微生物的生长繁殖及其控制

微生物的生长繁殖及其控制微生物的生长繁殖及其控制第1页5.1微生物生长繁殖5.1.1微生物生长繁殖概念生长——微生物细胞吸收营养物质，进行新陈代谢，当同化作用>异化作用时，生命个体重量和体积不停增大过程。繁殖——生命个体生长到一定阶段，经过特定方式产生新生命个体，即引发生命个体数量增加生物学过程。发育——从生长到繁殖，是生物结构和机能从简单到复杂、从量变到质变发展改变过程，这一过程称为发育。个体生长——微生物细胞个体吸收营养物质，进行新陈代谢，原生质与细胞组分增加为个体生长。群体生长——群体中个体数目标增加。能够用重量、体积、密度或浓度来衡量。微生物的生长繁殖及其控制第2页1.单细胞微生物生长繁殖生长：同化作用大于异化作用，细胞不停增加。繁殖：单细胞个体生长到一定程度时，一个亲代细胞分裂为两个大小、性状与亲代细胞相同子代细胞，使得个体数目增加。世代时间：细菌两次细胞分裂之间时间。2.多细胞微生物生长繁殖生长：细胞数目增加，个体数目不增加。繁殖：细胞数目增加，个体数目也增加。微生物的生长繁殖及其控制第3页5.1.2研究微生物生长方法(一)分批培养(batchculture)1.概念：分批培养是将一定量微生物接种在一个封闭、盛有一定量液体培养基容器内，保持一定温度、pH和DO，微生物在其中生长繁殖。培养基一次性加入，不更换。2.细菌生长曲线以培养时间为横坐标，以计数取得细菌数目标对数为纵坐标，可得到一条定量描述液体培养基中微生物生长规律试验曲线，该曲线则称为生长曲线。（growthcurve)。微生物的生长繁殖及其控制第4页生长曲线制作将少许单细胞纯培养，接种到一恒定容积新鲜液体培养基中，在适宜条件下培养，每隔一定时间取样，测细菌细胞数目。以培养时间为横坐标，以细菌增加数目对数为纵坐标，绘制所得曲线。微生物的生长繁殖及其控制第5页微生物的生长繁殖及其控制第6页其它名称：迟滞期、调整期、适应期1.现象：活菌数几乎没增加，曲线平行于横轴。2.特点：初始阶段：细菌要适应新环境，细菌总数有所降低末期：生长繁殖速度加紧，细菌总数有所增加细胞内RNA尤其是rRNA含量增高，原生质嗜碱性增强合成代谢活跃(核糖体、酶类、ATP合成加紧),开始细胞分裂对外界不良条件敏感,(如氯化钠浓度、温度、抗生素等化学药品)3.原因：适应新环境条件，合成新酶，积累必要中间产物①.停滞期（lagphase）微生物的生长繁殖及其控制第7页◆接种群体菌龄：用对数生长久菌种接种时，其停滞期较短，甚至检验不到停滞期◆接种量：普通来说，接种量增大可缩短甚至消除停滞期◆培养基成份：

在营养成份丰富天然培养基上生长延滞期比在合成培养基上生长时短；

接种后培养基成份有较大改变时，会使延滞期加长，所以发酵工业上尽可能使发酵培养基成份与种子培养基靠近。◆世代时间：世代时间短，即繁殖速度较快菌种停滞期普通较短★影响停滞期长短原因微生物的生长繁殖及其控制第8页

应用◆在发酵工业上需设法尽可能缩短延迟期；采取缩短lagphase办法有：①增加接种量；（群体优势----适应性增强）②采取对数生长久健壮菌种；③调整培养基成份，在种子培养基中加入发酵培养基一些成份。④选取繁殖快菌种◆在食品工业上，尽可能在此期进行消毒或灭菌微生物的生长繁殖及其控制第9页②.对数期（logphase）其它名称：指数期

