紫外可见分光光度法的定性分析

紫外-可见分光光度法的定性分析永州职业技术学院王文渊学习内容Learningcontent定性分析的理论依据1定性鉴别分析方法2纯度检查方法

3定性的理论依据不同的物质其吸收光谱及其特征值不同。吸收光谱的特征值包括：吸收光谱形状，吸收峰（谷）的数目，各吸收峰（谷）所在的波长、强度和对应的吸光系数等。紫外—可见分光光度法的定性分析方法一、定性分析的理论依据吸光度波长λ/nmAB不同物质的吸收光谱图紫外—可见分光光度法的定性分析方法如图，物质A与物质B的吸收光谱及特征值不同，就属于不同的物质。紫外—可见分光光度法的定性分析方法通过比较吸收光谱形状及其特征值可以进行：杂质检查定性鉴别结构分析0.60.40.20.0300400500600波长λ/nm定性分析的应用范围：紫外—可见分光光度法的定性分析方法将待测试样与标准品配成浓度相同或相近的溶液。在相同条件下分别测定试样与标准品的吸收光谱。然后比对两吸收曲线是否一致。1.比吸收光谱曲线的一致性123二、定性分析的分法紫外—可见分光光度法的定性分析方法1.测定吸收曲线2.比对吸收光谱曲线吸光度1.00.80.60.40.20.0300400500600700波长/nm样品样品的吸收光谱图【示例】维生素B2的鉴别两吸收曲线基本一致，即可初步判断是同一物质。3.判断吸光度1.00.80.60.40.20.0300400500600700波长/nm标准品维生素B2标准品的吸收光谱图紫外—可见分光光度法的定性分析方法【示例】维生素B2的鉴别吸光度1.00.80.60.40.20.0300400500600700波长/nm吸光度1.00.80.60.40.20.0300400500600700波长/nm样品标准品样品的吸收光谱图（1）测定吸收曲线（2）比对吸收光谱曲线（3）判断

两吸收曲线基本一致，即可初步判断是同一物质。维生素B2标准品与样品的吸收光谱比较图维生素B2标准品的吸收光谱图吸光度1.00.80.60.40.20.0300400500600700波长/nm标准品吸光度1.00.80.60.40.20.0300400500600700波长/nm样品

两吸收曲线基本一致，即可初步判断是同一物质。样品的吸收曲线图紫外—可见分光光度法的定性分析方法【示例】维生素B2的鉴别样品（1）测定吸收曲线（2）比对吸收光谱曲线（3）判断维生素B2标准品与样品的吸收光谱比较图维生素B2标准品的吸收光谱图紫外—可见分光光度法的定性分析方法吸光度波长λ/nmλmax将测得的样品λmax和值与文献收载的规定值比较即可鉴别。定性鉴别的主要特征数据包括：最大吸收波长最大吸收波长处的吸光系数2.对比吸收光谱特征数据的一致性最小吸收波长紫外—可见分光光度法的定性分析方法M=298.43λmax=240±1nm=571M=386.53λmax=240±1nm=408因此，对比吸收光谱特征数据时，必须同时比对最大吸收波长和最大吸收波长处的吸光系数是否一致。黄体酮炔诺酮λmax相同，但

不同不同的物质可能具有相同的λmax，但因分子量不同，则其λmax处的吸光系数必定不同，如黄体酮和炔诺酮的鉴别。紫外—可见分光光度法的定性分析方法不同的物质可能具有相同的光谱特征数据，但因结构不同，吸收曲线必定不一样。吸光度B220260300340波长λ（nm）醋酸可的松λmax=240nm，

吸收光谱曲线形状存在明显差异λmax=240nm，

220260300340波长λ（nm）吸光度醋酸氢化可的松光谱特征数据几乎完全相同紫外—可见分光光度法的定性分析方法

如维生素B12的鉴别《中国药典》(2015版)规定：维生素B12的λmax=278nm、361nm和550nm，且A361/A278=1.70～1.88；A361/A550=3.15～3.45。278.22nm361.72nm550.33nm维生素B12的吸收光谱图

吸光度300400500600波长（nm）对于有多个吸收峰的化合物，比较各吸收峰处对应的吸光度（或吸光系数）比值可用于鉴别。3.对比吸度比值的一致性紫外—可见分光光度法的定性分析方法甲氧苄啶标准品吸收光谱吸光度300400波长λ/nm吸光度300400波长λ/nm药品甲氧苄啶吸收光谱三、纯度检查如，药品甲氧苄啶的纯度检查药品与杂质只要存在紫外吸收的差异，药品中存在的杂质会使药品的吸收曲线变形，即可进行纯度或杂质检查。紫外—可见分光光度法的定性分析方法1.杂质判断

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若药品与杂质的吸收峰位不重叠，则药品中的杂质会使药品的吸收曲线变形。如苯中杂质苯酚的检查：

苯在256nm处有强吸收，而苯酚在此处无吸收，却在328nm处有强吸收。故从光谱曲线中可以看出苯中是否存在杂质苯酚。样品与标准品的吸收光谱曲线吸光度样品苯的吸收光谱苯标准品吸收光谱300400波长λ/nm紫外—可见分光光度法的定性分析方法■若药品与杂质的吸收峰位重叠，杂质的存在会使吸收峰处的吸光系数改变。峰位处的吸光系数值变小图1.杂质吸收强于化合物吸光系数300400波长λ/nm药品图谱标准品图谱图2.杂质吸收弱于化合物300400波长λ/nm吸光系数药品图谱标准品图谱峰位处的吸光系数值变大《中国药典》（2015年版）规定：取每1ml含2mg的供试品溶液，于1cm吸收池在310nm处测定吸光度不得超过0.05。如：肾上腺素中杂质肾上腺酮的检查吸光度300400波长λ/nm肾上腺素肾上腺素酮肾上腺素与