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文档简介

临床检验基础技术化学检验职业教育医学检验技术专业教学资源库目录CONTENTⅠ尿蛋白质定性检查Ⅱ尿葡萄糖定性检查尿酮体Ⅲ尿血红蛋白检测Ⅵ尿胆红素和尿胆原定性检查Ⅳ尿亚硝酸盐Ⅴ目录CONTENTⅦ尿pHⅧ尿人促绒毛激素的测定尿本周蛋白定性测定Ⅸ尿肌红蛋白Ⅻ乳糜尿定性检查Ⅹ尿含铁血黄素定性检查Ⅺ尿蛋白定性检查职业教育医学检验技术专业教学资源库蛋白质检测是尿液化学成分检验中的最重要的项目之一正常情况下,有肾小球滤过膜的存在,血液中的大分子量的蛋白质不能滤出,小分子量蛋白质虽可以滤出,但在肾小管处几乎全被重吸收排出量极少,常规化学定性阴性。当尿蛋白排出量>150mg/24小时、或尿中蛋白浓度>100mg/L时,常规化学定性检查呈阳性,称为蛋白尿概述01尿液中的蛋白质的定性检测的方法1、加热乙酸法1.原理加热可使蛋白质变性凝固,稀乙酸接近蛋白质等电点,促使蛋白质沉淀,并溶解碱性盐类结晶2.试剂5%乙酸溶液3.操作方法尿液5ml→加热标本上1/3处至沸腾→观查结果→加乙酸→观查结果→继续加热至沸腾→立即观察结果临检实操有拍摄01尿液中的蛋白质的定性检测的方法2、磺基水杨酸法1.原理磺基水杨酸为生物碱试剂,在酸性环境下,磺酸根离子与蛋白质的氮末端阳离子结合,生成不溶性蛋白盐沉淀2.试剂200g/L磺基水杨酸溶液3.操作方法尿液1ml→磺基水杨酸试剂1~2滴→立即观察结果临检实操有拍摄01尿液中的蛋白质的定性检测的方法3、干化学试带法利用指示剂的蛋白质误差原理。在pH3.2时,溴酚蓝产生阴离子,蛋白质(清蛋白)产生阳离子,二者结合后发生颜色变化,由淡黄色渐呈绿色乃至蓝色。02那如何来保证检测结果的准确性呢?(1)待检者:检查前应清洁尿道口,采集中段尿。防治混入某些分泌