现象：细胞数目以几何级数增加，其对数与时间呈直线关系。

特点：生长速率常数最大,世代时间最短,细胞数目以几何级数增加菌体大小形态、生理特征等比较一致代谢最旺盛对不良环境原因抵抗力强影响原因：菌种、营养成份、营养物浓度培养温度、DO、抑制剂世代时间G=(t2-t1)/[3.3(lgX2-lgX1)]微生物的生长繁殖及其控制第10页应用意义：①因为此时期菌种比较健壮，生产上用作接种最正确菌龄；②发酵工业上尽可能延长该期，以到达较高菌体密度③食品工业上尽可能使有害微生物不能进入此期④是生理代谢及遗传研究或进行染色、形态观察等良好材料。微生物的生长繁殖及其控制第11页③.静止期（stationaryphase）又称：稳定时、恒定时或最高生长久特点：①新增殖细胞数与老细胞死亡数几乎相等，微生物生长速率处于动态平衡，培养基中细胞数目到达最高值。②细胞分裂速度下降，开始积累内含物，芽孢杆菌开始产芽孢。☆对于发酵生产来说，普通在稳定时后期产物积累到达高峰，是最正确收获时期。原因：对数期消耗了营养物质，使其浓度降低；有害代谢废物大量积累(酸、醇、毒素等)；营养物百分比失调，如碳氮比不适当；理化条件(pH、DO、氧化还原势等)有所改变。微生物的生长繁殖及其控制第12页④.衰亡期（declinephase）特点：①细菌利用贮存物进行内源呼吸(本身溶解)。②细胞死亡数增加，死亡数大大超出新增殖细胞数，群体中活菌数目急剧下降，出现“负生长”。③细胞内颗粒更显著，细胞出现多形态、畸形或衰退形。

衰亡期比其它各时期时间长，它长短也与菌种和环境条件相关。产生原因：生长条件深入恶化，使细胞内分解代谢大大超出合成代谢，继而造成菌体死亡微生物的生长繁殖及其控制第13页分批培养应用：序批式间歇曝气器（SBR）微生物的生长繁殖及其控制第14页(二)连续培养(continousculture)1.概念：在细菌进入对数生长久时，以一定速率不停地补充新鲜营养物质，同时以一样速率排除培养物(含菌体及代谢产物)，让培养微生物长时间地处于对数生长久，以利于微生物增殖速率和代谢活性处于某种稳定状态。单批培养恒浊法恒化法分批培养 连续培养 时间连续流入新鲜培养液lg细胞数（个/ml）连续培养微生物的生长繁殖及其控制第15页2.连续培养方法分类(1)恒浊连续培养——是经过连续培养装置中光电系统控制培养液中菌体浓度恒定，使细菌生长连续进行一个培养方式。应用：发酵工艺采取该法以取得大量菌体和有经济价值代谢产物。微生物的生长繁殖及其控制第16页(2)恒化连续培养——以恒定流速进水，以相同流速流出代谢产物，以维持进水中营养成份恒定，使细菌处于最高生长速率状态培养方法。应用：污水生物处理(除SBR法)。微生物的生长繁殖及其控制第17页3.连续培养运行参数——稀释率DD＝流动速率/容积过低：新鲜营养补充不及时，造成大量细菌饥饿而死亡；过高：生长速率低于排出速率微生物的生长繁殖及其控制第18页5.1.3生长曲线在污水生物处理中应用1.活性污泥生长曲线①迟缓期②对数生长久③减速生长久④内源呼吸期微生物的生长繁殖及其控制第19页2.活性污泥生长曲线对废水生物处理指导意义

常规活性污泥法生物吸附法高负荷活性污泥法延时曝气法污泥消化生长下降阶段(减速期和稳定时)生长下降阶段(静止期)对数期和减速期内源呼吸阶段(衰亡期)内源呼吸阶段微生物的生长繁殖及其控制第20页

常规活性污泥不利用对数生长久微生物而利用静止期微生物原因：①处于对数期微生物代谢活力强，能去除大量有机物，但对进水有机物浓度需求高，使出水不易到达排放标准；②处于对数期微生物生长繁殖旺盛，沉淀性能差，致使出水水质差；③处于静止期微生物活力相对较差，但仍有相当活力，去除有机物效果仍很好；④处于静止期微生物体内积累了大量贮存物，强化了微生物生物吸附能力，自我絮凝、凝合能力强，在二沉池中泥水分离效果好，出水水质好。微生物的生长繁殖及其控制第21页5.1.4微生物生长量测定方法一、细胞数目标测定二、微生物生物量测定微生物的生长繁殖及其控制第22页一、细胞数目标测定

1.测定微生物总数(直接计数法)①计数器直接计数②染色涂片计数③百分比计数法④比浊法

2.测定活菌数(间接计数法)

微生物的生长繁殖及其控制第23页1.测定微生物总数(直接计数法)

