上海市临检中心 PCR人员上岗培训班 课件3、PCR 质量控制2016.3.21 肖艳群

分子诊断质量管理基本内容和要求上海市临床检验中心肖艳群质量管理内涵

质量管理就是建立一个体系，使在实验的全过程中所有影响实验结果的环节都处于受控状态，保证每个环节的协调和统一，确保实验结果始终可靠分子诊断质量管理要求制定依据

《医疗机构临床实验室管理办法》（卫医发[2006]73号）

《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》（卫办医政发[2010]194号）

医学实验室质量和能力认可准则

ISO15189(CNAS-CL02)

医学实验室质量和能力认可准则在分子诊断领域的应用说明（CNAS-CL36）

医学实验室质量和能力认可准则在组织病理学检查领域的应用说明（CNAS-CL37）基本内容

质量管理体系

人员

实验室设置、环境和设施

设备与材料

实验室信息系统

分析前质量控制

分析过程质量控制

分析后质量控制一、质量管理体系

分子诊断实验室管理

质量管理体系建立

文件和记录管理分子诊断实验室管理要求

医疗机构对临床基因扩增检验实验室应当集中设置，统一管理

以科研为目的的分子检测项目,不得向临床出具检验报告,不得向病人收取任何费用质量管理体系建立

作用•

建立并保持质量管理体系有效运行的重要基础•

规范各项工作，保证工作质量

内容：质量手册、程序文件、操作规程、记录注意：适合自身实际情况，可操作性写你所做的、做你所写的、记你所做的质量管理体系建立

编制实验室管理文件，应包括但不限于以下文件或程序1.组织和人员管理方面的文件，应包括实验室各类人员的岗位职责、岗位培训、继续教育以及定期考核2.

环境、设施及安全管理3.

仪器、设备的采购、验收、使用、维修、校准4.

检验试剂及其他相关消耗品的采购、验收、保管、领用及使用5.

样品的采集、运送、接收、处理及保存6.

检验方法的选择、确认或验证7.

检验项目及仪器设备标准操作程序的建立和管理8.

检验结果质量保证9.

检验报告管理的规定。其中包括结果的发放方式，报告的格式和内容，以及有关保护患者隐私的规定10.

记录的管理文件或程序，其中应包括记录的修改、保存及期限等要求11.

对差错事故及不符合工作的纠正及预防措施12.

对服务对象投诉处理

实验室所有的文件、程序应完整、清晰，现行有效记录管理

原始记录和质量记录应完整、清晰，电子记录应定期备份。实验室所有质量管理记录均应按相关规定保存注：质量管理记录，应包括但不限于标本接收、标本储存、标本处理、仪器和试剂及耗材使用情况、校准、室内质控、室间质评、检验结果、报告发放等内容

无仪器打印结果的检验项目应有原始记录，记录信息至少应包括检测日期、方法、试剂品牌、批号、有效期、检验结果、检验者注：凝胶图像和斑点杂交原始记录可通过扫描、拍照等方式保留二、人员要求

实验室技术人员•

实验室至少应有2名有临床基因扩增检验技术上岗证的本单位技术人员•

开展遗传性疾病或基于组织、细胞等分子病理并出具诊断报告的实验室，至少应有1名具备出具相关诊断报告资质的本单位医师•

新进人员应完成岗前培训和能力评估培训与效果评估

分子诊断实验室应有相应的学习培训制度、计划和记录

定期（每12个月至少一次）对学习培训效果进行评估注1：工作人员的培训应包括与其提供服务相关的、本实验室质量保证和质量管理方面的专门培训注2：

a)计划制定应有针对性b)员工培训和能力评审以新进人员或转岗人员为重点c)培训形式可以多样：外出培训、科、组内部培训、自学、交流等d)培训效果评估形式：考试、操作、通过培训解决问题、通过培训对自身能力和工作能力的提高e)培训记录：可包括培训通知、培训课件、培训照片、签到表、效果评价证据能力评估方式

直接观察常规工作过程和程序，包括所有使用的安全操作

直接观察设备维护和功能检查

监控检验结果的记录和报告过程、核查工作记录（实验室原始记录、质控记录、定标记录、试剂、使用记录、仪器保养维护记录、仪器维修记录等）

评估解决问题的技能

使用特殊材料执行一个给定程序（盲样检测、留样再测）人员管理

应建立分子诊断技术人员相关的教育背景、专业资格、培训、经历及能力记录档案，内容包括：a)证书或执照复印件b)教育或以前的工作资料c)职务说明d)继续教育记录e)能力评估等三、实验室设置、设施与环境

