动物疫病控制-病理剖检与病料采集、运送（动物防疫技术）

病料采集前要做哪些准备？(1)器具：主要包括器具(如解剖刀、剪刀、镊子、注射器等)和样品容器及辅助器材(如平皿、离心管、试管架等)。(2)器具的消毒：如刀、剪、镊子、注射器等煮沸消毒30min；器皿(玻制、陶制等)高压蒸汽灭菌30min,或经160℃干烤2h，或煮沸等。(3)试剂：待检样品保存液、抗凝剂等。(4)记录：不干胶标签、签字笔、圆珠笔、记号笔、采样单、记录本等。(5)防护用品：口罩、一次性手套、乳胶手套、防护服、防护帽、胶靴等。病料样品采集应遵循的一般原则(1)凡发现患畜有急性死亡时,如怀疑是炭疽,则不可随意解剖,只有在确定不是炭疽后,方可进行剖检。(2)根据不同的疾病或检验目的,采其相应的脏器、内容物等样品；并且样品的数量应满足统计学的要求；在无法估计病因时,可进行全面的采集。(3)内脏病料的采取,如患畜已死亡,应尽快采集,最迟不超过6h。血液样品在采集前一般禁食8h。(4)检查病变与采集病料应统筹考虑。采样时应小心谨慎,以免对动物产生不必要的刺激或损害和对采样者构成威胁。(5)应做好人身防护,严防人畜共患病感染。应防止污染环境,防止疫病传播,做好环境消毒和病害肉尸的处理。监测样品如何进行保存与运送？1.血清：一般不加防腐剂，近期内即可检验的放4℃冰箱内保存，时间较长时放-20℃～-80℃冰箱内保存。常放冰块的保温箱中运送。2.全血：只放4℃低温保存运送，保存时间不超过1周。3.其他样品：一般置于4℃左右保温容器中24h内送到实验室，若不能送到，可放保存剂中4℃或冻存，注意不宜反复冻融。如何进行样品包装、编号及单据填写？

不同部位的样品应单独、集中包装，包装后要贴上标签(注明样品名、编号、采样日期等)。同时，要填写好采样单、流行病学调查表、动物检测样品送检单和动物疫病预防控制中心接诊单等单据。病料样品的种类有哪些？血液样品：加抗凝剂的全血和不加抗凝剂的血清两类样品。脏器样品：如心、肝、脾、肺、肾、淋巴结、扁桃体、皮肤、肠管、脑、脊髓等。分泌物及排泄物样品：如泄殖腔拭子、咽喉拭子、鼻腔拭子、胆汁、唾液、乳汁、粪便、水疱液、眼分泌物、尿液、胸水、腹水、心包液和关节囊液等。其他样品：如骨骼、胎儿、生殖道样品(胎儿、胎盘、阴道分泌物、阴道冲洗液、阴茎包皮冲洗液、精液、受精卵)、胃肠内容物等。病死（屠宰）畜禽样品采集前检查!!!急性死亡的牛、羊、猪、马等动物，解剖之前应作临床检查，疑似炭疽病的应采血、镜检，排除炭疽病时，方可解剖。动物死亡后应在6h内进行剖检。解剖人员要注意自我防护。小家畜或家禽活体或尸体如何采集？把病死畜禽或将病畜禽致死后,装入密封塑料袋内,或自封袋中或其他容器内。再装入有冰袋的冷藏箱内,及时送往实验室。如何进行实质性器官样品的采集？1.肝、脾、肾、淋巴结、肺和牛、马心脏样品的采集：采取2～3cm3的小方块，置于灭菌试管或平皿中。其他动物一般采集整个心脏置于自封袋中。细菌分离样品的采集可取少量组织或液体，作涂片镜检或划线接种于适宜的培养基上。2.脑、脊髓样品的采集：取脑、脊髓2～3cm3浸入50%甘油盐水中或将整个头部（猪、牛、马除外）割下，用消毒纱布包裹，置于不漏水的容器中。如何进行肠及内容物样品的采集？