抗肿瘤的生物技术药物

抗肿瘤的生物技术药物第一页，共五十四页，编辑于2023年，星期六2007年全球医药市场达到6750亿美元左右，增速为5-6%，其中生物制药市场收入为450亿美元，增速为13-14%。生物制药占医药产业8.8-10%，其中美国市场占62%，欧洲占25%，日本占7%。美国已产业化的基因工程药物200种，占药品总销售额的10%。我国生物技术药物研究和开发起步较晚，已有20多种基因工程药物和疫苗上市，正在进行临床试验的品种近100种。2005年我国医药生物技术产品总销售额达到350亿元。第二页，共五十四页，编辑于2023年，星期六至2008年底，FDA共批准99种生物技术药物上市2007年29/110种生物技术药物的销售额超过10亿美元2007年销售额超过40亿美元的药物有16种，基因工程药物占据7种：1.治疗非霍奇金淋巴瘤的anti-CD20抗体Rituxan2.治疗乳腺癌的anti-EGFRII抗体Herceptin3.治疗肿瘤放化疗后出现的白细胞减少的G-CSF4.治疗肺癌、乳腺癌和结直肠癌的anti-VEGF抗体Avastin5.治疗类风湿关节炎的anti-TNFα抗体Enbrel、Remicade单克隆抗体药物第三页，共五十四页，编辑于2023年，星期六TypeProductMarketerApprovedChimericRituxanNon-Hodgkin'slymphoma

Genentech

November1997

ChimericSimulectOrganrejectionprophylaxis

NovartisMay1998ChimericRemicadeRheumatoidarthritis,Crohn'sdiseaseohnson&JohnsonAugust1998CDR-graftedZenapax

OrganrejectionprophylaxisRocheDecember1997CDR-graftedSynagis

RespiratorysyncytialvirusMedimmuneJune1998CDR-graftedHerceptin

MetastaticbreastcancerGenentechSeptember1998CDR-graftedMylotarg

AcutemyeloidleukemiaAmericanHomeProductsMay2000MonoclonalAntibodiesontheMarket第四页，共五十四页，编辑于2023年，星期六TypeProductMarketerApprovedMurine

RadiolabeledZevalin

Non-Hodgkin'sLymphomaIDECPharmaceuticalsandScheringAGMarch2002PhageDisplayHumira

RheumatoidarthritisAbbottLaboratoriesDecember2002CDR-graftedXolair

ModeratetoseverepersistentasthmaGenentechandNovartisJune2003Murine

RadiolabeledBexxar

CD20positive,follicular,Non-Hodgkin'sLymphomaCorixaandGlaxoSmithKlineJune2003CDR-graftedRaptiva

Chronicmoderate-to-severepsoriasisGenentechandXomaOctober2003ChimericErbitux

ColorectalcancerImcloneandBristol-MyersSquibbFebruary2004CDR-grafted

Avastin（Bevacizumab）colonandrectumcancer

GenentechFebruary2004第五页，共五十四页，编辑于2023年，星期六1979-1980国内个别单位开始单抗的研制1984年以前基本是技术方法的建立和完善1985年以后单抗为基础的诊断试剂用于研究和临床

1987年以后单抗的体内诊断和治疗制剂被列入863计划1992年我国第一个单抗衍生物被SDA批准进入临床2005年第四军医大学研制的治疗肝癌新药——碘131

美妥昔单抗注射液，这是全球第一个专门用于治疗原发性肝癌的单抗导向同位素药物.