物或较多的细胞成分而引起假阳性(2)标本:①标本应新鲜,浑浊尿应离心后测定上清液(3)加热:在试管尿液中上1/3段尿液加热(4)药物:药物的使用可出现假阴性或假阳性结果但是各种方法的敏感度有所不同蛋白质定性方法学评价阳性标准及敏感度蛋白质含量(g/L)加热乙酸法磺基水杨酸法干化学试带法-<0.1<0.05<0.1±0.1~0.150.05~0.10.1~0.31+0.2~0.50.1~0.50.3~1.02+0.6~2.00.5~2.01.0~3.03+2.0~5.02.0~5.03.0~8.04+>5.0>5.0>8.0评价准确,可与尿中所有蛋白质反应,假阳性少。通常作为蛋白质的确证实验,但操作比较复杂操作简便,敏感性高。清蛋白、球蛋白、本周蛋白均可检出,简便、快速,曾为CCCLS推荐位参考方法。干扰因素多,有些药物及盐类结晶可致假阳性简便、快速,广泛用于健康普查和肾病筛查,但结果受尿液pH影响。对清蛋白敏感度高,对球蛋白灵敏度仅为清蛋白的1∕100~1∕50,与血红蛋白、肌红蛋白、黏蛋白、Tamm-Horsfall蛋白(T-H蛋白)及本-周蛋白等基本不反应*03那么尿液蛋白质的检测的临床意义是什么呢?1、生理性蛋白尿功能性蛋白尿:指由于发热、剧烈运动、精神紧张等应激状态导致的蛋白尿体位性蛋白尿:又称直立性蛋白尿。多见于瘦长体型的青少年。受试者在卧床休息时蛋白定性阴性;而站立活动时,则出现蛋白尿,无自觉症状。03那么尿液蛋白质的检测的临床意义是什么呢?2、病理性蛋白尿根据其发生机制可分为六类:肾小球性蛋白尿:某些因素导致肾小球滤过膜通透性增加,导致血浆蛋白滤出,超过肾小管重吸收能力,形成的蛋白尿。以清蛋白为主。见于急性肾小球肾炎,肾病综合征、紫癜性肾病等肾小管性蛋白尿:炎症或中毒引起肾小管对蛋白质的重吸收能力降低而导致的蛋白尿,见于肾盂肾炎、间质性肾炎和肾小管性酸中毒等混合性蛋白尿:肾脏病变相继累及肾小球和肾小管产生的蛋白尿。常见于慢性肾炎、慢性肾盂肾炎等03那么尿液蛋白质的检测的临床意义是什么呢?2、病理性蛋白尿根据其发生机制可分为六类:组织性蛋白尿:由于炎症或药物刺激,肾组织破坏、泌尿系统分泌蛋白质,进入尿液而形成的蛋白尿。其中T-H糖蛋白为主。溢出性蛋白尿:循环血浆中某些低分子量蛋白质增多,超过肾小管重吸收能力所致。如血红蛋白尿、肌红蛋白尿等偶然性蛋白尿:也称假性蛋白尿。当尿中混有多量血、脓、黏液等成分时,可导致蛋白质定性检查阳性,称假性蛋白尿。可提示下尿路及生殖道炎症尿葡萄糖定性检查职业教育医学检验技术专业教学资源库血液中的葡萄糖经肾小球全部滤过后,在肾小管几乎全被重吸收,因此尿液中的葡萄糖含量极少,常规定性检查为阴性当血浆葡萄糖含量超过肾糖阈(>8.88mmol/L)或肾小管重吸收能力下降时,尿糖定性为阳性,称为糖尿。概述尿糖检测的方法1、班氏法1.原理葡萄糖的还原性醛基在热碱性条件下,将蓝色硫酸铜还原为氧化亚铜,进而生成红色的氢氧化亚铜沉淀。2.试剂班氏试剂3.简要操作班氏试剂2ml→加热至沸腾→加尿液0.2ml→煮沸→冷却→判读结果。尿糖检测的方法2、干化学试带法1、原理采用葡糖糖氧化酶法,葡萄糖氧化酶特异与尿液中葡萄糖产生氧化还原反应,生成的H2O2可催化色原邻甲苯胺(或碘化钾)显色。尿糖检测的方法(1)患者:VitC会使萄糖定性出现假阳性。(2)容器:不含氧化性物质(3)标本留取与送检:根据临床需要留取清晨空腹尿或餐后2小时尿,

不宜长时间存放,以免细菌繁殖造成假阴性结果。(4)判断结果:需待反应物自然冷却后观察。班氏法和试带法尿糖定性方法学比较敏感度及检测范围葡萄糖含量(mmol/L)班氏法葡萄糖氧化酶试带法-<5.5<1.67±5.6~11.21.67~2.781+<285.0~142+28~5614~283+57~11228~564+>11256~112评价优点:稳定性好缺点:特异性差,假阳性率高(大剂量VitC、肌酐、尿酸、其他还原性糖)。逐渐被葡萄糖氧化酶试带法取代优点:较班氏法敏感、简便、快速、特异性高、可半定量。可目测,也可上机检测。极少出现假阳性缺点:易出现假阴性,如;含VitC氧化剂的试带可帮助排除这一干扰;高浓度酮体、高比重尿均可降低试带的敏感性1、血糖增高性糖尿糖尿病:由于患者胰岛素水平降低或机体对胰岛素敏感性下降所致,是筛查糖尿病的重要依据。糖尿病并发肾损害者肾阈升高,常导致血糖升高与尿糖阳性程度不平行,须依据血糖水平及糖耐量检查等结果指导临床合理用药其他内分泌性疾病:甲状腺功能亢进、库欣综合征等应激状态:颅脑损伤、脑血管意外、突然情绪紧张或激动可使血糖一过性升高饮食因素:健康人一次性摄入大量糖或含糖食物,也可使血糖暂时性增加2、血糖正常性糖尿

血糖正常,但肾小管对葡萄糖吸收功能减退、即肾糖阈降低所致的糖尿,也称为肾性糖尿。见于慢性肾小球肾炎、肾病综合征等。妊娠晚期,尿中也可出现葡萄糖,与糖尿病鉴别的要点是前者口服葡萄糖耐量正常。3、其他糖尿