1.肠管的采集：确定有病变的肠管部位。用棉线扎紧病变明显处(5-10cm)的两端,自扎线外侧剪断,即为该段肠管。2.肠管内容物的采集：选择肠道病变明显部位,用棉线扎紧病变明显处(10-15cm)的两端,用灭菌吸管吸取内容物；也可烧烙肠壁表面,用吸管扎穿肠壁,从肠腔内吸取内容物。皮肤、骨骼样品如何采集？1.采集皮肤样品：死亡后的动物皮肤样品,用灭菌器械采取病变部位及与之交界的小部分健康皮肤(约10cm×10cm)。2.骨骼样品采集：需要完整的骨标本时,应将附着的肌肉和韧带等全部除去,表面撒上食盐,然后包入浸过5%石炭酸溶液的纱布中,装入不漏水的容器内送往实验室。如何进行样品包装、编号及单据填写？

不同部位的样品应单独、集中包装，包装后要贴上标签(注明样品名、编号、采样日期等)。同时，要填写好采样单、流行病学调查表、动物检测样品送检单和动物疫病预防控制中心接诊单等单据。采样与剖检后如何进行无害化处理？活畜禽、病死畜禽组织样品采集完后，应做好样品外包装和环境消毒以及病死畜禽及其产品的无害化处理。常用组织样品保存剂的配制(1)30%甘油生理盐水：30份纯净甘油、70份生理盐水,混合后高压灭菌。(2)50%甘油生理盐水：50份纯净甘油、50份生理盐水,混合后高压灭菌。(3)50%甘油磷酸盐缓冲液：纯净甘油50份、磷酸盐缓冲液50份,混合后高压灭菌。(4)30%甘油缓冲溶液：纯净甘油30mL、氯化钠0.5g、磷酸氢二钠1g、0.02%酚红1.5mL、中性蒸馏水100mL,混合后高压灭菌。(5)pH7.4等渗磷酸盐缓冲液：取氯化钠8g、磷酸二氢钾0.2g、磷酸氢二钠2.9g、氯化钾0.2g,加入容器中加适量蒸馏水溶解再定容至1000mL,调pH至7.4,高压灭菌。(6)棉拭子用抗生素PBS：取上述PBS液,按要求加入下列抗生素:喉气管拭子青霉素(2000U)、链霉素(2mg)、阿米卡星(1000U)、制霉菌素(1000U)。粪便和泄殖腔拭子所用的PBS中抗生素浓度应提高5倍。加入抗生素后调pH至7.4。(7)饱和食盐水溶液：蒸馏水100mL,氯化钠38-39g,搅拌溶解后过滤灭菌。(8)10%福尔马林溶液：福尔马林(40%甲醛溶液)10mL加蒸馏水90mL即成。如何进行家禽拭子样品的采集？1.咽喉拭子的采集：将棉签插入喉头口及上颚裂处来回刮3～5次取咽喉分泌液。2.泄殖腔拭子的采集：将棉签插入泄殖腔转2～3圈并沾取少量粪便。

将咽喉拭子、泄殖腔拭子一并放入盛有0.8～1.0mL加有抗生素PBS的EP管中，加盖，编号。如何进行家禽羽毛的采集？1.拔取受检禽含羽髓丰满的翅羽或身上其他部位大羽。2.将含有羽髓的羽根部分按编号分别剪下收集于小试管内,于每管内滴加蒸馏水2-3用玻璃棒将羽根挤压于试管底,使羽髓浸出液流至管口,用滴管将其吸出。如何进行猪活体的样品采集？1.扁桃体采取：固定猪,开口器开口,把采样枪枪头钩在扁桃体上,快速扣动扳机取出扁桃体置灭菌离心管中,冷藏送检。2.鼻腔拭子、咽拭子采集：①每个灭菌离心管中加入1mL样品保存液；②用灭菌棉拭子在鼻腔或咽喉转动至少3圈,采集鼻腔、咽喉的分泌物；③蘸取分泌物后,立即将拭子浸入保存液中,剪去露出部分,盖紧离心管盖,做好标记。密封低温保存。3.