普通PCR实验室设置原则上分为四个区：试剂准备区、标本制备区、扩增区、产物分析区•

如使用全自动扩增分析仪，后两区可合并•

如使用核酸提取、扩增和产物分析一体化的全自动分析系统，后三区可合并•

具体实验室分区应根据其所使用的技术平台及检验项目和工作量而定

新一代测序技术实验室设置原则：工作有序、互不干扰、防止污染、报告及时普通PCR实验室产物分析区缓冲区扩增区缓冲区标本制备区

试剂准备区缓冲区缓冲区工作流向注意事项：各区有独立的缓冲区各区都有水池各区有独立的通风系统（建议有窗户的房间为PCR实验室）标本制备区有冲眼器和生物安全柜产前筛查与产前诊断（全基因组低拷贝测序技术）测序区文库扩增与检测区标本与文库制备区试剂准备区缓冲区缓冲区缓冲区缓冲区工作流向

标本与文库制备区：血浆分离、DNA提取、末段修复与纯化、家“A”与纯化、接头连接与纯化

文库扩增与检测区：PCR扩增与纯化、文库浓度检测、pooling

、pooling后文库定量

测序区：测序前准备（乳液PCR及磁珠富集）、测序上机、信息分析、报告审核及发放植入前胚胎遗传学诊断（全基因组低拷贝测序）电泳区缓冲区测序区文库检测区缓冲区扩增一区缓冲区WGA制备区试剂准备区缓冲区缓冲区缓冲区工作流向WGA制备区：全基因组扩增电泳区：DNA检测及结果反馈、DNA打断扩增一区：末端修复及纯化、加“A”与纯化、接头连接与纯化、pooling

、缺口平移文库检测：测序区：扩增前准备（乳液PCR及磁珠富集）、测序仪上机数据分析、报告发放遗传病诊断+肿瘤诊断与治疗（杂交捕获测序技术+Sanger测序验证）电泳区测序区

文库检测区

文库扩增区

杂交铺获区

DNA打断区

标本与文

试剂准备（扩增二区（扩增一区）库制备区区缓冲区缓冲区缓冲区缓冲区缓冲区缓冲区缓冲区缓冲区标本与文库制备区：DNA提取及检测、纯化测OD、末端修复与纯化、加“A”与纯化、Adapter连接与纯化杂交捕获区：Pre-Captured-PCR与纯化

、OD值检测及pooling、杂交、洗脱与纯化文库扩增与检测区：Post-Captured-PCR与纯化、Pooling及文库定量检测测序区：测序前准备（C-Bot制备)、测序仪上机数据分析、结果解读、Sanger验证、报告发放Sanger测序验证标本与文库制备区：DNA提取与检测、目的片段PCR反应准备扩增一区：目的片段扩增与纯化、测序PCR前准备电泳区：电泳扩增二区：测序PCR扩增与纯化测序仪上机、结果分析与解读、报告发放高通量测序实验室设计注意事项

