生物样品的制备 （溶剂萃取法固相萃取法）_第1页
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文档简介

（一）液—液萃取法(传统的方法)（二）固相萃取法(液—固萃取法)（三）自动化固相萃取技术（四）固相微萃取（五）膜萃取技术（六）微透析技术（七）超临界流体萃取法

三、溶剂萃取法（二）固相萃取法(液—固萃取法)

（Solid-phaseextraction,SPE）原理:将不同填料作为固定相装入微型小柱，当含有药物的生物样品溶液通过时，由于受到吸附、分配、离子交换或其它亲和力作用，药物或杂质被保留在固定相上，用适当溶剂清洗杂质，再用适当溶剂洗脱药物。

三、溶剂萃取法（二）固相萃取法(液—固萃取法)

（Solid-phaseextraction,SPE）常用洗脱方式①药物与固定相的亲和力比杂质强而被保留，用一种对药物亲和力更强的溶剂洗脱。②杂质与固定相的亲和力比药物强药物被直接洗脱。

三、溶剂萃取法（二）固相萃取法(液—固萃取法)

（Solid-phaseextraction,SPE）固相的选择原则：固相与被测组分应具有相似的极性①亲脂型（大孔吸附树脂、亲脂性键合相硅胶）②亲水型（硅胶、硅藻土、棉纤维）③离子交换型

三、溶剂萃取法（二）固相萃取法(液—固萃取法)实验步骤第一步：用甲醇润湿小柱，活化填料。第二步：用水或适当的缓冲液冲洗小柱—除去残留的甲醇。第三步：加样，使样品经过小柱，弃去废液。第四步：用水或适当的缓冲液冲洗小柱，去除内源性杂质。第五步：选择适当的洗脱溶剂洗脱被分析物，收集洗脱液，挥干溶剂，备用或直接进行在线分析。

三、溶剂萃取法（二）固相萃取法(液—固萃取法)注意：

1.血浆样品可直接上柱

2.样品量0.1~2ml3.流速1~2ml/min

三、溶剂萃取法（二）固相萃取法(液—固萃取法)优点：①引入杂质少；②完全避免乳化的形成；③在优化条件下有较高萃取率、重现性较好；④使用的溶剂大多可与水混溶，易于自动化。缺点：①价格昂贵；②技术要求高；③批-批之间有差异。

三、溶剂萃取法固相萃取法各种方法的比较固体萃取剂萃取机理被萃取物回收率选择性方便、省时性亲脂型亲脂性键合相硅胶憎水吸附较亲脂或具有较大亲脂部分结构中中很好大孔吸附树脂中中好离子交换型离子交换树脂离子交换及憎水吸附可成为带电的形式好好差亲水型硅胶硅藻土棉纤维填料表面水层与有机溶剂流动相之间的分配（硅胶可能还有吸附作用）较亲脂好中中SPE与LLE及沉淀蛋白法的比较SPE：高提取率及高选择性，快速、简单，可自动化，应用较多。LLE：两相间分配平衡时间较长萃取回收率及选择性随药物及萃取条件而变化沉淀。蛋白法：快速简便、回收率高；待测

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