①计数器(血球计数板）测定法0.052mm2×25适用范围：测定个体较大细菌或原生动物测定细胞个体形态较小则采取细菌计数板。微生物的生长繁殖及其控制第24页

1.测定微生物总数(直接计数法)

②涂片染色法1视野菌液(ml)＝(0.01ml

／1cm2)×视野面积(cm2)微生物的生长繁殖及其控制第25页1.测定微生物总数(直接计数法)

③百分比计数法百分比——样品菌液与等体积血液混合，观察二者百分比提问：假如平均每个视野中细菌数量/红血球数量百分比为5.5：1，则细菌数量=？5.5×400万个/ml=2.2×107个/mL样品红血球数已知(男性400~500万个／ml，女性350~450万个／ml)，平均400万个/ml细菌红血球微生物的生长繁殖及其控制第26页

1.测定微生物总数(直接计数法)

④比浊计数法浊——细菌悬浮液浊度细菌不完全透光，一定范围内细菌溶液混浊度与细菌数量成正比常见仪器：浊度计、分光光度计微生物的生长繁殖及其控制第27页一、细胞数目标测定2.测定活菌数(间接计数法)①载玻片薄琼脂层培养计数②平板菌落计数③液体稀释培养计数④薄膜过滤计数微生物的生长繁殖及其控制第28页无菌水2.活菌计数法(间接计数法)

平板菌落计数法第一步：菌样巧妙稀释得到不一样稀释度（10-x）菌液菌样被无菌水不一样稀释倍率后平板培养图微生物的生长繁殖及其控制第29页

10-210-3

10-410-5

各取1ml，均匀涂布于冷固体培养基平板上或与温热液态固体培养基混合冷却。第三步：培养稀释度过低，菌落密集无法计数能够计数，但数量过多，费时费劲数量适当，统计计算，作为结果数量太少，误差原因太大，不做计数第二步：接种平板每一个细菌会生成一个菌落微生物的生长繁殖及其控制第30页普通计数平板细菌生长菌落数以30~300个为宜。第四步：计数细菌数量=？细菌数量=数出菌落数/稀释度比如：10-5稀释度时菌落数为125个细菌数量=125/10-5=1.25×107个/mL

平板计数法是采取最广一个活菌计数法平均微生物的生长繁殖及其控制第31页二、微生物生物量测定

①测细胞干重法②含N量测定法③DNA测定法④生理指标法微生物的生长繁殖及其控制第32页5.2微生物生长因子5.2.1温度1.温度对微生物影响详细表现在：影响酶活性。温度改变影响酶促反应速率，最终影响细胞合成。影响细胞膜流动性。温度高，流动性大，有利于物质运输；温度低，流动性降低，不利于物质运输，所以，温度改变影响营养物质吸收与代谢产物分泌。影响物质溶解度。对生长有影响。微生物的生长繁殖及其控制第33页2.微生物按温度需求分类3.各类微生物生长适宜温度微生物最低温度℃最适温度℃最高温度℃嗜冷菌－5～05～1020～30嗜中温菌5～1025～4045～50嗜热菌3050～6070～80嗜超热菌55℃以上70～105110～113微生物原生动物放线菌霉菌藻类废水生物处理中微生物适宜温度℃16～2523～3723～3728～3030左右微生物的生长繁殖及其控制第34页4.嗜冷微生物在低温下生长机理①它们体内酶能在低温下有效地催化，在高温下酶活性丧失②主动运输物质功效良好，能有效地集中必需营养物③细胞膜中不饱和脂肪酸含量高，低温下也能保持半流动状态，能够进行物质传递微生物的生长繁殖及其控制第35页5.低温对微生物影响当环境温度低于微生物最适生长温度时，微生物代谢极其微弱，基础处于休眠状态，当微生物原生质结构并未破坏时，不会很快造成死亡并能在较长时间内保持活力，当温度提升时，能够恢复正常生命活动。应用：低温保藏菌种当温度过低，造成微生物细胞冻结时，有微生物会死亡，有些则并不死亡。6.高温对微生物影响高温下蛋白质发生不可逆变性，膜受热出现小孔，破坏细胞结构微生物的生长繁殖及其控制第36页小结：微生物培养应该在最正确温度范围进行；超出最高温度会对细菌造成伤害甚至造成死亡；低温有抑制细菌作用，能够让微生物休眠，但不会造成死亡。温度升高时，活性即可恢复。微生物的生长繁殖及其控制第37页5.2.2pH1.环境pH对微生物影响◆影响膜表面电荷性质及膜通透性，进而影响对物质吸收能力。◆改变酶活性、酶促反应速率及代谢路径：如：酵母菌在pH4.5～5产乙醇，在pH6.5以上产甘油、酸。◆环境pH值还影响培养基中营养物质离子化程度，从而影响营养物质吸收，或有毒物质毒性。微生物的生长繁殖及其控制第38页2.微生物适宜pH范围

