分子生物学考试笔记

第一请定义DNA重组技术和工程技术DNA重组技术：是将不同的DNA片段按照人们的设计定向连接起来，在特定的受体细胞中与载体同时并得到表工程技术：是将不同的DNA片段按照人们的设计定向连接起来，在特定的受体细胞中与载体同时并得到第二什么是核小体？简述其形成过程DNAH2A,H2B,H3,H4200bpDNA，DNAH1H1DNA200bpDNAH2A,H2B,H3,H4，H1酸酶水解核小体后产生只含146bp颗粒，包括组蛋白八聚体及与其结合的146bpDNA，该序列绕在外面形成1.75圈，每圈约80bp。由许多核小体构成了连续的染色质DNA细丝。核小体的形成是中DNA压缩的第一阶段。在核小体中DNA盘绕组蛋白八聚体，从而使分子收缩至原尺寸的1/7。200bpDNA完全舒展时长约68nm,10nmDNA核小体长链200bp→核酸酶初步处理→核小体单体200bp→核酸酶继续处理→颗粒简述DNA的一,二,三级结构的DNA三级结构：指DNA双螺旋进一步盘绕所形成的特定空间结原核生DNA具有哪些不同于真核生物DNA的特征DNADNA存在转录单元:原核生物DNA序列能相关的RNA和蛋白质，往往丛集在组的一个或几个特定部mRNAmRNA。 ：，即同一段DNA能携带两种不同蛋白质信息。主要有以下几种情况①一个完全 里面②部分③两个只有一个碱基对是的DNA通常采取哪些方1线性DNA双链的：将线性子转变为环状或多聚分子在DNA末端形成发夹式结构 在真正的末端启动2环状DNA双链的：θ型滚环型D—环简述原核生物DNA的特点（1）的起始—DNA双螺旋的解旋:DNA在时，其双链首先解开，形成叉，这是一个有多种蛋白质和 DNA的RNA引物的合成—前导链：DNA双链解开为单链后，由酶在5’→3’DNA模板上合成一段RNA引物，再由DNA聚合酶从RNA引物3’端开始合成新的DNA链。然后以此为起点，进入DNA的延伸。后随链：后随链的过程由体来完成。体由6种蛋白组成的前体和酶组成。体催化生成滞后链的RNA引物短链，再由DNA聚合酶III作用合成后续DNA，直至遇到下一个引物或片段为止。在RNA3-5（3）的延伸—片段与半不连续:在原核生物中，DNA新生链的合成主要由DNA聚合酶III所催化。当片段形成后，DNA聚合酶I通过其5'→3'外切酶活性切除片段上的RNA引物，同时，利用后一个冈崎片段作为引物由5'→3'合成DNA。最后两个片段由DNA连接酶将其接起来，形成完整的DNA滞后链。（4）的终止—DNA的终止依赖与Tus蛋白和DNA链上特殊的重复序列Ter。Tus-ter复合体将DNA解链，等反方向的叉到达后停止，然后两条链解开。最后，释放子链DNA，依靠拓扑酶将超螺旋结构DNA细胞通过哪几种修复系统对DNA损伤进行修错配修复切除修 重组修 DNA直接修复SOS系什么是转座子？可分为哪些种类DNA的转座，或称移位，是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。转座子是存在于 DNA上可自主 什么是编码链？什么是模板链大肠杆菌的RNA聚合酶有哪些组成部分？各个亚基的作用如何4.65*10５。α亚基：与酶的组装及启动子识别有关，并参与RNA聚合酶和部分调节因子的相互作用。能与模板DNA、新生RNA链及核苷酸底物相结合。简述σ因子的作σRNADNA103倍，酶底复合物的半衰期可达数1s什么是Pribnowbox?它的保守序列是什Pribnowbox5RNAPribnow区。这个区的大约位于起点上游10bp处，所以又称-10区 简述原核生物和真核生物mRNA的区别A大肠杆菌的终止子有哪两大类？请分别介绍一下他们的结构特点ppp：1，位于位点上游一般存在一个富含GC碱基的二重对称区，由这段DNA转录产生的RNA容易形成发卡式结构。2，4—8A3’Up第四遗传有哪些特征 （2）.子有简并性；级一种以上子编码同意种氨基酸。（3）.共有64个子，其中有1个起始子和3个终止子；（4）.子有通用性与特殊性，即不管是、原核生 子的含义都是相同的，但在各位生物中也有例外（5）子与反子存在相互作用有几种终 子？