单克隆抗体技术在我国的发展.第六页，共五十四页，编辑于2023年，星期六由分化成熟的终末B细胞--浆细胞合成、分泌的一类能与相应抗原（antigen，Ag）特异性结合的具有免疫功能的糖蛋白。什么是抗体（Antibody，Ab）？Ag1234B抗体，Ab

一个

B细胞只能生产一种抗体，对付某一抗原決定基。第七页，共五十四页，编辑于2023年，星期六B1B2B3B4

多克隆抗体Ag2341B4B4B4

单克隆抗体第八页，共五十四页，编辑于2023年，星期六第九页，共五十四页，编辑于2023年，星期六在V区中，某些特定位置的氨基酸残基的组成和排列顺序高度可变，称为HVR，或互补决定区（CDR）。VL区和VH区各存在个3CDRFR1~4为骨架区，稳定HVR的结构。Fab段：抗原结合片段Fc段：可结晶段FabFc第十页，共五十四页，编辑于2023年，星期六第十一页，共五十四页，编辑于2023年，星期六抗体的发展过程单克隆抗体基因工程抗体多克隆抗血清抗体库第十二页，共五十四页，编辑于2023年，星期六传统抗血清抗原免疫所有抗体混合123412341234多克隆抗体第十三页，共五十四页，编辑于2023年，星期六单克隆抗体1975年建立了单克隆抗体技术（淋巴细胞杂交瘤技术）。1984年获得诺贝尔医学和生理学奖。第十四页，共五十四页，编辑于2023年，星期六B淋巴细胞注射特定抗原蛋白骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞融合第十五页，共五十四页，编辑于2023年，星期六B淋巴细胞骨髓瘤细胞杂交瘤BBB瘤瘤瘤HAT选择培养液（黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶）选择培养骨髓瘤细胞因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶而死亡第十六页，共五十四页，编辑于2023年，星期六检测到所需的X抗体分离单个细胞进行克隆化培养检测到所需的X抗体第十七页，共五十四页，编辑于2023年，星期六注入小鼠腹腔扩大培养体外培养大量单克隆抗体第十八页，共五十四页，编辑于2023年，星期六第十九页，共五十四页，编辑于2023年，星期六鼠单抗人单抗大鼠小鼠产量高、操作比小鼠麻烦少用易操作、多用HAMA反应人人杂交瘤人B细胞、骨髓瘤细胞融合人鼠杂交瘤人B细胞、鼠骨髓瘤细胞融合细胞杂交瘤技术第二十页，共五十四页，编辑于2023年，星期六单克隆抗体的不足：目前单克隆抗体均是鼠源性抗体，应用于人体内可产生人抗鼠抗体（humanantimouseantibody,HAMA)人体的排斥反应人体内半衰期只有5-6小时到达靶组织的药量仅有1％21第二十一页，共五十四页，编辑于2023年，星期六基因工程抗体鼠单抗100%鼠源鼠/人嵌合单抗(66-75%人源)人源化单抗(90-95%人源)100%人源为了降低免疫原性，降低相对分子量，增加穿透力，开发了新的基因工程抗体。恒定区人源化可变区人源化第二十二页，共五十四页，编辑于2023年，星期六Pr鼠VH人CHPr鼠VL人CL免疫球蛋白基因载体的构建H链嵌合载体L链嵌合载体共转染细胞启动子人-鼠嵌合抗体基因工程改造策略第二十三页，共五十四页，编辑于2023年，星期六鼠VH鼠VL人CL人CH抗体分泌细胞第二十四页，共五十四页，编辑于2023年，星期六CDR序列CDR序列鼠单克隆抗体人抗体人源化抗体CDR移植第二十五页，共五十四页，编辑于2023年，星期六小分子抗体第二十六页，共五十四页，编辑于2023年，星期六小分子抗体的优点：分子质量小，免疫原性低。易于进入实体瘤周围的微循环。无Fc片段，不易与具有Fc受体的非靶细胞结合，用于免疫诊断时成像清晰。构建较简单，易于操作和改造。可在细菌中表达，易于大量生产。小分子抗体的缺点：与抗原结合活性相对较弱。半衰期短。第二十七页，共五十四页，编辑于2023年，星期六抗体库抗体库技术：用基因克隆技术克隆全套抗体的重链和轻链的可变区基因，然后重组到特定的表达载体中，转化特定的宿主细胞表达有功能的抗体分子，并通过亲和筛选获得特异性抗体可变区基因的技术。利用抗体库技术筛选到的抗体可变区基因可被用于构建基因工程抗体。第二十八页，共五十四页，编辑于2023年，星期六噬菌体抗体库第二十九页，共五十四页，编辑于2023年，星期六抗体库的优点：越过了细胞融合的步骤，省时省力。扩大了筛选容量，易于获得高亲和力抗体。不需进行人工体内免疫。第三十页，共五十四页，编辑于2023年，星期六单克隆抗体药物：Trastuzumab商品名：赫赛汀英文名：Herceptin通用名：注射用曲妥珠单抗

