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文档简介
有机化学实验从牛奶中分离酪蛋白实验目的1.了解等电点概念2.掌握通过调节pH值实现蛋白质分离的方法3.了解缩二脲反应鉴定蛋白质（多肽）实验背景酪蛋白等电点是一个分子或者表面不带电荷时的pH值pI=4.8实验原理1.酪蛋白是含磷蛋白质的复杂混合物，为两性化合物，溶液的酸碱性直接影响蛋白质分子所带的电荷。当调节牛奶的pH值达到酪蛋白的等电点（pI）4.8左右时，蛋白质所带正负电荷相等，呈电中性，此时酪蛋白的溶解度最小，以沉淀形式从牛奶中析出。通过离心的方法将酪蛋白和乳糖分离。盐
（溶解度高）溶解度低沉淀析出盐
（溶解度高）实验原理2.缩二脲反应原理：具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应,生成红紫色的络合物。蛋白质或多肽紫红色络合物实验药品去脂牛奶稀醋酸（1:9）溶液乙醇乙醚1%硫酸铜溶液0.4
M氢氧化钠生理盐水溶液实验药品M.w.m.p.b.p.d.乙醚乙醇74.12-116350.71346.07-114780.789实验内容1.
50
mL去脂牛奶
100mL烧杯
40oC稀醋酸（
1:9
）
2mL2.
冷却10
min，
3000r/min离心15
min3.
倾析取沉淀，
95%乙醇
20mL搅匀，布氏漏斗抽滤4.
10
mL乙醇：乙醚
=1:1洗涤两次，
5mL乙醚洗涤，抽滤5.
烘干，称重6.
去0.5
g产物于5mL
0.4MNaOH溶液，
颜色反应注意事项1.
牛奶在实验前不能放置很久，时间过长会使其中的乳糖变为乳酸影响分离。
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