大多数细菌、藻类和原生动物最适生长pH＝6.5～7.5，它们能适应pH＝4～10之间环境。微生物种类最低pH最适pH最高pH大肠埃希氏菌枯草芽孢杆菌金黄色葡萄球菌黑曲霉放线菌酵母菌霉菌

4.54.54.21.55.01.52.57.4—7.66.0—7.57.0—7.55.0—6.07.0—8.03.0—6.03.8—6.09.08.59.39.010.010.08.0微生物的生长繁殖及其控制第39页3.污水生物处理时pH宜维持在6.5～8.5

①大多数细菌、藻类、放线菌和原生动物在此范围内均能生长繁殖，有利于细菌形成菌胶团相互凝聚形成良好絮凝体，可取得良好净化效果；

②pH＜6.5酸性环境有利于霉菌和酵母菌生长，若霉菌在活性污泥中大量繁殖，因其不能分泌粘性物质于细胞表面，而降低了活性污泥吸附能力，其絮凝性较差，结构涣散不易沉降，处理效果下降，甚至造成活性污泥丝状膨胀。微生物的生长繁殖及其控制第40页4.培养基pH改变原因a分解葡萄糖、乳糖→有机酸，pH↓b分解蛋白质、蛋白胨及氨基酸→NH3和胺类，pH↑c细胞选择性地吸收阴阳离子，pH↑↓处理方法在配制培养基时应加入缓冲物质，如KH2PO4和K2HPO4。

微生物的生长繁殖及其控制第41页

在废水和污泥厌氧消化过程中，要控制好产酸阶段和产甲烷阶段产量，pH很关键，通常应控制pH＝6.6～7.6之间，pH＝6.8～7.2为最正确。

城市生活污水、污泥若不含蛋白质、氨等物质，处理之前就要投加缓冲物质；若连续运行则在运行期间也应投加，以碳酸氢钠为佳。

pH低工业废水可采取霉菌和酵母菌处理，无需调整pH，其所引发丝状膨胀可经过改革工艺来处理，如采取生物膜法、接触氧化法等。微生物的生长繁殖及其控制第42页小结：污水生物处理构筑物内pH控制在6.5～8.5之间；微生物培养基中应该加入缓冲物质。微生物的生长繁殖及其控制第43页5.2.3氧化还原电位(Eh)1.微生物与EhEh＞0，氧化环境，上限为＋820mVEh＜0，还原环境，下限为－400mV各类微生物适宜Eh

对于好氧生物处理系统，Eh处于+200～+600mV视为正常微生物好氧微生物兼性厌氧微生物专性厌氧微生物Eh(mV)300～400＞100，好氧呼吸＜100，无氧呼吸－250～－200微生物的生长繁殖及其控制第44页2.影响Eh原因氧分压:氧分压高，Eh高；氧分压低，Eh低。pH:pH高，Eh高；pH低，Eh低。3.控制Eh还原剂抗坏血酸、硫二乙醇钠、硫化氢和铁等微生物的生长繁殖及其控制第45页5.2.4溶解氧DO依据微生物与分子氧关系可将微生物分为微生物类型最适生长O2氧分压(×101kPa)微生物举例好氧微生物专性好氧微生物strictaerobe0.2多数细菌、放线菌和真菌微量好氧微生物microaerophilicbacteria0.003～0.2霍乱弧菌兼性厌氧微生物facultativeaerobe有氧无氧均无影响大肠杆菌、酿酒酵母厌氧微生物专性厌氧微生物anaerobeP(O2)＜0.005产甲烷菌耐氧厌氧微生物aerotolerantanaerobe代谢无需氧，氧存在对于无用也无害乳酸菌微生物的生长繁殖及其控制第46页5.2.4.1好氧微生物与氧关系1.氧对好氧微生物作用作为微生物好氧呼吸最终电子受体参加甾醇类和不饱和脂肪酸生物合成2.溶解氧供给好氧微生物需要氧是溶于水氧，即溶解氧。夏季水温高，常造成供氧不足，促使丝状细菌优势生长，从而造成活性污泥丝状膨胀。所以，在活性污泥生物处理中需设置充氧设备充氧，如经过叶轮机械搅拌、鼓风曝气等方式充氧。溶解氧质量浓度维持在3～4mg/L为宜。微生物的生长繁殖及其控制第47页5.2.4.2兼性厌氧微生物与氧关系1.不一样氧条件生理状态好氧条件：氧化酶活性强，细胞色素及电子传递体系其它组分正常存在；无氧条件：氧化酶无活性，细胞色素和电子传递体系其它组分降低或全部丧失。