(Trastuzumab)针对HER2的特异性单克隆抗体，用于治疗HER2过度表达的转移性乳腺癌

重组DNA衍生的人源化单克隆抗体可单药使用,不良反应轻，耐受性好,可在门诊治疗疗效显著，中位缓解时间长第三十一页，共五十四页，编辑于2023年，星期六HER2人类表皮生长因子受体-2

HumanEpidermalgrowthFactorReceptor-2

分子量185kDa的糖蛋白:细胞外区（配体结合区）跨膜区（传导信号）细胞内区（激酶活性）HER2细胞内细胞外细胞膜第三十二页，共五十四页，编辑于2023年，星期六Cellmembrane基因转录提高细胞运动抑制凋亡细胞生长和增殖转移化疗耐药肿瘤生长EGFEGFREGFRTGFTGFEGFRHER2HER2HER3NRGNRGHER2HER4HER2HER2信号级联放大核膜Intracellular第三十三页，共五十四页，编辑于2023年，星期六1=­

基因拷贝数2=­

mRNA

转录3=­

细胞表面受体蛋白表达4=­

细胞外受体功能域释放A=HER2DNAB=HER2信使RNAC=HER2受体蛋白细胞核细胞质细胞膜1234CBAHER2阳性：过度表达/扩增HER2正常表达细胞(HER2–)(~2万个受体）HER2过表达的细胞(HER2+)(100–200万个受体）第三十四页，共五十四页，编辑于2023年，星期六正常HER2表达HER2基因扩增导致HER2过表达HER2过表达导致肿瘤增殖促进细胞的生长和增殖------肿瘤发生抑制细胞的凋亡诱导血管新生提高细胞运动能力,增强肿瘤的浸润转移作用第三十五页，共五十四页，编辑于2023年，星期六HER2在癌症中过表达：30％以上的人类肿瘤中存在HER2基因的扩增/过度表达（如乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、输卵管癌、胃癌和前列腺癌等。20％－30％的原发性浸润性乳腺癌有HER2基因的扩增/过度表达。Herceptin即为一种针对HER2受体的人源化单克隆抗体，是乳腺癌治疗领域的第一个分子靶向性药物，具有高效、低毒、选择性强的特点。2010年，欧洲和美国先后批准化疗联合使用曲妥珠单抗治疗HER2阳性胃及胃食管交界癌患者。第三十六页，共五十四页，编辑于2023年，星期六刺激刺激HER2タンパクがん細胞増殖刺激刺激HER2タンパク癌细胞増殖抑制Heceptin作用Heceptin癌细胞表面存在着Her-2蛋白，受刺激后促进癌细胞的增殖20～30％的癌细胞。Heceptin与Her-2结合阻断和抑制细胞的增殖，用于

转移性乳腺癌病人的治疗。第三十七页，共五十四页，编辑于2023年，星期六HER2检测流程免疫组织化学原位杂交第三十八页，共五十四页，编辑于2023年，星期六440mg 冻干粉针剂20ml 无菌注射用水赫赛汀®用法用量所需溶液的体积=体重（Kg）剂量（4mg/Kg负荷量或2mg/Kg维持量）