电泳区：DNA提取、DNA纯化后大小检定等步骤需用电泳，单独成区，但不同的检测项目可共用

测序区：应根据使用仪器要求设定温、湿度（一般为恒温恒湿实验室，2小时内温度波动不超过2℃）

分区设置可根据自动化仪器设备做适当区间整合

无创产前筛查实验室，应血浆提取为胎儿微量DNA，为防止污染，不能与其他项目的标本制备区共用

其他：实验室通风、生物安全柜等要求参照普通PCR实验室实验室设置、设施与环境

实验室有足够的空间保证：标本处置符合分析前、后样本分区放置、仪器放置符合维修和操作要求、打印检验报告时交叉污染的控制

标本接收区建议放在四个区域以外的房间

开展基于组织的分子病理项目宜有独立的切片制备和前处理（脱蜡、水化）区域

。脱蜡、水化应在通风设施中进行实验室设置、设施与环境

各工作区域应有明确的标记

进入和使用实验室各区域应有明确的限制和措施，防止患者和其他非相关人员的随意进出

实验室应根据所用仪器和检测过程对环境温、湿度的要求，规定实验室温、湿度允许范围，有效实施监控，并有记录

不同的实验区域应有其各自的清洁用具以防止交叉污染实验室工作要求

进入各工作区域应按照单一方向进行

不同工作区域内的设备、物品不得混用

不同的工作区域宜使用不同的工作服，工作人员离开各工作区域时不得将工作服带出

工作结束后，必须立即对工作区进行消毒。可使用可移动紫外灯在工作完成后调至实验台上60～90cm内照射

实验室的清洁应当按试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区的方向进行

有消毒和清洁相关的记录实验室工作要求

实验室所有操作应符合《实验室生物安全通用要求》

标本处理需在生物安全柜内进行，对具有潜在传染危险性的材料，必须在生物安全柜内开盖

所有经过检测的反应管不得在扩增区打开

凝胶电泳、杂交、测序等应在产物分析区进行，应注意此区扩增产物的污染

实验室应严格管理实验标本，医疗废弃物应按《医疗废弃物管理条例》进行管理四、设备与材料

实验室必须有合适、充分、质量可靠的仪器、设备、试剂、耗材、辅助品，适用于各类型、各种工作量的需求，以保证检验质量

实验室所使用的仪器、商品试剂、耗材、辅助品必须符合国家相关规定仪器：必须三证齐全试剂：必须CFDA批准（高通量测序试点单位可在限定范围内开展LDT，药监认可？）仪器要求

各类仪器设备均有专人保管，制定维护保养计划，比对/校准程序，编制年度校准、检定计划，并有执行记录。••维护保养计划应有维护参数、维护周期，如何维护等（含氯消毒液腐蚀作用应注意，75%乙醇）校准计划中应有校准仪器、校准单位、校准周期、校准参数、校准符合要求的判断标准

维护、比对/校准的频度应参照国家计量部门或制造厂商的要求进行，厂商没有规定的则每年至少进行一次。应有正规的校准报告仪器校准

需对加样系统、温控系统、检测系统进行校准

需校准/检定仪器：扩增仪、杂交仪、生物安全柜、高速冷冻离心机、恒温金属浴、移液器、温度计、温湿度计等，开展分子病理项目需定期对切片机、捞片水浴槽进行校准

有合格的校准或检定报告（保留校准原始记录）关注：校准参数是否齐全、校准量程是否覆盖常用检测量程、校准结果是否符合检测要求校准设备举例校准设备校准周期一年校准单位校准参数判断标准相关标准温控系统(温湿度计、温度计、杂交仪)计量院/比对

温度、湿度（检测过程涉及）加样系统（移液器）1年计量院/通过认

允许误差、测量重复

JJG646-2006性（检测过程涉及常用量程）证的厂家光路部分、背景荧光、检测系统（扩增仪等）1年1年1年厂家/计量院

温控部分（温度准确度、均一性、温度升降速率）产品说明书有资质的第三

高效过滤器完整性、方机构生物安全柜流入气流流速、下降

产品说明书气流流速、气流模式高速冷冻离心机厂家/计量院温度、转速相关标准校准、比对

新购设备在使用前都应校准

内部校准应符合CNAS-CL31《内部校准要求》，人员资质、环境要求、测量不确定度

内部比对记录信息最少应包括：比对设备编号、用于比对设备的校准信息（校准日期、校准有效期、校准单位）、比对时间、标准设备、实测数据、比对设备实测数据、判断标准、结论、比对人、比对日期、

科室负责人。设备出现故障时处理措施

应立即停止使用，并加上明显标识

修复的设备如影响仪器性能，必须经校准、检定（验证）或检测满足要求后方能再次投入使用•••可校准的项目实施校准质控品检测结果在允许范围内与其他仪器的检测结果比较（5个样本，覆盖测量范围，至少4个样本测量结果偏移<±7.5%

）•使用留样再测结果进行判别(5个样本，覆盖测量范围，至少4个样本测量结果偏移<±7.5%

）

实验室应检查由于上述缺陷对以前所进行的检测工作的影响，并记录相关分析、处理意见耗材、试剂要求

检验试剂和一次性耗材有专人保管，应在有效期内使用，并按其规定的保存要求存放

实验室应对关键耗材、不同批号试剂进行验收••外观检查：包装完整性、温度要求、有效期等性能验证：不同批号试剂间的差异、重要耗材的抑制物（如使用不含抑制物免检，但应有注明）a)定性检验试剂：选择阴性和弱阳性的样品，结果符合预期b)定量检验试剂：5个旧批号试剂检测过的样品，覆盖测量区间（包括阴性、临界值、低值、中值和高值），至少4个样品测量结果偏倚<±7.5%，其中阴性和临界值样品必须符合预期）c)耗材的抑制物验收：参照试剂方法和要求五、实验室信息系统