它们的序列和别名是什么3种 tRNA在组成和结构上有哪些特点①tRNAACGU；②tRNA；③tRNA端有氨基酸接纳茎；④tRNA分子序列中很有反子。什么是SD序列？其功能是什么SD(mRNA16SRNA18SrRNA3′73～7(AGGAGG)，mRNA什么是信号肽？它在序列组成上有哪些特点？有什么功能3161-5NC必要条件。蛋白质有哪些翻译后的加工修饰第五如何理解PCR扩增的原理和过性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定的体外。过程：①变性：将DNA在沸点的温度下加热使变性，双链打开；②退火：引物与模板的相结合；③链的延伸，DNASNP作为第三代遗传标记的优点是什么⑴在组中的相对高频分布非常适合用于关联分析⑵在人群中是二等位性的，在任何人群中其等位频率都可估计出来⑶与串联重复的微位点相比，SNP是高度稳定的，尤其是处于编码区的SNP（cSNP），而前者的高突变率容易引起对人群的遗传分析出现。⑷部分位于内部的SNP可能会直接影响产物蛋白质的结构或表达水平，因此，它们本身可能就是疾病遗简述RNAI技术在分子生物学领域的应用前景和存在的问RNAimRNAmRNARNAiRNAsiRNA，RNAi。第七简述乳 子的调控模 的产物由同一条多顺反子的mRNA分子所编码②该mRNA分子的启动区（P）位于阻遏（I）与区（O）之间，不能单独起始半乳糖苷酶和透过酶的③区是DNA上的一小段序列，是阻遏物的结合位点④当阻遏物与区相结合时，lacmRNA的转录起始受到抑制⑤诱导物通过与阻遏物结合，改变它的三维构象，使之不能与区相结合，从而激发lacmRNA的合成什么是弱化作用简述反义RNA的调控机起负调控作用。（2）mRNARNARNA以及起始处，从而影响核糖体与mRNA结合。（4）抑制肽链延伸。反义RNA可以与翻译中的mRNA结合，RNA杂交链会肽链的进一步延伸。（5）碱基修饰。当反义RNA-mRNA杂交分子注入细胞后，其中A-U碱基中的A可被修饰为I，改变了结构，这种碱基修饰作用可以加强反义RNA的抑制作用。第八何为外显子，内含子及其结构特点和可变调控大多数真核都是由蛋白质编码序列和非蛋白质编码序列两部分组成的，编码序列称为外显子，非编码序列称为内含子。内含子的两端序列之间没有广泛的同源性，因此内含子两端序列不能互补，说明在剪接加工之前，内含子上游序列和下游序列不可能通过碱基配对形成发卡式二级结构。可变调控：成mRNA，称为组成型拼接。这样一个只产生一种成mRNA，也只产生一种蛋白质产物。2mRNA，增强子的作用机DNADNA介形成增强子与启动子之间“成环”连接，活化转录；②将模板固定在细胞核内特定位置，有利于DNA拓扑DNARNADNA因子或RNA聚合酶Ⅱ进入染色质结构的“”。反式作用因子的结构特点及其对表达的调控①参与所有或某些转录阶段的RNA聚合酶亚基，不具有特异性②与转录的起始或终止有关的辅助因子，不具有特异性②螺旋-转折-螺旋结构②锌指结 ③碱性-亮氨酸拉链④碱性-螺旋-环-螺旋即bHLH结构⑤同源域蛋SP1GC举例说明蛋白质磷酸化如何影响表30.30.组蛋白乙酰化和去乙酰化影转录的机组蛋白乙酰转移酶和去乙酰化酶通过使组蛋白乙酰化和去乙酰化对表达产生影响。组蛋白N端“巴”上赖DNA节蛋白与染色质相结合的变化，从而提高了转录的活性。组蛋白H2A,2H3H4通过蛋白“尾部”选择性乙酰基化影响核小体的浓缩水平和可接近性。31.激素影响表达的基本模激素、受体与顺式作用元件的结合位点三者，激素胞内受体与阻遏物形成非活性复合物，形成有活性DNADNA打破这种。第九32.已经成为人类健康的主要，根据你所了解的知识，简述为何具有如此大的危害？对于的防治为何如此？、无止境地增生，使患者体内的营养物质被大量消耗；癌细胞释放出多种毒素，使产生一系列症状；癌细胞还可转移到全身各处生长繁殖，导致消瘦、无力、贫血、食欲不振、发热以及严重的脏器功能受损等等。与之相对的有良性肿瘤，良性肿瘤则容易清除干净，一般不转移、不复发，对、组织只有挤压和阻塞作用，但还可破坏组织、的结构和功能，引起坏死合并，患者最终由于功能衰竭而。