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文档简介
食用菌栽培食用菌消毒
1、接种室与接种箱的消毒方法及其使用规程接种工作可在预先消毒过的接种室或接种箱内进行,药物熏蒸、药液喷雾或紫外线照射均可达到消毒目的,若能三者并用,则消毒效果更好。接种箱无菌接种室1)接种室的消毒(1)药物熏蒸接种室内空间较大,不易保持无菌状态,使用前一天必须进行熏蒸消毒。一般每立方米空间,需要4~6g气雾消毒剂或40%甲醛8ml、高锰酸钾5g气化熏蒸。在接种的前一天,按照气雾消毒剂的用量说明,解开包装物,用盘碗盛消毒剂置于已关闭窗户的消毒空间的不同部位,明火点燃,迅速关门。采用甲醛和高锰酸钾消毒时,先密闭窗子,把称好的高锰酸钾放在大烧杯内,然后将甲醛液倒人杯内,立即出室关门。几秒钟后,甲醛液即沸腾挥发。甲醛对人的眼、鼻有强烈的刺激作用。可在熏蒸后12小时,量取与甲醛液等量的氨水,倒在另一烧杯里,迅速放人室内,可减少甲醛的刺激作用。使用氨水中和,至少应在接种前2小时进行。甲醛高锰酸钾(2)药物喷雾每次接种前,一般常用5%石炭酸溶液喷雾。石炭酸溶液除具有杀菌作用外,还可使空气中微粒和杂菌孢子沉降,使室内空气净化,并防止工作桌(台)面和地面微尘飞扬。
石炭酸(C6H6O;
C6H5OH)
—又名:苯酚(3)紫外线灯照射接种室使用前,与药物喷雾的同时,应打开紫外线灯进行消毒:一般6m2大小的接种室(长3m,宽2m,高2m,能容纳1~2人工作),安装一支紫外线灯管即可(波长253.7nm,功率30瓦)。照射时,先关闭照明灯,且人要离开室内,以防辐射伤人。照射结束后,须隔30分钟,待臭氧散尽后再入室工作,紫外线灯每次照射1小时为宜。2)接种箱的消毒接种箱一般多用于分离工作和小规模的接种,使用前应进行严密的消毒。(1)药物揩擦使用前首先用0.25%新洁尔灭菌液将箱揩擦干净。(2)甲醛熏蒸特别是在进行分离工作和接种量较大情况下,箱内摆满了各种工具、器皿,液体药物喷雾难以触及器物所有表面,就必须进行熏蒸消毒,从而保证分离工作的成功,方法同接种室的熏蒸消毒。另外也可将盛有甲醛的烧杯,置于三角铁架上,用酒精灯直接加热,使甲醛液蒸发,进行熏蒸。(3)气雾消毒剂熏蒸称取5~10g气雾消毒剂放人盘碗中,明火点燃,关闭接种箱门。(4)紫外线照射经甲醛熏蒸过的接种箱,工作前再用紫外线灯照射20~30分钟,以达到空间杀菌目的。照射结束后,隔30分钟就可以开始工作。(5)药物喷雾如果接种箱只用于少量的接种工作(试管母种接种),则在使用前30分钟,喷一次5%石炭酸液,并同时用紫外线灯照射20分钟就可以了。因为接种时试管口还有酒精灯火焰封口这一关,一般被污染杂菌的可能性不大。3)接种室(箱)的使用规程(1)接种室(箱)每次使用的前一天(或半天),将已灭过菌的瓶(袋)装培养基及各种需用物品搬进接种室(箱),同时进行消毒,最好采取药物熏蒸、喷雾、紫外灯照射并用,以提高消毒效果。(2)操作前穿上无菌工作服、工作鞋,带好口罩和工作帽,再用2%煤粉皂液将手浸洗几分钟,然后进人接种室。(3)接种前,用70%酒精棉球擦手。操作时要思想集中,严格认真、动作要轻,尽量减少空气波动,每次接种结束前,禁止打开门窗,避免空气污染。(4)工作结束后,及时搬出瓶袋培养物及其他物品,并将室内收拾干净。如果要连续使用接种室,必须重新进行全面的消毒灭菌。(5)温度高的季节,接种室内杂菌基数较高,更应提高消毒灭菌的水平,否则,污染率将是很高的,应引起高度重视。2、消毒液配制操作内容(仿真)(1)计算(2)称量(3)搅拌溶解(4)安全文明操作例1:3%有效氯漂白粉配成200ml0.1%有效氯漂白粉水3%*x=0.1%*200X=0.1%*200/3%=6.7g
3%有效氯漂白粉配成200ml0.1%有效氯漂白粉水95%酒精原液配成75%酒精溶液1000ml95%*750=75%*950例2:5%新洁而灭原液配成
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