巴斯德效应：指将氧通入正在发酵酵母菌悬液中，使得发酵速度下降，葡萄糖消耗速度也显著下降现象。微生物的生长繁殖及其控制第48页2.不一样氧条件下废水生物处理中微生物供氧正常：好氧微生物和兼性厌氧微生物共同起主动作用；供氧不足：好氧微生物不起作用，兼性厌氧微生物起主动作用，但有机物分解不彻底；污水、污泥厌氧消化：兼性厌氧微生物起水解、发酵作用，将大分子蛋白质、脂肪等水解为小分子有机酸和醇等。微生物的生长繁殖及其控制第49页3.反硝化细菌有O2时：进行好氧呼吸缺O2时：进行反硝化作用NO3－NO2－N2微生物的生长繁殖及其控制第50页5.2.4.3厌氧微生物与氧关系1.厌氧微生物氧毒害机制专性厌氧微生物不含有过氧化氢酶，会被代谢过程中产生H2O2杀死；专性厌氧微生物不含有超氧化物歧化酶(SOD)，而被超氧阴离子杀死；2.厌氧微生物培养方法可与兼性厌氧微生物混合培养，以去除O2，确保厌氧环境。He、H2、N2加入甲基蓝或刃天青指示Eh(显色表明有O2)封瓶口无氧培养罐内培养微生物的生长繁殖及其控制第51页5.2.5太阳辐射λ＜1000nm红外辐射，可被不产氧光合细菌用作光源；λ＝380～760nm可见光是蓝细菌、藻类进行光合作用能源。其余辐射对微生物都有害。微生物的生长繁殖及其控制第52页5.2.6水活度与渗透压5.2.6.1水活度αw水活度αw——表示在一定温度下，某溶液或物质在与一定空间空气相平衡时含水量与空气饱和水量比值，用小数表示。多数微生物在αw＝0.95～0.99时生长最好。大多数微生物在αw＝0.60～0.65时停顿活动。微生物的生长繁殖及其控制第53页5.2.6.2渗透压渗透压——当两液面高差产生压力足够阻止水再流动时，此时两液面高差间压力即为渗透压。半透膜清水蔗糖溶液⊿h微生物的生长繁殖及其控制第54页溶液浓度决定渗透压