建立信息系统管理制度，制订计算机（办公用除外）和计算机网络使用权限、登陆密码、维护的规定，有计算机安全保密和病毒防范的要求，并定期备份计算机数据，保证信息安全和完整。

包括标本接收、报告发放流程六、分析前质量控制

ISO/IEC

15189对于分析前程序的明确定义：按照时间顺序，从临床医生开出医嘱开始，到分析检验程序时终止的步骤，包括检验申请、患者的准备、原始样品的采集、运送到实验室并在实验室进行传输

这个过程大部分工作都是医生、护士、护工等在实验室以外完成的分析前主要环节

确保患者样品的采集方法正确

在采集过程中确保样品和信息的完整和准确性

在检测前和检测后的样品的运输和储存过程符合规范

患者样品处理（例如核酸提取）符合规范分析前质量要求

实验室应有各类患者准备、标本采集、运送、接收（或拒收）、保存和安全处置的具体要求和操作规程

标本应正确采集并符合检测要求，特别注意分泌物、痰液、肿瘤组织等样品留取的注意事项

标本运送应符合相关时间、温度和生物安全的要求，并进行有效监控

标本接收时有接收时间和状态记录分析前质量要求

标本拒收原因要明确，并有记录

定期分析标本拒收原因，有切实可行的整改措施

基于组织/细胞形态学基础的分子检测项目应由专业人员进行样品质量评估，确认样品是否满足检测要求

标本检测全过程包括核酸提取、扩增、产物分析、保存等应能溯源，分子病理检测项目在检测过程中应以病理号作为原始标本、取材标本（包埋盒）、蜡块或切片的唯一性标识

标本应按相关规定保存，并进行监控和记录影响因素

标本采集时间

标本类型和采集量

标本运输和保存

标本质量的评价标本采集时间

血清（浆）：无特殊要求

用于产前诊断等标本采集时间应遵循相关技术指南要求标本采集类型及采集量

标本类型的选择应考虑到不影响检测结果的准确性以及采集样本的可能风险

标本采集量应根据所测病原体而定，一般来说，如果样本的量对病原体培养够用的话，则其量亦足以用于核酸提取及其后的扩增检测注意：样本采集量需考虑到实验室本身的需求以及复核实验所需量

基于组织/细胞的分子病理项目参照相关诊治指南标本运送

实验室应根据待测靶核酸的特性，对各种临床标本的运送条件（温度、时间）作出相应规定•

靶核酸为DNA的标本，可室温下运送，建议采集后8h内送至实验室•

靶核酸为RNA的标本，10

min可室温运送，如所需时间较长，则应在加冰条件下运送，建议采集后4h内送至实验室•

冰冻组织样本最好保证其在运送过程中不发生融化•

石蜡包埋组织可室温下运送标本保存

靶核酸(尤其是RNA)易受核酸酶的作用而迅速降解，因此标本的保存对于核酸扩增测定的有效性极为重要•

靶核酸为DNA的标本，2-8℃保存72h,靶核酸为RNA的标本应-20℃保存。长期保存均应冻存-70℃•

纯化后的DNA，可在TE缓冲液中2-8℃保存1年

,-20℃可长期保存纯化后的RNA应于TE缓冲液中-70℃保存•

石蜡包埋组织可在2-8℃长期保存标本接收、验收、拒收

接收的标本应收集在原始容器中，不能接受从其他检测如生化、免疫检验等分出来的标本，因其有较大的发生标本间污染的可能性

组织标本应由有经验的工作人员进行病理标本评估，肿瘤细胞所占比例应达到所用检测方法的要求

标本拒收标准：容器破损、量不够、时间不符合要求、重度溶血、重度脂血、评估质量不合格标本七、分析过程质量控制

检验项目开展

检验方法的确认与验证

制定和执行检验项目标准操作规程

建立质量控制程序

检验结果的可比性检验项目开展

临床需求

临床价值

检验周期（TAT）检验方法学验证

应制定方法学验证操作规程，对新开项目或对原有项目的仪器、试剂、方法更新时应进行方法学验证，并满足验证试验的要求并有相应的实验记录•

定性检测项目分析性能验证内容至少应包括：精密度和符合率•

定量检测项目分析性能验证内容至少应包括：精密度、正确度、线性范围、检出限方法学验证注意事项

熟悉验证系统

质控在控，数据才可用

实验方案设计：标本选择（标本数量、浓度、不同基因型）试验周期、比对方法的选择、结果统计和评价实验室应独立完成性能验证试验，充分了解验证系统的检测性能验证的最低要求定量检测

