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文档简介

《遗传学》转化一、转化概念转化是指某些细菌（或其他生物）能通过其细胞膜摄取周围供体的染色体片段，并将此外源DNA片段通过重组整合到自己染色体组的过程。只有当整合的DNA片段产生新的表现型时，才能测知转化的发生。转化中接受供体遗传物质的称为受体。大部分的转化工作是用肺炎双球菌、枯草杆菌和流感嗜血杆菌进行的。二、细菌转化实验1.野生型肺炎双球菌的菌落为光滑型，一种突变型为粗糙型，两者根本差异在于荚膜形成。荚膜的主要成分是多糖，具特殊的抗原性；不同抗原型是遗传的、不稳定的，一般情况下不发生互变。荚膜菌落毒性类型光滑型S发达光滑有Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ粗糙型R无粗糙无Ⅰ，Ⅱ2、Griffith转化研究Griffith认为：有毒死细菌中的某种物质转移到无毒活细菌中，并使之具有毒性，导致小家鼠死亡。他将这种细菌遗传类型的转变称为转化，并将引起转化的物质称为转化因子。将加热杀死的SⅢ细菌与无毒RⅡ细菌混合培养，然后注入小家鼠体内，同样导致家鼠死亡。表明：细菌在培养条件下也能够实现遗传物质的定向转化。2、Griffith转化研究3、Avery等的转化试验试验结果表明：来源于加热杀死的SⅢ细菌，并使RⅡ细菌转化成为SⅢ型细菌的转化因子是DNA。Avery等人的试验也表明：决定细菌遗传类型的物质是DNA，即证明了DNA就是遗传物质。3、Avery等的转化试验三、转化过程（一）自然转化自然转化一般分为3个阶段：感受态细胞的出现、DNA接合与进入、DNA的整合。三、转化过程（一）自然转化1.感受态细胞的出现细菌在某一特定阶段所呈现出的能从周围环境中吸收DNA分子的状态称为感受态。感受态的出现是转化的前提。三、转化过程（一）自然转化2.DNA的结合与进入DNA吸附在感受态细胞表面的特定部位，并在相关酶的作用下，进入细胞中。三、转化过程（一）自然转化3.DNA的整合进入细胞后的单链DNA通过联会作用，整合到受体DNA中。联会的能力与亲缘关系远近密切相关。三、转化过程（二）人工转化过程已知许多细菌均无自然转化能力，但经人工诱导可使它们形成感受态。1.大肠杆菌的转化目前人们已经建立起了用Ca2+、Mg2+等诱导转化，能对大肠杆菌C600、JM101、JM109、DH5α等进行有效的转化。三、转化过程（二）人工转化过程已知许多细菌均无自然转化能力，但经人工诱导可使它们形成感受态。2.PEG介导的转化通过聚乙二醇（PEG,一般用PEG6000）的作用也可实现转化。首先用细胞壁降解酶完全除去它们的肽聚糖层，然后使其维持在等渗的培养基中，在PEG存在下，质粒或噬菌体DNA可被高效地导入原生质体。三、转化过程（二）人工转化过程已知许多细菌均无自然转化能力，但经人工诱导可使它们形成感受态。3.电穿孔法和基因枪转化法在许多细菌和真核系统中，它们既无自然的感受态呈现，也不能用上述的方法建立感受态

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