中考生物总复习重点课件：实验二微生物的实验室培养

实验二微生物的实验室培养营养条件----培养基人们按照微生物对营养物质的不同要求,配制出供其生长繁殖的营养基质.培养基种类培养基的成分水碳源氮源无机盐生长因子其他条件配制培养基时还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质（生长因子）以及氧气的需求。环境条件-----无菌技术----消毒煮沸消毒法、巴氏消毒法。化学试剂消毒法：用酒精擦拭双手、氯气消毒水源等。紫外线消毒法：紫外线照射接种室、接种箱或超净工作台。无菌技术----灼烧灭菌将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属器具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底灭菌。接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰灼烧来灭菌。无菌技术----干热灭菌

将灭菌物品放入干热灭菌箱内，在160～170℃加热1～2小时可达到灭菌目的。能耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属器具等。无菌技术----高压蒸汽灭菌

将灭菌物品放置高压蒸汽灭菌锅中，一般保持压力为100KPa、温度121℃条件下，维持15～30分钟。思考---选择合适方法消毒或灭菌培养基和培养皿玻棒、试管、烧瓶、吸管实验者的双手环境条件-----培养温度和时间种类

条件温度天数细菌30～37度1～2d放线菌25～28度5～7d真菌25～28度3～4d纯化技术------菌落菌落：微生物在固体培养基表面生长可形成菌落。单菌落：一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。

获得单菌落就达到了纯化培养微生物的目的。实验药品及器材

大肠杆菌菌液、液体培养基、固体培养基、酒精灯、70%酒精棉、高压灭菌锅、涂布器、接种环、恒温培养箱等。配制培养基----液体培养基计算称量溶化（不加琼脂）调pH灭菌配制培养基----固体培养基计算称量溶化（添加琼脂）调pH灭菌倒平板（50℃）纯化遵大肠蛙杆菌--帐--平板锹划线栋法平板带划线糟法是饼通过劣接种卧环在列固体杰培养录基表降面连鼓续划蓝线的许操作赠，将兄聚集胆的菌妙种逐衣步稀汪释分银散到慕培养些基的息表面烤。在比数次碰划线踢后培躲养，坚可以孙得到境单菌捏落。纯化激大肠娇杆菌--剥--稀释离涂布洒法稀释办涂布脑平板唯法是锐将菌饮液进贺行一换系列裳的梯玩度稀僵释，堂然后初将不卫同稀脊释度崭的菌虏液分嘉别涂阔布到死固体窗培养淘基上浇进行扫培养纹。合适的稀贴释度分菌液顺涂布乖后可纹在固嚼体培型养基捞上形蚕成单究菌落允。注意欠：取洞出涂棵布器腰时，轧要让抵多余顺的酒窝精在茂烧杯压中滴辅尽，允然后繁将沾芽有少躺量酒嫁精的附涂布绩器再派灼烧侮灭菌炕。培养将接眠种后雪的培扑养基锐和一悼个未衫接种液的培降养基坝都放腊入37℃恒绒温箱影中,培养12小时慨和24小时动后,分别勿观察滋并记暮录结抱果。实验雀四垄微生浅物数疮量的浊测定统计惭菌落绒数目购估算途样品酷中的隆活菌夫数量当稀招释度摊足够寺高时努，平更板上溜的一莲个菌肿落来优源于滥菌液壁中的但一个咱活菌述。在实故际操逼作中舱，通平常选棉用一筛定稀层释范喷围的样样品损液进抖行培津养以鞋保证芝获得小菌落挨数在30～30乐0之间暂、适俊于计程数的摸平板畏。合适斥的稀同释度测定书土壤派中细痰菌的幅数量墙，一肥般选俩用104、105和106倍的扬稀释芝液进帽行平班板培估养实验隔方法稀释览涂布煮法实验日步骤土壤扩取样秋。配制宇一系资列梯钓度稀前释土鉴壤溶自液涂布章在固肤体培珠养基咽上，语按照根不同渐微生想物培集养温贞度和倡时间雾进行江培养男。统计乏菌落抬：每恐个梯如度应固多涂斜几个额平板快，取歼其平青均值填。并置设置肾空白渔对照扭。估算携每克怖样品擦中的谁菌株交数：统计火结果螺常常研用菌抓落数腐目。蜻所测献得的丑菌落群数目豆一般行小于朝实际怪菌液驱中的真活菌改数。显微患镜直稀接计殿数法畜：血乳球计塘数板蚕法统计爹结果巴：一笋般用挥活菌瞧数表砍示。滤膜梦法：鸣测定肢饮用振水中好大肠位杆菌幕的数竹目已知有体积志的水疤过滤摆后，意将滤究膜放头在伊帝红—美蓝掉培养蜻基上江培养岁。在换该培