尿中除葡萄糖外还可出现乳糖、半乳糖、果糖、戊糖等,哺乳期妇女、肝功能障碍可发生果糖尿、乳糖尿或半乳糖尿;某些遗传代谢性疾病如半乳糖血症、糖原贮积症、粘多糖沉积病和果糖尿症等也会在尿中出现相应的还原性糖尿酮体职业教育医学检验技术专业教学资源库酮体是脂肪代谢的中间产物,包括乙酰乙酸、β-羟丁酸和丙酮。在正常生理状态下,肝脏合成的酮体大部分被其他组织利用,血浆中含量仅为2.0~4.0mg∕L,常规化学定性方法测不出。当体内脂肪代谢加速,生成的大量酮体便在血中蓄积称为酮血症,从尿中排出形成酮尿概述01改良Rothea法又称酮体粉法酮体粉剂含亚硝基铁氢化钠、无水碳酸钠和硫酸铵。亚硝基铁氰化钠在碱性条件下与乙酰乙酸或丙酮生成紫红色化合物。检测时只需将尿液滴入酮体粉试剂中即可观察反应。02干化学试带法原理采用亚硝基铁氰化钠法,在碱性条件下,亚硝基铁氰化钠与乙酰乙酸或丙酮生成紫红色化合物。03质量保证标本要新鲜大量细菌繁殖将使乙酰乙酸转变为丙酮,丙酮挥发会造成假阴性。假阳性分析高色素尿、尿中存在大量肌酐、肌酸、酚酞、苯丙酮、左旋多巴代谢物等,可导致尿酮体定性假阳性。总结1.糖尿病症酸中毒酮尿是糖尿病性昏迷的前期指标,多伴有高血糖和糖尿。但若患者正在接受双胍类降糖药如降糖灵等药物治疗会出现血糖、尿糖正常,而尿酮体阳性的情况。2.饥饿、过分节食、长时间空腹运动等尿酮体阳性;妊娠妇女可因严重妊娠反应、重症子痫出现酮尿;酒精性肝炎、肝硬化也可出现酮尿。尿胆红素和尿胆原定性检查职业教育医学检验技术专业教学资源库胆红素主要有非结合胆红素(UCB)和结合胆红素(CB)。由于UCB不能透过肾小球滤过率,而正常人血中的CB含量很低,故尿中不能检出胆红素;当血CB增高,超过肾阈值时,CB即从尿中排出,称为胆红素尿。概述01尿胆红素1、Harrison法原理:氯化钡与尿中硫酸根形成硫酸钡沉淀,在酸性环境中被三氯化铁氧化为胆绿素、胆青素、胆黄素,前两者显绿色。

操作:(1)加尿液(2)加氯化钡(3)离心,倒掉上清液,留取沉淀(4)加三氯化铁和三氯乙酸(5)观察结果01尿胆红素2、干化学试带法原理:采用偶氮法,在强酸介质中,胆红素与重氮盐发生偶联反应,生成红色化合物。01尿胆红素3、质量保证待检者:服用大量牛黄、熊胆粉和水杨酸后,药物与试剂产生

紫红色反应,干扰Harrison法的结果观察标本:新鲜、避光:防止胆红素被氧化造成假阴性VitC:含量>0.5g/L时,能抑制偶氮反应而使试带法为假阴性尿路感染的某些细菌产生亚硝酸盐,能抑制偶氮反应而使试带法为假阴性01尿胆红素1.Harrison法敏感度高、准确性高,可作为胆红素的验证试验,但操作较为复杂2.干化学试带法本法敏感度不高、但操作简便、快速,具有半定量作用,已在临床广泛应用总结02尿胆原胆红素胆管肠道生成尿胆原大部分经肠肝循环由尿道排出一部分随粪便排出一部分进入血液胆红素经胆管排泄至肠道后,在肠道细菌作用下生成尿胆原,其中大部分又经肠肝循环被肝细胞摄取转化成胆红素当尿胆原生成增加,或肝细胞摄取、转化尿胆原的能力下降时,尿中尿胆原排出增加。当胆管阻塞,胆红素不能排出尿道,则尿中尿胆原减少甚至为阴性。02尿胆原原理尿胆原在酸性环境中与对二甲氨基苯甲醛反应生成樱红色化合物。试剂Ehrlich试剂和无水氯化钙。简要操作加尿液→加氯化钙→离心留取上清液→加Ehrlich试剂→观察尿液颜色1、改良Ehrlich法02尿胆原1.醛反应试带法试带成分、作用及测定原理同Ehrlich法。2.偶氮反应试剂带法原理:采用偶氮法,在强酸性条件下,对-四氧基苯重氮四氟化硼与尿胆原发生偶联反应,使试带变为胭脂红色。2、干化学试带法02尿胆原(1)待检者:①尿胆原含量在午后2~4小时达到最高峰,留取午餐后2~4小时尿可提高检出率。②服用磺胺、PAS者会影响检查结果③VitC、可使尿胆原定性假阴性,需加做尿胆素定性试验给予验证。(2)标本:

