经典液相色谱分析技术-纸色谱分离分析技术（仪器分析技术）

仪器分析技术纸色谱分离分析技术

——纸色谱操作技术3、展开2、点样1、色谱滤纸准备4、斑点定位纸色谱操作技术主要包括四个步骤仪器分析技术一、色谱滤纸准备

仪器分析技术1、用于下行法的色谱滤纸取色谱滤纸切成适当大小的纸条；离纸条上端适当的距离用铅笔划点样基线，必要时可在滤纸下端切成锯齿形便于展开剂向下移动。2、用于上行法的色谱滤纸色谱滤纸长约25cm，宽度按需确定，点样基线距离底边约2.5cm。每次点样后，使其自然干燥或将其吹干，只有干后，才能第二次点样。二、点样仪器分析技术将样品溶解于适宜溶剂中，用定量毛细管或微量注射器吸取溶液，点样于基线上。要求：点样量：＜10μl点样直径：2-4mm点间距离：1.5cm-2cm点样形状：圆形、条形划线点样三、展开1、下行展开法：1）先饱和展开缸；2）将色谱滤纸点样端放在展开剂槽中用玻璃棒压住，滤纸一端自然下垂；3）小心添加展开剂在展开槽中，使滤纸上端浸没在展开剂中，展开剂沿滤纸进行移动；4）展开至规定的距离，取出滤纸，标明展开剂前沿，待展开剂挥去后检视。仪器分析技术纸色谱下行展开示意图2、上行展开法：1）先饱和展开缸；2）将色谱滤纸浸入展开剂约1cm，展开剂沿色谱滤纸上升；3）展开至规定的距离，取出滤纸，标明展开剂前沿，待展开剂挥去后检视。仪器分析技术四、斑点定位仪器分析技术纸色谱法斑点的定位基本和薄层色谱法相似，但

纸色谱法不能使用腐蚀性显色剂，也不能在高温

下显色。运用纸色谱进行药物的鉴别、检查和含量测定的

方法、要求与薄层色谱法一致。谢谢观看！仪器分析技术纸色谱分离分析技术

——纸色谱基础知识介绍仪器分析技术主要内容纸色谱定义12分离原理仪器分析技术常用仪器与材料3一、纸色谱（PC）定义

以滤纸作为载体，以纸纤维上吸附的水作为固定相，以不与水相混溶的有机溶剂为流动相来对样品进行分离分析的方法。载体滤纸的纸纤维固定相滤纸上吸附的水流动相与水不相混溶的有机溶剂仪器分析技术二、分离原理

利用样品中不同组分在两相溶剂中溶解性（或分配系数）不同，当流动相携带样品流经固定相（被吸附或固定在惰性材料上的液体）时，各组分在两相间不断进行溶解、萃取、再溶解、再萃取，……，样品经过多次反复分配后，造成分配系数稍有差异的组分移行的距离不同面实现分离。Rf与组分性质、流动相及溶解度有关。仪器分析技术三、常用仪器与材料1、色谱滤纸滤纸质地均匀、平整无折痕边缘整齐，杂

质含量少；

滤纸的纤维松紧适宜；对Rf值相差很小的化合物，宜采用慢速滤纸对Rf值相差较大的化合物，则可用快速滤纸常用国产（新华色谱滤纸）和进口（Whatman）滤纸色谱滤纸仪器分析技术2、展开剂纸色谱的固定相一般为纸纤维上吸附的水，所用展开剂的选择主要考虑待测组分在两相中溶解度和展开剂的极性。常用的展开剂是含水的有机溶剂，如水饱和的正丁醇、正戊醇、酚等，也可加入少量的酸或碱，如甲酸、醋酸、吡啶等，防止弱酸弱碱的解离。展开剂中溶解度较大的组分Rf值较大；对极性物质，增加展开剂中极性的组分的比例，Rf值增大；增加展开剂中非极性的组分的比例，Rf值减小。仪器分析技术3、展开容器通常为圆形或长方形玻璃缸，缸上具有磨口玻璃盖且能密闭。纸色谱上行展开示