至少应验证精密度、正确度、测量区间（线性）、检出限；⒈

精密度验证

选取2个浓度，其中一个应尽可能选择临床决定水平的浓度。可每天测定3次，连续5天。结果应符合厂商声称的指标。⒉

正确度

可采用下列方式之一a、与参考方法比对b、测定参考物质c、与公认或主流方法比对⒊

测量区间

至少采用厂商声明测量区间内的5个浓度进行检测。⒋

参考范围

至少检测20例表观正常人。检出限定性检测

至少应验证重复性和符合率⒈

重复性

采用弱阳性和阴性样本各一份（阳性样本获取有困难时可使用质控品），每天检测3次，连续测量5天，符合率>90%。⒉

符合率

可采用下列方法之一a、标准血清盘b、临床诊断明确的阴性和阳性样本各10份c、与公认或主流方法比对操作规程

临床实验室开展的每个项目均应有操作规程且现行有效，标准操作规程至少应包含下列内容：（1）项目名称、检验方法名称；（2）方法学原理；（3）试剂品牌、代号、包装规格、内含物；（4）仪器品牌、型号；（5）具体操作步骤（包括主要的仪器测定参数）；（6）质控品使用方法、使用水平和频率、质控规则；（7）操作性能概要，如精密度、正确度、线性范围、可报告范围、灵敏度、特异性、方法的局限性（如干扰物质等）、操作注意事项；（8）参考值或参考范围；（9）临床意义；（10）病人准备、标本要求；（11）参考文献；（12）编写者和日期；（13）科主任对每个项目操作规程的签字认可，确定生效日期。

编写各类仪器设备的操作规程，操作规程中应有仪器使用、维护保养、校准等内容；仪器设备和检验项目的简易操作卡应与正式操作规程保持一致。质控要求

编写室内质控和室间质评的操作规程，以监控和评价分析过程的质量

凡出具临床检测报告的项目均应开展室内质控

凡出具临床检测报告的项目均应参加室间质评室内质控

目的

监测和控制实验室常规工作的精密度，即实验室测定的批内和批间重复性

IQC结果决定了实验室即时测定结果的可靠性和有效性质控品来源及使用

来源:第三方、试剂盒自带、自制

品种：临床标本、人工合成

使用:•

冻干质控品复溶时，要确保所用溶剂的质量、所加溶剂的量要准确、应轻轻摇匀，切忌剧烈振摇•

避免反复冻融

室内质控最好监控核酸提取、扩增、产物分析等标本检测全过程

基于组织的分子病理阴性质控宜能监测包括切片在内的全过程质控品设置、数量

定性检测：每次实验应设置1份阴性、1份弱阳性和/或阳性质控品。如为基因突变、基因多态性或基因型检测，则应包括最能反映检测情况的突变或基因型样品，每批检测的质控品至少应有一种基因突变或基因型，并建议在一定周期内涵盖所有的基因型

定量检测：每次实验室应应使用相应浓度的质控品和1份阴性质控品

弱阳性/阳性质控品作用：监测核酸提取和扩增的有效性

阴性质控品作用：监控核酸提取过程中是否发生污染、试剂是否存在污染质控品位置

室内质控品在扩增仪中的排列顺序：不宜固定位置,尽可能监测每一个孔扩增有效性

板上杂交和膜上斑点印迹杂交的质控：阳性和阴性质控应该在同一板或膜上与病人标本平行进行分析，这可排除不同反应中因使用不同杂交条件所致的对结果的错误解释质控品均值建立

暂定均值的建立：20d内得到20个数值，或至少在5d内，每天不少于4次重复检测获得20个数值。对数据进行离群值检验（剔除超过3s外的数据），计算出均值，作为暂定均值