新鲜、避光保存,防止尿胆原氧化为尿胆素将出现假阴性。3、质量保证02尿胆原不同黄疸类型的鉴别诊断标本指标正常人溶血性黄疸肝细胞性黄疸阻塞性黄疸尿液颜色浅黄深黄深黄深黄胆红素阴性阴性阳性阳性尿胆原1:20阴性强阳性阳性阴性粪便颜色黄褐深色黄褐或变浅变浅或白陶土色粪胆素正常增高减低/正常减低/消失尿液亚硝酸盐定性检查职业教育医学检验技术专业教学资源库亚硝酸盐定性检查尿中有病原微生物增殖,且尿液在膀胱中存留足够长时间,某些含有亚硝酸盐还原酶的细菌可将尿中的硝酸盐还原为亚硝酸盐(NIT)最常见的有:大肠埃希菌属、克雷白杆菌属、变形杆菌、葡萄球菌属、假单孢菌属等。因此,亚硝酸盐定性试验可作为泌尿系感染的筛选指标之一。亚硝酸盐定性检查干化学试带法原理:采用Griess法,NIT先与对氨基苯磺酸或氨基苯磺酸酰胺反应生成重氮盐,再与α-萘胺结合形成红色偶氮化合物NIT阳性取决于三个条件:①尿液中存在硝酸盐②感染的病原微生物能产生亚硝酸盐还原酶③尿液在膀胱内停留4h以上亚硝酸盐定性检查健康人尿液亚硝酸盐检测为阴性。干化学法简便、快速,可以自动化,敏感度为0.3~0.6mg/L,有假阳性和假阴性。但确证试验为仍尿细菌培养。尿液中亚硝酸盐主要来源于正常饮食、体内蛋白质代谢或由氨内源性合成,不能正常饮食的患者,体内缺乏硝酸盐,即使有细菌感染,也可出现阴性。大剂量VitC可使反应而呈假阴性;液在膀胱需要停留足够长的时间(4小时),因此宜使用晨尿标本;该指标可作为泌尿系统感染的过筛试验。血红蛋白职业教育医学检验技术专业教学资源库血红蛋白血红蛋白(Hb)为含血色素的色素蛋白。正常人血浆中含有微量血红蛋白(20-40mg/L),与结合珠蛋白形成Hb-Hp复合物,不能从尿中排出,化学定性为阴性。尿中血红蛋白来源有两个,其一为血管内溶血时,红细胞破坏,血红蛋白释放入血浆,当游离血红蛋白超过了珠蛋白结合能力,则由肾小球滤过,随尿液排出;即为血红蛋白尿另一来源为上尿路出血,红细胞在低渗、高渗或酸性环境中溶血。尿中血红蛋白含量较少时,肉眼看不出颜色变化,但隐血试验为阳性。血红蛋白1湿化学法采用过氧化物酶法血红素具有过氧化物酶活性,能催化过氧化氢作为电子受体使色原氧化呈色,借以识别微量血红蛋白的存在,其呈色深浅与血红蛋白含量成正比使用试剂为邻联甲苯胺和过氧化氢。该法操作简单取小试管→加尿液→加邻联甲苯胺试剂→加过氧化氢→观察颜色变化即可2干化学试带法其原理同湿化学法,按说明书操作即可。现在我们分别来学习一下血红蛋白3、免疫法利用胶体金标记法的抗人Hb单克隆抗体检测,特制的乙酸纤维膜上均匀分布的胶体金标记羊抗人Hb单克隆抗体和胶体金标记鼠IgG,膜的上端由上至下依次包被羊抗鼠IgG抗体和羊抗人Hb多抗。检测时把试纸条侵入尿液标本中,尿液通过层析作用,沿着试纸条上升,如果尿液中含有Hb,在上行过程中与金标记羊抗人Hb单克隆抗体结合,行至羊抗人Hb多抗体线时,形成金标记的抗人Hb单抗_尿Hb-羊抗人Hb多抗复合物,在纸条上显现一条紫红色线,即为隐靴实验阳性,试带上金标记鼠IgG随尿液上行至羊抗鼠IgG处,与之形成另一条紫红色的线,为试剂质控线。即是,隐血实验阳性时试带出现2条紫红色线,如果只出现一条紫红色线为阴性结果,无紫红色线出现即说明试带失效。现在我们分别来学习一下血红蛋白现在我们分别来学习一下血红蛋白三种方法相比较1、干(湿)化学法简便、快速,敏感度高。但尿液被细菌,氧化剂、