肛拭子采集：方法同鼻腔、咽拭子,只是采集部位是肛门或泄殖腔内容物和分泌物。牛、羊O-P液(咽食道分泌物)的采集(1)采样前禁食12h，将采样探杯在使用前放入装有0.2%柠檬酸或1%-2%氢氧化钠溶液的塑料桶中浸泡5min。(2)观察被检动物的吞咽动作。将消毒过的采样探杯用与动物体温一致的清水冲洗。(3)站立保定被检动物;将探杯随吞咽动作送入食道上部10-15cm处,轻轻来回抽动2-3次后将探杯拉出。取出8-10mL的O-P液倒入含有等量细胞培养液或磷酸缓冲液的灭菌广口瓶中,充分摇匀、加盖封口、标记,放冷藏箱及时送检,未能及时送检应置-30℃冷冻保存。(4)注意事项:①采集多头动物样品时,每采完一头动物,探杯要重复进行消毒并充分清洗;②放入动物体内的探杯要与动物的体温一致。如何采集牛、羊胃液及瘤胃内容物？1.胃液采集：可用多孔的胃管抽取。将胃管送入胃内,其外露端接在吸引器的负压瓶上,加负压后,胃液即可自动流出。2.瘤胃内容物采集：反刍动物在反刍时,当食团从食道逆入口腔时,立即开口拉住舌头,另一只手深入口腔即可取出少量的瘤胃内容物。粪便样品如何采集？1.用于病毒检验的样品：少量时,灭菌棉拭子从直肠深处或泄殖腔黏膜上蘸取；较多量时,可用器械或用带上胶手套的手伸入直肠内采取，或用压舌板插入直肠,刺激排粪收集。2.用于细菌检验的粪便样品：采样方法与病毒检验方法相同，但要在动物使用抗菌药物之前从直肠或泄殖腔内采集。3.用于寄生虫检验的粪便样品：采样方法与病毒检验方法相同，应选自新排出的粪便或直接从直肠内采得,以保持虫体或虫体节片及虫卵的固有形态。生殖道样品如何采集？1.流产胎儿及胎盘：可无菌采集有病变组织，也可采集血液或其他组织，或采集流产后的整个胎儿。2.精液：用人工方法采集,并避免加入防腐剂。3.阴道、阴茎包皮分泌物：可用灭菌棉拭子从深部取样，亦可将阴茎包皮外周、阴户周围消毒后,以灭菌缓冲液或汉克氏液冲洗阴道、阴茎包皮,收集冲洗液。皮肤样品、脓汁如何采集？1.皮肤样品：活动物的病变皮肤,如有新鲜的水疱皮、结节、痂皮等可直接剪取3-5g。如为寄生虫病(疥螨、痒螨等)在患病皮肤与健康皮肤交界处,用凸刃小刀刮取皮屑。2.脓汁：采集已破口脓灶脓汁,宜用灭菌棉拭子蘸取；未破口脓灶,用灭菌注射器抽取脓汁,密封低温保存,及时送检。尿液样品、乳汁如何采集？1.尿液样品：动物排尿时,用洁净容器直接接取；也可使用塑料袋,固定在雌畜外阴部或雄畜的阴茎下接取尿液；也可以用导管导尿或膀胱穿刺采集。2.乳汁：乳房先用消毒药水洗净,并把乳房附近的毛刷湿,最初所挤的3-4把乳汁弃去,然后再采集10mL左右乳汁。关节及胸腹腔积液如何采集？1.皮下水肿液和关节囊(腔)渗出液：注射器从积液处抽取。2.胸腔渗出液：在牛右侧第五肋间或左侧第六肋间用注射器抽取,马在右侧第六肋间或左侧第七肋间抽取。3.腹腔积液：采集牛腹腔积液,在最后肋骨的后缘右侧腹壁作垂线,再由膝盖骨向前引一水平线,两线交点至膝盖骨的中点为穿刺部位,用注射器抽取;马的腹腔积液穿刺抽取部位只能在马左腹侧。脊髓液如何采集？使用特制的专用穿刺针,或用长的封闭针头。1.颈椎穿刺法：穿刺点为环枢孔。站立或横卧保定,经剪毛消毒后穿刺针与皮肤面呈垂直缓慢刺入，立即拔出针芯,自动流出或点滴状流出，大型动物一次采集量35-70mL。