33.试述大肠33.试述大肠杆组和真核生①真核生 组指一个物种的单倍组的主要区组所含有的一整 原核生物一般只有一个环状的DNA分子，其上所含有 为一 组②原核生物 分子量较小 以外，还含有各种质粒和转座因子。质粒常为双链环状DNA，可独立 真核生物除了 。有的真核细胞中也存在质粒⑤真 。一、解释概念:产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列组:一个细胞中的全部DNA或一个物种的单倍体中的全部DNA，称为该物种的DNA的Ｃ值:一个单倍体组的DNA含量总是恒定的，它通常称为该物种DNA的C值(CＣ值/C值谬误/C值反常现象:在真核生物中，物种进化的复杂程度与DNA含量C值并不完全一致，称之为C值(C 回文结构:反向重复序列(invertedrepeats)：又称为回文结构(palindrome)，是指两个顺序有时两个反向重复的DNA序列不一定邻接，中间可以夹杂一些非重复的DNA序列，称为间断DNA:将组DNA切成数百个片断进行超速离心时，常会在DNA主峰旁形成一个次要的小峰。这些小峰在主峰边上就象一样，故命名为DNA，也叫随机DNA、随体。Tm溶解温度，变性是在一个相当窄的温度范围内完成，在这一范围内，紫外光吸收值达到最大值的%时的温度称A的解链温度，又称溶解温度。其大小与C含量成正比。断裂:是指 的编码序列在DNA分子上是不连续的，被一些不编码的序列所隔开。即真 复等位:在一种生物群体中，某一个座位上的不同等位的数目是相当大的，称之为朊:无组，而仅由蛋白质组成的传染因子称为正链:正链RNA：RNA能起mRNA的作用RNA5'端有帽子，3'端有poly负链:其互补链能起mRNA的作用RNA5'端有三磷酸核苷，没有帽子；互补链有帽。3端没polyA，需利用宿主的polyA聚合酶:在组进化中，一个通过重复产生了两个或的拷贝，这些即构成 ;与。串联重复:串联排列在同一条上，形成簇(genecluster)，每个重复的基因单元间由非转录的间隔区分开。如rRNA、tRNA、组蛋白，它们的表达产物是为细胞所大端粒与端粒酶:端粒指真核生物线性DNA分子末端的结构。端粒酶是一种RNA-蛋白质的复合物。在端粒DNA上，端粒酶既有模板、又有逆转录酶这两方面的作用。ＡＰ位点:所有细胞中都带有不同类型、能识别受损核酸位点的糖苷水解酶，它能特异性切除受损核苷酸上的β-糖苷键，在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点，统称为AP位点。同义突变；是指没有改变产物氨基酸序列的子变化，即与子的简并性相关。错义突变：指碱基序列的改变引起了产物氨基酸序列的变中性突变:有些错义突变基本不影响蛋白质功能，称为中性突变回复突变:突变体失去的野生型性状可以通过第二次突变抑制突变:大多数是第二次点突变并没有改变正向突变的DNA碱基序列，只是其突变效应被抑无义突变;是指某个碱基的改变使代表某种氨基酸的子变为蛋白质合成的终止子，使框移突变:插入或缺失导致三联体的阅读方式改变，造成蛋白质氨基酸排列顺序发生改klenow片段:聚合酶1可以被蛋白酶切成两个区域：占蛋白2/3的C端区域（相对分子质68000）又称为klenow片段，同时具有DNA聚合酶活性和3—5核酸外切酶活性，既可合DNA链，又能降解DNA，保证了DNA的准确性以人类组和拟南芥组为例说明你对生物组全序测定工作的科学意义与社会意义的认识（8分）（入学分子遗传学试题）真核生物组中的DNA重复序列主要有哪些类型？简要说明组重复序列可能的生物学意义以及组重复序列在分子标记研究中的应用（中国2002年入学分子遗SNP：是由于单个核苷酸改变而导致的核酸序列多态。（第医大学2003年分子生物学什么是遗传学中心法则?为什么说 的发现是对此法则提出 生化所分子遗传学1998年试题 在真核生物核内。五种组蛋白（H1 H2BH3H4）在进化过程中，（H4）极为保守，（H2A）简述DNA的C值以及C值（CValue（生化所98年）第二军医大：C 简述真核细胞内核小体与核小体颗粒的结组的特点（请设计一个实验来证明DNA是以半保留方式进行DNA的有特定的起始位点，叫做原点。