铁剂污染或尿路感染时,可致结果呈假阳性;大剂量VitC也可使反应呈假阴性。2、抗人血红蛋白单克隆抗体法简便、快速、敏感度更高与干扰因素少,特异性强。既适用于检查尿隐血,也适用于粪便隐血。缺点是如果尿液标本中游离血红蛋白过高,可因抗原过剩而出现假阴性。血红蛋白因此在进行检测时我们要进行质量控制患者检测前如大剂量输注VitC,5小时内最好不做隐血检查。防止产生假阴性。标本要求新鲜、及时测定,长时间放置可因细菌繁殖造成假阳器材清洁、干燥,防止被血、脓、铁剂、硝等物质污染,而产生阳性。综合分析结果血尿、肌红蛋白尿也呈阳性反应,尤其是泌尿系统疾病引起的血尿,可使试带法出现阳性,但阳性程度与显微镜下红细胞数量并不成正比,此时应综合判断。血红蛋白因此在进行检测时我们要进行质量控制正常人的尿液血红蛋白定性试验结果为阴性因此尿液血红蛋白定性通常用于通常用于:1.辅助诊断泌尿系统疾病血红蛋白主要存在于红细胞内,因而泌尿系统疾病引起出血都可导致隐血试验阳性,尤其是隐匿性肾炎,当尿中仅有的少量红细胞破坏时,可能表现为查到的红细胞数与隐血试验结果不一致,应注意分析。2.辅助诊断血管内溶血性疾病阵发性睡眠性血红蛋白尿、阵发性寒冷性血红蛋白尿、行军性血红蛋白尿、自身免疫性溶血性贫血、血型不合输血者,均可能出现尿隐血试验阳性。尿PH检测职业教育医学检验技术专业教学资源库尿pH检测肾是调节酸碱平衡的重要器官,尿液pH取决于尿中酸性磷酸盐和碱性磷酸盐的相对含量,受饮食、运动、药物和疾病种类影响较大。测定尿液酸度可间接反映肾小管的功能。尿pH检测干化学法试带法采用双指示剂法,溴麝香草酚蓝检测范围为pH6.0~7.6;甲基红检测范围为pH4.6~6.2。与待测标本接触后,试带变色范围为橙红(pH4.5)-黄绿色(pH7.0)-蓝色(pH9.0)。检测结果多由仪器判读,也可肉眼目测,对照标准色板进行判断。简要操作试带浸入尿中一定时间→取出读取结果干化学法,操作简便、快速,已成为常规检查方法尿pH检测随机尿pH最大范围为4.6~8.0,多数尿在5.5~6.5。尿pH降低:见于代谢性酸中毒、低钾代谢性碱中毒、痛风、糖尿病等尿pH增高:见于碱中毒、肾小管酸中毒等也可以用于泌尿系感染的辅助诊断和判断泌尿系统结石种类及指导临床用药尿人促毛激素的鉴定职业教育医学检验技术专业教学资源库概述早期妊娠诊断正常妊娠期间,尿液hCG定性检查持续阳性,血清水平略高于尿液,产后5~6天阴性。滋养层细胞肿瘤诊断及预后判断葡萄胎、恶性葡萄胎、绒毛膜上皮细胞癌及男性患睾丸畸胎瘤患者,尿中hCG水平明显高于正常妊娠孕妇。概述HCGα多肽链β多肽链HCG所特有,无相似物与黄体生成素LH、促卵泡生成素FSH、促甲状腺素TSH的α链相似临床上通过检测β-HCG来反应HCG的变化01原理试带浸入尿液一定时间后,通过层析作用,尿中hCG先与鼠抗人β-hCG单抗结合,移行至检测区,被羊抗人hCG抗体捕获,形成金标记鼠抗人β-hCG单抗-β-hCG-羊抗人hCG多抗复合物,局部出现紫红色区带。同时金标记鼠IgG随尿上行至质控区,被羊抗鼠IgG抗体捕获,形成金标记鼠IgG抗原-羊抗鼠IgG抗体复合物,出现紫红色区带。02试剂带

