6。采用其它F0值小于8的终端灭菌条件的工艺，原则上不予认可。如产品不能耐受终端灭菌工艺条件，应尽量优化处方工艺，以改善(gǎishàn)制剂的耐热性。如确实无法耐受，则应考虑选择其他剂型，而非大容量注射剂。

第二十六页，共三十八页。编辑ppt工艺(gōngyì)验证要求主要包括以下试验：灭菌前微生物污染水平测定，包括灭菌前产品中的污染菌及其耐热性；热穿透试验；微生物挑战试验：生物指示剂的耐热性及数量应对灭菌工艺构成(gòuchéng)必要的挑战。过度杀灭法（F0≥12）不要求此项验证

第二十七页，共三十八页。编辑ppt粉针剂的工艺(gōngyì)与验证粉针剂的无菌保证水平应能保证SAL不大于10-3。常规的工艺验证试验包括：培养基模拟灌装试验：至少在线灌装三批，每批的批量详见附表，每瓶产品(chǎnpǐn)均应进行无菌检查。除菌过滤系统适应性验证：包括过滤系统相容性测试、过滤前后滤膜完整性测试，必要时尚需进行滤膜的微生物截留量测试。

第二十八页，共三十八页。编辑ppt附表：培养基灌装试验的批量(pīliànɡ)与判断合格的标准批量（瓶）3000475063007760允许染菌的数量（瓶）0123第二十九页，共三十八页。编辑ppt小容量注射剂的工艺(gōngyì)与验证应首选终端灭菌工艺，相关技术(jìshù)要求同大容量注射剂。如有充分的依据证明不能采用终端灭菌工艺，且为临床必需注射给药的品种，可考虑采用无菌生产工艺，相关技术要求同冻干粉针剂。

第三十页，共三十八页。编辑ppt欧盟1999年8月正式开始执行灭菌方法选择的决策树决策树的作用是在考虑各种复杂因素的情况下，辅助(fǔzhù)选择最佳的灭菌方法欧盟灭菌(mièjūn)方法选择的决策树第三十一页，共三十八页。编辑ppt第三十二页，共三十八页。编辑ppt决策树越往下，风险越大需要提供(tígōng)的研究与验证的证据也越多第三十三页，共三十八页。编辑ppt工艺选择的基本原则:无菌产品应在灌装到最终容器后进行(jìnxíng)最终灭菌（首选）如因产品对热不稳定不能进行最终灭菌时，可采用最终灭菌方法的替代方法--过滤除菌和/或无菌生产工艺（退而求其次）第三十四页，共三十八页。编辑ppt四、研究(yánjiū)中的常见问题剂型选择不合理无菌保证工艺(gōngyì)选择不合理无菌保证工艺研究不够全面与细致验证不充分或未经验证第三十五页，共三十八页。编辑ppt五、总结(zǒngjié)无菌检查是有局限性的。质量源于设计(shèjì)、过程控制质量对于保证注射剂的无菌至关重要。第三十六页，共三十八页。编辑ppt谢谢不当之处欢迎(huā