组培技术研发-组培试验方案设计（园艺植物组织培养）

项目一试验方案设计模块四组培技术研发12CONTENTS组培信息搜索试验方案设计项目一试验方案设计（一）组培快繁的程序（二）组培快繁类型与再生途径（三）组培技术路线（四）组培苗的遗传稳定性（五）组培试验设计方法（六）组培方案撰写格式二、试验方案设计园艺植物组织培养什么是组培快速繁殖又称微体繁殖（微繁），是指利用组织培养技术进行的一种营养繁殖方法，繁殖速度快，数量大。园艺植物组织培养二、试验方案设计（一）组培快繁的程序无菌材料的建立试管苗移栽驯化试管苗生根培养培养材料的增殖园艺植物组织培养二、试验方案设计初代培养继代培养生根培养驯化移栽

植物组织培养一般过程园艺植物组织培养二、试验方案设计初代培养：

芽、茎段、叶片、花器等外植体在离体培养条件下诱导愈伤组织、侧芽或不定芽、胚状体过程。园艺植物组织培养二、试验方案设计继代培养：更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料（愈伤组织、芽）。马铃薯继代培养园艺植物组织培养二、试验方案设计生根培养：将芽苗转接到生根培养基上培养成为完整植株的过程。园艺植物组织培养二、试验方案设计驯化移栽：组培苗经人工炼苗后移栽到驯化苗床上使之适应露地或保护地条件的过程。软枣猕猴桃驯化苗园艺植物组织培养二、试验方案设计不同物种，不同外植体类型，培养基中激素种类不同，培养条件的差异，都会导致试管苗发生途径不同。1.嫩芽增殖途径2.丛生芽增殖途径3.器官发生途径4.胚状体途径5.原球茎途径（二）组培快繁类型与再生途径园艺植物组织培养二、试验方案设计茎段新梢大量无菌苗生根培养1.嫩芽增殖途径园艺植物组织培养二、试验方案设计2.丛生芽增殖途径园艺植物组织培养二、试验方案设计3.器官发生途径脱分化再分化愈伤组织芽、芽丛切割芽丛继代培养大量芽丛试管苗生根培养外植体初代继代园艺植物组织培养二、试验方案设计4.胚状体发生途径愈伤组织小孢子游离单细胞器官

胚状体

试

管苗外植体愈伤组织小孢子游离单细胞器官

胚状体

试

管苗对应于种子胚而言。在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。园艺植物组织培养二、试验方案设计5.原球茎途径类胚组织，缩短的、呈珠粒状的、由性细胞组成的、类似嫩茎的器官。园艺植物组织培养二、试验方案设计根、芽胚状体根、芽愈伤组织芽、根根芽外植体试管苗原球茎根、芽园艺植物组织培养二、试验方案设计外因（1）外植体（类型、取材部位、采集时期）（2）培养基种类（3）激素（种类、浓度、配比）（4）添加物及糖（种类、浓度）（5）PH值（6）光照（光培养、暗培养、光周期、光质）（7）温度（高温、低温、恒温、变温）（8）培养方式（固体、液体、振荡、静置）影响组培的因素内因植物自身特点（三）组培技术路线园艺植物组织培养二、试验方案设计外植体生长素和细胞分裂素培养基种类PH值和离子浓度温度与湿度光照培养方式组培技术路线园艺植物组织培养二、试验方案设计（四）组培苗的遗传稳定性1.影响组培苗遗传稳定性的因素

2.提高遗传稳定性的措施园艺植物组织培养二、试验方案设计

1.影响组培苗遗传稳定性的因素基因型继代次数和时间植株再生方式外源激素园艺植物组织培养二、试验方案设计2.提高组培苗遗传稳定性的措施（1）采用生长点、腋芽生枝、胚状体繁殖方式，可有效减少变异；（2）缩短继代时间，限制继代次数，每隔一定继代次数后，重新进行初代培养；（3）采集幼龄的外植体材料；（4）采用适当的激素种类和较低的浓度；（5）培养基中减少或不使用容易引起诱变的化学物质；（6）定期检测，及时剔除生理、形态异常苗，并进行多年跟踪检测，调查再生植株开花结实特性，以确定其生物学性状和经济性状是否稳定。园艺植物组织培养二、试验方案设计一、单因子试验二、双因子试验（拉丁方设计）三、多因子试验（正交设计）（五）组培试验设计方法园艺植物组织培养二、试验方案设计