溶质分子或离子数越多，渗透压越大同质量浓度溶液，溶质分子越小，其渗透压越大离子溶液渗透压比分子溶液渗透压大细菌渗透压

G＋——(2.0～2.5)MPaG－——(0.5～0.6)MPa微生物的生长繁殖及其控制第55页微生物在不一样渗透压溶液反应

①等渗溶液：形态大小不变，生长良好。应用：在试验室用ρ(NaCl)＝8.5g/L生理盐水稀释菌液。②低渗溶液：水分子大量渗透细胞内，使细胞膨胀，严重者破裂。③高渗溶液：细胞内大量失水，使细胞发生质壁分离。应用：用高渗溶液保留食物可预防腐败。微生物的生长繁殖及其控制第56页5.2.7表面张力γγ——是作用在物体表面单位长度上收缩力γ(H2O)＝7.3×10－4N/mγ(培养基)＝4.5×10－4～6.5×10－4N/m胆汁可降低γ，可用于试验判别肺炎球菌和链球菌可用胆酸盐分离大肠菌群微生物的生长繁殖及其控制第57页5.3其它不利环境因子对微生物影响5.3.1紫外辐射和电离辐射对微生物影响一、紫外辐射影响1.紫外辐射对微生物有致死作用λ＝260nm左右紫外辐射杀菌力最强致死原因：微生物细胞中核酸、蛋白质等对紫外辐射有尤其强吸收能力，可引发DNA链上两个邻近胸腺嘧啶分子形成胸腺嘧啶二聚体(T=T)，使DNA不能复制，造成死亡。微生物的生长繁殖及其控制第58页2.复活现象光复活——经UV照射微生物，随即暴露于蓝色可见光下，使T=T恢复正常状态，使一个别受损细胞恢复活力。暗复活——DNA链在黑暗条件下进行修复。3.微生物对紫外辐射抵抗力G＋＞G－芽孢＞营养细胞4.应用杀菌消毒诱变育种微生物的生长繁殖及其控制第59页二、电离辐射影响X－射线(λ＝0.1～0.01nm)、γ－射线(λ＝0.01～0.001nm)对微生物生命活动影响表现低剂量照射，促进微生物生长或引发微生物发生变异；高剂量照射，对微生物有致死作用。微生物的生长繁殖及其控制第60页5.3.2超声波超声波——频率大于0Hz声波，能破坏几乎全部细菌体。超声波杀菌效果与其频率、处理时间、细菌大小、形状和细菌数相关。杀菌机制:①细胞内含物受到强烈振荡，胶体发生絮状沉淀，凝胶液化或乳化，从而失去生物活性；②溶液受到超声波作用产生空腔，引发巨大压力改变，使细菌死亡；③溶于溶液中气体变成无数极微小气泡快速猛烈地冲击细菌，使之破裂。微生物的生长繁殖及其控制第61页应用①利用超声波破坏菌体，制成细菌裂解液，用于研究细菌结构、化学组成、酶活性等；②可利用超声波从组织中提取病毒；③利用频率为800～1000kHz超声波治疗疾病微生物的生长繁殖及其控制第62页5.3.3重金属对微生物影响Hg、Ag、Cu、Pb及其化合物可有效地杀菌和防腐，是蛋白质沉淀剂。杀菌机理：①其与酶－SH结合，使酶失活；②与菌体蛋白结合，使之变性或沉淀。质量浓度为20～5mg/L二氯化汞对大多数细菌有致死作用。硫酸铜对真菌和藻类杀伤力较强。波多尔液(硫酸铜＋石灰)在农业上可用于预防一些植物病毒。1L水样中加10mL质量浓度为1g/L硫酸铜溶液可抑制微生物呼吸。质量浓度为1～5g/L铅盐溶液对微生物有致死作用。微生物的生长繁殖及其控制第63页5.3.4极端温度对微生物影响1.超高温致死作用机理：蛋白质和酶蛋白在高温下发生不可逆凝固作用；细胞质膜中脂肪受热溶解使膜产生小孔，引发细胞内含物泄漏而致死。2.超高温杀菌效果影响与微生物种类、数量、生理状态、芽孢有没有及pH都相关。无芽孢杆菌比芽孢杆菌不耐热；营养细胞比芽孢不耐热；湿细菌比干细菌不抗热；酸性条件下细菌易被杀死；幼龄菌比老龄菌易被杀死。微生物的生长繁殖及其控制第64页3.灭菌和消毒(1)灭菌(sterilization)——经过超高温或其它物理、化学原因将全部微生物营养细胞和全部芽孢或孢子全部杀死。①干热灭菌(dryheatsterilization)优点：可保持物品干燥缺点：对于传热性差或体积较大物品效果较差应用：玻璃器皿、金属用具等耐热物品灭菌②湿热灭菌(moistheatsterilization)特点：温度低、时间短、灭菌效果高相同温度下，湿热灭菌效力比干热灭菌高，原因湿热情况下，菌体蛋白轻易受热凝固变性；湿热穿透力和热传导都比干热强；湿热蒸汽冷凝会放出潜热。微生物的生长繁殖及其控制第65页

高压蒸汽灭菌微生物的生长繁殖及其控制第66页(2)消毒(disinfection)——用物理、化学原因杀死致病菌(有芽孢和无芽孢细菌)，或是杀死全部微生物营养细胞或一个别芽孢。①煮沸消毒将待消毒物品置于水中煮沸15min以上，杀死细菌所以营养细胞和个别芽孢。②巴斯德消毒(Pasteurization)常见60～70℃温度将食品处理15～30min，以除去食品中微生物，同时保持食品营养和风味不变。