常规均值的建立：以最初20个数据和三至五个月在控数据汇集的所有数据计算的累积平均数作为质控品有效期内的常规均值，并以此作为以后室内质控图的均值

若使用定值质控品，均值必须在实验室内使用本室现行的检测系统进行确定，质控品说明书上的原有标定值只能作参考常用质控规则的符号、定义及作用符

号定义作用12S一个质控测定值超出±2s控制限一个质控测定值超出±3s控制限警告13S22SR4S随机误差系统误差随机误差两个连续的质控测定值同时超出+2s或－2s控制限x同一批测定中，两个不同浓度质控物的测定值之间的差值超出4s控制限41S四个连续的质控测定值同时超出+1s或－1s控制限系统误差系统误差系统误差7T7个连续的质控测定值同时呈现一个向上或向下的趋势变化10X十个连续的质控测定值同时处于均值的同一侧失控处理

及时查找原因，采取纠正措施

填写失控原因分析报告失控原因分析

阳性质控样本常见的失控原因•

核酸提取中随机误差：如提取过程核酸丢失、有机溶剂去除不彻底、标本中扩增抑制物残留等•

仪器问题：如扩增仪孔间温度不均一性、孔内温度与所示温度不一致性等•

试剂问题：如Taq酶和/或逆转录酶失活、探针纯度标记效率、核酸提取试剂效率等失控原因分析

阴性质控样本常见的失控原因•

标本核酸提取过程中发生的标本间的交叉污染：实验室的以前扩增产物的污染、标本间的交叉污染、强阳性标本气溶胶经加样器导致污染、强阳性标本经操作者手导致污染、

翻盖离心管在较高温度温育时盖子崩开•

扩增产物污染预防措施

避免基因扩增检验假阳性结果的措施•••••严格的实验室分区使用带“滤芯”的吸头使用防“污染”（含UNG）的PCR试剂设立“阴性”质控（与标本同时处理）临床“假阳性”问题：病原微生物如结核杆菌经药物治疗后已死亡，但PCR仍可为阳性，故治疗结束后至少两周内不宜做PCR检测

避免基因扩增检验假阴性结果的措施•避免由于来自于标本的血红蛋白、肝素、某些激素或来自标本处理中的去垢剂、有机溶剂的抑制作用的措施：纯化核酸；标本重复双份测定；稀释标本•定期对扩增仪的温度控制和加热模块中热传导的一致性进行检查和校准操作注意事项

在试剂准备区配置反应混合液，先将dNTP、引物、酶和缓冲液混合后，再分装

配制反应体系时，应注意移液器使用方法，所有液体都要缓慢加至管底，不要加至管壁，所有液体混匀要用振荡器进行，不能用移液器吹打，反应体系配制完毕后低速离心数秒，避免产生气泡

分装的试剂注意冷藏，防止酶试剂失活及有机大分子降解

优先选择含UNG的试剂盒

试剂经充分溶解后混匀，离心后再开盖，保持试剂均匀性

扩增管、样品处理管及吸头等实验用品，均需高压灭菌

标本处理应在标本制备区生物安全柜内进行，实验前应打开风机5-10min，待柜内空气净化并气流稳定后再进行实验操作

为防止标本间交叉污染，在打开离心管前宜短暂离心操作注意事项

弃上清提取方法，离心时应注意离心管方向，吸弃上清时不要碰到沉淀部分，以免造成提取效率降低

标本处理严格按照试剂说明书进行操作，应做到处理时间充分，保证标本中的DNA或RNA完全释放

将提取的核酸加到反应体系中后，应将纯化好的剩余核酸样本冻存，以免在扩增检测时出现意外需要重新检测。在结果确定后再将这些样本按生物污染废弃物进行处理

在判断结果时，应先对扩增的荧光信号作出定性判断，然后再进行定量分析，避免一些非特异荧光信号对结果分析的干扰

扩增后的扩增管不能在扩增及产物分析区打开处理，应用一次性手套包好远离PCR实验室的洗涤间消毒处理

工作结束后，必须立即对各工作区进行清洁PCR质控其它要求

必要时，被检基因组核酸（DNA和/或RNA）浓度应符合制造商规定的要求

实验结果有效性判断标准•

标准曲线平滑均匀，斜率、截距和/或相关系数、内标等参数的数值允许变化范围均应在试剂制造商推荐的范围