试剂带依次由胶体金颗粒标记区、检测区和质控区组成。①胶体金颗粒标记区:位于试带的标本接触端。均匀吸附了胶体金标记的鼠抗人β-hCG单克隆抗体和胶体金标记的鼠IgG,呈紫红色。鼠抗人β-hCG单抗可与尿液中人hCG特异性结合,形成人hCG—鼠抗人β-hCG单抗复合物。②检测区:位于质控区下方。包被有羊抗人hCG多克隆抗体,可捕获人hCG—鼠抗人hCG单抗复合物。③质控区:位于试带手柄端,并与检测区平行排列。包被羊抗鼠IgG抗体,可捕获鼠IgG。03简要操作

将试带的箭头端浸入尿液一定时间→取出平放→观察结果。判断标准:出现两条红色区带为hCG阳性;仅质控带红色为阴性;不出现红色区带表明试剂失效。04质量保证1.宜采集晨尿标本;留尿前不要大量饮水以免稀释,标本要新鲜。2.不能使用严重蛋白尿、血尿、菌尿标本进行hCG检测。3.操作时注意试纸带浸入尿液时,液面要低于两抗体检测线。同时加做阴、阳性对照,并做原浓度和2倍稀释的尿液测定,均为阳性才可做出判断。04质量保证方法灵敏度(IU/L)临床应用价值胶体金标免疫法10~25操作简便,灵敏度高、特异性强,半定量。受精后7~10d即可作出诊断,广泛应用酶联免疫法20~50繁琐、需时长,灵敏度高、特异性强,适合批量检验电化学法<0.1简便、快速、灵敏度高、特异性强,定量。多用于血液hCG测定放免法<2灵敏度高、特异性强,稳定,准确;环境污染,需时长;临床应用少,主要用于医学研究胶乳凝集抑制试验100~500简便,快速、经济。但灵敏度低,目前已少用04质量保证1.早期妊娠诊断正常妊娠期间,尿液hCG定性检查持续阳性,血清水平略高于尿液,产后5~6天阴性。2.滋养层细胞肿瘤诊断及预后判断葡萄胎、恶性葡萄胎、绒毛膜上皮细胞癌及男性患睾丸畸胎瘤患者,尿中hCG水平明显高于正常妊娠孕妇。3.协助诊断异位妊娠及流产①异位妊娠也称“宫外孕”,在宫外孕流产或破裂前,hCG低于正常妊娠,临床检查时应选择特异性强、灵敏度高的方法,宫外孕流产或破裂后大部分转阴,此方法有助于和其它急腹症相鉴别②不完全流产患者妊娠试验仍可为阳性。完全流产或死胎,由阳性转为阴性尿本周蛋白定性测定职业教育医学检验技术专业教学资源库概述本周蛋白又称凝溶蛋白,其特点为:在pH4.5~5.5时,加热至40~60℃时沉淀,继续加热至90~100℃时沉淀溶解,而温度下降到56℃时恢复凝固,因此又称凝-溶蛋白。血液中的本周蛋白能自由通过肾小球滤过膜,当浓度增高超过肾小管重吸收阈值时,可从尿中排出本周蛋白乙酸纤维膜电泳可出现“M”带,多位于α2和γ区带之间。01热沉淀法→56℃水浴15分钟→取沉淀沸水浴3分钟→尿液变清为阳性→如沉淀加重→过滤原理BJP在pH4.5~5.5条件下,加热至56℃时沉淀,继续加热至90~100℃时沉淀消失,当温度恢复为56℃左右时又变混浊。据此可初步验证其存在。试剂成分及作用①200g/L磺基水杨酸:用于蛋白质定性。②2mol/L乙酸缓冲液和晶体氯化钠:用于沉淀其他黏蛋白。简要操作离心尿上清液→蛋白质定性→除去黏蛋白→冷却至56℃→滤液浑浊为阳性。