2.腰椎穿刺法：穿刺部位为腰荐孔。站立保定,剪毛消毒后,用专用的穿刺针刺入,即呈滴状滴出或用消毒注射器抽取,大型动物一次采集量15-30mL。尸体剖检要做哪些准备？1.剖检的时间：最好在白天进行，剖检尸体愈早愈好。2.剖检场地的选择：坚实、平整、不渗透,便于清洗、消毒。3.剖检器械：剥皮、解剖、外科等刀，镊子、斧子、锯子等。4.消毒液：新洁尔灭、来苏儿、氢氧化钠、碘酊、酒精等。5.尸体的运送：堵塞或包扎天然孔，用不透水密闭容器。6.剖检人员的防护准备：穿好工作服，注意安全等。畜禽尸体剖检基本术式!!!1.首先，进行外部检查。对怀疑死于炭疽的病尸,禁止解剖。2.然后，进行内部检查。通常包括剥皮、皮下检查、体腔剖开、内脏器官摘出及器官检查四个步骤。猪的尸体剖检术式!!!1.一般不剥皮，常采取背卧(仰卧)式。2.打开腹腔：注意用刀顺序。3.摘出脏器：腹腔、骨盆腔脏器为主。4.打开胸腔及摘出胸腔脏器。5.内脏器官的检查。猪的剖检技术视频鸡的尸体剖检术式!!!将羽毛用水或消毒水浸湿→取背卧位→两侧大腿与腹壁切开并脱臼→打开胸、腹腔→观察脏器状况→切断食管,一同取出胃、肝、脾、肠及肛门→剪开喙角,打开口腔,切断舌骨,将舌、喉、食管、嗉囊、气管等从颈部剥离→一起取出肾、肺、心脏,卵巢等→剪开鼻腔检查→脏器检查。鸡的剖检技术视频牛的尸体剖检术式!!!1.取左侧卧位：躯体重而大,有大容量的胃。2.剥皮：注意顺序，边剥边观察皮下组织的变化。3.截肢：沿肩胛骨环形切线,取下前肢；沿股骨大转子环行切割,取下后肢。4.胸、腹、骨盆腔脏器的摘出。5.脏器的检查。畜禽脏器的常见病理变化有哪些？(一)出血：破裂性出血：如流出的血液蓄积组织间隙或器官的被膜下,形成肿块并压挤周围组织,称为血肿;如血液流入体腔,则称为腔出血或腔积血(如胸腔积血、心包积血等)。渗出性出血：常因发生的原因和部位不同而有所差异。常见有点状出血、斑状出血、出血性浸润等几种形态。畜禽脏器的常见病理变化有哪些？(二)梗死：贫血性梗死：常发生于脾、肾、心、脑等处。梗死区呈苍白色，梗死灶与周围分界清楚,常有充血、出血带包围。出血性梗死：常见于脾、肺、肠,梗死灶因有出血而呈暗红色。如猪瘟脾的出血性梗死。畜禽脏器的常见病理变化有哪些？(三)坏死：局部组织或细胞的死亡称为坏死,是一种不可恢复的病理过程。如禽霍乱的肝灰白色坏死灶,但并不是所有的坏死都是病理现象,有的是生理现象,如表皮的死亡脱落、白细胞的不断破坏等。畜禽脏器的常见病理变化有哪些？(四)结石：结石：凡在排泄或分泌器官管腔或囊腔内,有机成分或无机盐类由溶解状态变为固体物质的过程所形成的固体物。多见于胃、肠、胰腺、胆管、肾、膀胱等。如鸡肾性支气管炎的肾结石、牛胆结石、马肠结石等。形状、颜色、质地、锯面、大小、重量等各不相同。畜禽脏器的常见病理变化有哪些？(五)黄疸：黄疸：由于胆红素形成过多或排泄障碍,大量胆红素蓄积在体内,使皮肤、黏膜、浆膜及实质器官等染成黄色。如：梨形虫病、钩端螺旋体病、马传染性贫血、附红细胞体病、胆道蛔虫等均可引起皮肤、黏膜、浆膜等黄染。畜禽脏器的常见病理变化有哪些？(六)水肿：体积增大：但结构致密的组织体积肿胀多不明显。紧张度的改变：紧张度增加