ori(或o）、富含A、T的区真核生物起始点的特征包括（A富含GC B富含AT CZDNAD无明显特组DNA时，先导链的引物是(DNA)，后随链的引物是RNA(-Replicon、semi-conservative原核DNA合成酶中 ）的主要功能是合成前导链和片A、DNA聚合酶 B、DNA聚合酶ⅡC、DNA聚合酶 D、引物DNADNA转座子（transposon）：存在与DNA上可自主和位移的基本单位DNA（转座元）DNA分子中的一个位置被搬移到另一位置或另一DNA分子中 Tn10DNA利用自己的位点专一重组酶把自己从寄主组中的一个地方移到另一个地方的遗传元件（A、启动子B、转座子C、T- D、顺反转座子DNA是遗传物质的两个关键性实验是：链球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体大肠杆 从被的生物体内重新分离得到DNA，作为疾病的致病DNA生物体吸收的外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能(d)DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子29.1953年Watson和Crick提出 DNADNA的是半保留的，常常形成亲本—子代双螺旋杂合DNA下列哪一种蛋白不是组蛋白的成分 (a) (b)H2A、 (c)H3、 、DNA的变性 DNA的二级结构指 4DNA是指DNA双螺旋进一步盘绕所形成的特定空间结构在原核生物子中以下哪种酶除去RNA体并加入脱氧核糖核甘酸(A)DNA聚合酶 （B）DNA聚合酶 （C）DNA聚合酶Ⅰ(D)外切核酸酶DNA时不需要以下哪种酶？（）（A）DNA指导的DNA聚合 （B）RNA指导的DNA聚合（C）拓扑异构 （D）连接DNA时导链上DNA沿5’-3’方向合成，在滞后链上则沿3’-5’方向合成。 DNA的需要DNA聚合酶和RNA聚合核小体是由H2A、H2B、H3、H4各两个分子生成的（ ）和由大约200bpDNA组成的。八聚体在中间，DNA分子盘绕在外，而（ ：Transcription;ReverseA.它位于第一个结构处B.它和RNA聚合酶结合C.它编码阻遏蛋白D.它和反子结合 B. C. D. E.DNA5’-ATTCAG-3’A.5’-GACTTA-3 B.5’-CTGAAT-3C.5’-UAAGUC-3 D.5’-CUGAAU-3DNA和转录过程有许多相同点,下列描述哪项是错误的A.转录以DNA一条链为模板,而以DNA两条链为模板进行B.在这两个过程中合成均为5`-C.的产物通常情况下大于转录的产DRNA真核生物的mRNA加工过程中,5’端加上（ ），在3’端加上（ 帽子结构、多聚腺苷酸尾巴、poly(A)决定转录基础频率的DNA元件是 ），它是 ）的结合位 启动子RNA原核生物RNA聚合酶酶由 ）组成，全酶由 ）组成。2αββ′ω、mRNA（A.7-甲基鸟嘌呤核苷三磷酸 B.7-甲基尿嘧啶核苷三磷酸C.7-甲基腺嘌呤核苷三磷酸 下面哪一项是对三元转录复合物的正确描述 σ因子、酶和双链DNA在启动子形成的复合DNARNAC）（D）σ因子、酶和促旋酶形成的复合简述的简并性（degeneracy)和同义子（synonymous多数氨基酸都有两个以上子，下列哪组氨基酸只有一个子 C．丝氨酸、亮氨酸D．色氨酸、甲硫氨酸tRNAA．CAA- B．CCA- C．AAC- D．ACA- E．AAC-A．20种氨基酸共有64个B．碱基缺失、插入可致框移突 C．AUG是起D．UUU是终止E．一个氨基酸可有多达6个tRNAA．-CCA-OH3′末 B．3个核苷酸为一组的结C．稀有碱 D．反 E．假腺嘌吟蛋白质生物合成中的终止Shine-Dalgarno顺序(SD-顺序)是指 mRNA8-13在DNA分子上转录起始点前8-13个核苷酸处的顺序 “同工tRNA” 代表相同氨基酸的多个反子中哪个碱基对参与了子的简并性(摇摆)。 (B