临检实操有拍摄02对-甲苯磺酸法1、原理对-甲苯磺酸能沉淀分子量较小的本周蛋白,而对分子量较大的清蛋白和球蛋白不起反应。2、试剂成分及作用①120g/L对-甲苯磺酸溶液:使BJP沉淀。②冰乙酸:设置阴性对照用。3、简要操作离心尿上清液→加对-甲苯磺酸→静置→浑浊加重或沉淀→阳性。03蛋白电泳分离法1、原理尿液蛋白在载体上经电泳,BJP可在α2至γ球蛋白区带间出现“M”带。04质量保证(1)患者:部分患者在使用某些药物如利福平类抗结核药时可出现本周蛋白尿(2)标本:①标本要新鲜、足量,及时送检②混浊尿应离心取上清液③若为蛋白尿,应先用加热乙酸法沉淀普通蛋白质,趁热过滤。(3)pH:最适pH为4.5~5.5方法评价热沉淀-溶解法灵敏度低(0.3~2.0g/L),假阴性率高,所需标本量大,已较少使用对-甲苯磺酸法操作简便,为灵敏度较高(BJP3mg/L)的筛检试验。不与尿液清蛋白反应。尿液球蛋白>5g/L时,可出现假阳性蛋白电泳分离法对BJP的阳性检出率可高达97%免疫电泳简单易行、标本用量少,在抗原抗体最适比例时,分辨率高、特异性强免疫固定电泳用特异抗体鉴别区带电泳分离的蛋白,比区带电泳和免疫电泳更灵敏免疫速率散射浊度法在抗原-抗体反应的最高峰测定其复合物形成量,能定量检测κ、λ轻链,检测速度快、灵敏度和精确度高、稳定性好04质量保证尿本周蛋白阳性浆细胞病中约50%的多发性骨髓瘤及15%的巨球蛋白血症出现本周蛋白尿,为重要诊断依据之一。另外,慢性淋巴细胞性白血病、淋巴肉瘤及肾淀粉样变患者也可出现本周蛋白尿。M蛋白多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、淋巴瘤患者,血或尿中可出现M蛋白,因此M蛋白尤其对于多发性骨髓瘤诊断有重要的临床意义。乳糜定性检查职业教育医学检验技术专业教学资源库乳糜定性检查脂肪在肠道吸收后皂化形成乳糜液,正常情况下乳糜液进入肠道淋巴管,参与淋巴循环。若乳糜液没引流入血,而是逆行至泌尿系统淋巴管,引起该处淋巴管内压力增高、曲张破裂进入尿液,形成乳糜尿。乳糜尿的程度与患者摄入脂肪量、淋巴管破裂程度和运动强度等有关。内含脂肪微粒、卵磷脂、胆固醇、少量纤维蛋白原和清蛋白乳糜定性检查乳糜尿的程度与患者摄入脂肪量、淋巴管破裂程度和运动强度等有关。根据脂肪的特性,实验室检测乳糜尿的检测方法为有机溶剂萃取染色法有机溶剂萃取染色法糜尿中的乳糜微粒或脂肪小滴溶解于脂溶性有机溶剂,乙醚提取物可被脂溶性染料(苏丹Ⅲ)染成橘红色乳糜定性检查(二)质量保证在进行检测时要注意区分,乳糜尿与过多的盐类结晶尿及脓尿在外观上容易混淆,定性检查阳性,应在显微镜下查找微丝蚴乳糜定性检查正常人的尿液是不会出现乳糜尿的乳糜尿阳性常见于:1.累及淋巴循环的疾病如先天性淋巴管畸形、肿瘤压迫、腹腔结核等导致腹腔淋巴管或胸导管阻塞。2.丝虫病丝虫在淋巴系统中引起

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