21（mg/ml，配置好溶液的浓度）每周方案三周方案用法用量首剂

4mg/kg，90分钟内静脉滴注，观察2小时维持剂量

2mg/kg，每周一次，30分钟静脉滴注首剂

8mg/kg，90分钟内静脉滴注，观察2小时维持剂量

6mg/kg，每三周一次，30分钟静脉滴注疗程建议转移性乳腺癌至少6个月辅助治疗一年第三十九页，共五十四页，编辑于2023年，星期六

曲妥珠单抗辅助治疗可以选择的方案第四十页，共五十四页，编辑于2023年，星期六单克隆抗体药物：Rituximab商品名：美罗华英文名：Mabthera通用名：利妥昔单抗(Rituximab)针对CD20的特异性单克隆抗体，通过基因重组技术生产的一种嵌合鼠/人的单克隆抗体,用于治疗非霍奇淋巴瘤。第四十一页，共五十四页，编辑于2023年，星期六非霍奇淋巴瘤（non-hodgkin’s

lymphoma，NHL）瘤细胞成分单一，大多起源于B淋巴细胞，部分来自T淋巴细胞，只有少数来自组织细胞。故目前多倾向于根据细胞形态结合免疫功能分类：B细胞淋巴瘤（临床多见）T细胞淋巴瘤CD20抗原在从前B细胞到活化B细胞的各个阶段都表达,但在正常造血干细胞、分化成熟的浆细胞及其他类型造血细胞系却未见表达，且CD20在超过90%的B细胞性NHL中均有表达。因此CD20成为肿瘤治疗的一个较好的靶点。

第四十二页，共五十四页，编辑于2023年，星期六

Rituximab：通过ADCC，CDC促凋亡与化疗药物协同作用第四十三页，共五十四页，编辑于2023年，星期六淋巴瘤治疗单克隆抗体Rituxi-CD20CD20第四十四页，共五十四页，编辑于2023年，星期六Epratuzumab：人源性IgG1抗CD22单抗60%－80％的B-NHL细胞表达CD22滤泡性淋巴瘤、套细胞淋巴瘤和边缘区B细胞性淋巴瘤高表达CD22Anti-CD22与CD22结合后迅速内在化抗CD22单抗其他针对B,T细胞的单抗第四十五页，共五十四页，编辑于2023年，星期六

复发滤泡性淋巴瘤剂量组总有效率（CR＋PR）中位TTP360mg/m243％23.7月480mg/m227％弥漫大B细胞淋巴瘤240mg/m233％8.1月360mg/m215％480mg/m220％EpratuzumabI/II期临床试验结果第四十六页，共五十四页，编辑于2023年，星期六抗CD30单抗CD30在霍奇金淋巴瘤的RS细胞和间变大细胞淋巴瘤高度表达，是治疗淋巴瘤的理想靶点嵌合性CD30单抗SGN-30及人源化CD30单抗MDX-60治疗耐药性HD、ALCL和其他CD30+淋巴瘤的I/II期临床试验正在进行中第四十七页，共五十四页，编辑于2023年，星期六抗CD40抗体CD40在恶性T和B淋巴细胞中表达，CD40被认为与细胞的增殖及分化相关。SGN-40是一种人源化IgG1型抗CD40抗体，临床前研究表明其对淋巴瘤细胞具有明显的杀伤效应。目前正在DLBCL中进行两项II期临床试验，一项为SGN-40单用，另一项为SGN-40与细胞毒性药物联合应用。第四十八页，共五十四页，编辑于2023年，星期六抗CD80抗体CD80为淋巴瘤治疗中的另一靶点，其表达在不同时期的B细胞和霍奇金淋巴瘤细胞表面，其参与T和B淋巴细胞的激活。Galiximab是一种人-灵长类嵌合型抗CD80抗体，临床研究表明在复发FL中具有较好的安全性和有效性。目前正在复发FL中进行III期临床试验，