2种激素5种浓度的试验组合Ⅰ

6－BA（mg/L)A1A2A3

A4

A5

NAA（mg/L)B1B2

B4B3B5B1A1B1A2B1A3B1A4B1A5B2A1B2A2B2A3B2A4B2A5B3A1B3A2B3A3B3A4B3A5B4A1B4A2B4A3B4A4B4A5B5A1B5A2B5A3B5A4B5A5园艺植物组织培养二、试验方案设计2种激素5种浓度的试验组合ⅡNAA（mg/L)

6－BA（mg/L)低中

高

低中高低低低中低高中低中中中高高低高中高高园艺植物组织培养二、试验方案设计L16(45)正交表正交表的代号试验方案形成的处理数试验因子数（列号数）试验因子的作用剂量水平数（可容纳的水平数）正交试验园艺植物组织培养二、试验方案设计L4(23)正交表

正交试验园艺植物组织培养二、试验方案设计L4(23)正交试验设计

水平因子培养基

NAABA1MS0.11.02B50.52.0正交试验园艺植物组织培养二、试验方案设计L4(23)正交试验方案处理培养基

NAABA1MS0.11.02MS0.52.03B50.12.04B50.51.0正交试验园艺植物组织培养二、试验方案设计L9(34)正交表

正交试验园艺植物组织培养二、试验方案设计L9(34)正交试验设计

水平因子培养基

IBABAGA31MS0.51.51.02B51.01.02.03WPM2.02.04.0正交试验园艺植物组织培养二、试验方案设计L16(45)正交表

正交试验园艺植物组织培养二、试验方案设计

L16(45)诱导苹果生根正交试验结果正交试验园艺植物组织培养二、试验方案设计筛选及使用最佳组培方案应注意的问题

找准主导影响因子是关键。试验有重复，试材数量大于30，每处理10瓶，每瓶3块培养物。试材须在相同培养上继代培养3代以上，才能保证试验结果可靠。最佳培养基配方长期使用后，应视培养物的表现适当调整或校正。园艺植物组织培养二、试验方案设计（六）组培方案撰写格式

×××试验方案1.前言2.正文（1）试验的基本条件（2）试验设计（3）操作与管理要求（4）调查分析的指标与方法3.试验进度安排与经费预算4.落款5.附录园艺植物组织培养二、试验方案设计任务2组培对象的学名、品种名和商品名；外植体的类型与取材时间、部位；培养基配方(初代、继代生根配方)；培养条件；培养效果；驯化移栽条件与基质配比；任务1：组培信息搜集（蝴蝶兰组培快繁技术）任务2：蝴蝶兰组培快繁试验方案设计园艺植物组织培养二、试验方案设计项目一试验方案设计模块四组培技术研发12CONTENTS组培信息搜索试验方案设计项目一试验方案设计一、组培信息搜索园艺植物组织培养（一）信息搜索途径（二）信息检索的程序（三）文献检索的方法（四）检索步骤

园艺植物组织培养

植物组培的工作程序制定培养方案外植体选择与处理初代培养继代培养接种壮苗与生根培养试管苗的驯化移栽一、组培信息搜索园艺植物组织培养（一）信息搜索途径

1.文献检索法2.因特网查询3.现场调查法4.阅读收听法一、组培信息搜索园艺植物组织培养（二）信息检索的程序

1.制定信息搜集计划2.设计调查提纲和调查表3.信息搜集4.分类整理并保存信息资料一、组培信息搜索园艺植物组织培养文献检索◆植物的学名、品种名、商品名◆此种植物组培的相关报道◆重点收集分析的技术信息一、组培信息搜索园艺植物组织培养收集、分析的技术信息◆外植体取样时间与外植体类型◆诱导、继代、生根培养基配方◆培养条件（温度、湿度、pH值等）◆移栽驯化条件及基质配比一、组培信息搜索园艺植物组织培养（三）文献检索的方法

1.直接法

（1）顺查法（2）倒查法（3）抽查法一、组培信息搜索园艺植物组织培养（三）文献检索的方法2.追溯法

是指不利用一般的检索工具，而是利用已经掌握的文献所附的参考文献进行追溯查找引文的一种检索方法。一、组培信息搜索园艺植物组织培养一、组培信息搜索园艺植物组织培养一、组培信息搜索园艺植物组织培养（三）文献检索的方法

3.综合法（循环法）

先利用检索工具查出一些有用文献，然后根据这些原始文献所附的参考文献，进行追溯查找，由此获得更多的有关文献。一、组培信息搜索园艺