NF-KB信号通路综述44391

NF-κB信号通路2021/5/91主要内容

★背景介绍

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IKK复合物的上游信号

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IκB激酶的结构和激活方式

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IκB蛋白的作用

★NF-κB的转录调节2021/5/92一.背景介绍

1.NF-κB信号通路2.NF-κB家族3.IκB蛋白家族4.IκB激酶复合物

NF-κB信号通路激活对肿瘤发生

发展的影响2021/5/93背景1NF-κB信号通路最基本的NF-κB信号通路，包括受体和受体近端信号衔接蛋白，IκB激酶复合物，IκB蛋白和NF-κB二聚体。当细胞受到各种胞内外刺激后，IκB激酶被激活，从而导致IκB蛋白磷酸化，泛素化，然后IκB蛋白被降解，NF-κB二聚体得到释放。然后NF-κB二聚体通过各种翻译后的修饰作用而被进一步激活，并转移到细胞核中。在细胞核里，它与目的基因结合，以促进目的基因的转录。2021/5/94NF-κB经典和非经典通路NF-κB的经典信号通路和非经典信号通路的主要区别就在于：☆在NF-κB的经典信号通路中，IκB蛋白的降解使NF-κB二聚体得到释放。☆而在NF-κB非经典信号通路中，则是通过P100到P52的加工处理，使信号通路激活。2021/5/95NF-κB家族背景2NF-κB家族由P50、P52、P65、c-Rel和RelB五个成员组成。它们分别由NFKB1,NFKB2,RELA,REL和RELB基因进行编码。它们都具有一个N端Rel同源结构域（RHD），负责其与DNA结合以及二聚化。另外,在P65、c-Rel和RelB中，存在着转录激活区域——TAD，对基因表达起正向调节的作用。P50和P52不存在转录激活区域，它们的同型二聚体可以抑制转录。2021/5/96NF-κB二聚体的存在方式

NF-κB二聚体与IκB蛋白结合

NF-κB二聚体与DNA结合

NF-κB二聚体结构

★

氨基末端为免疫球蛋白相似区域，对某一种形式的κB位点具有选择性。

★C-末端疏水区域提供NF-κB各亚基之间的连接。一般，NF-κB是以二聚体的形式存在的，而它的二聚体又有两种存在方式。2021/5/97背景3IκB蛋白家族

IκB蛋白家族包括七个成员：IκBα、IκBβ、IκBζ、IκBε、Bcl-3、p100和p105。作用：在细胞质中与NF-κB二聚体结合，并对信号应答具有重要作用。IκB蛋白的结构特点：存在锚蛋白重复区域（即多个紧密相连的钩状重复序列，每个重复序列含有33个氨基酸）。2021/5/98背景4IκB激酶复合物

IKKα/IKK1(CHUK)IKKβ/IKK2(IKBKB)

调节亚基NEMO

☺在特定的NF-κB信号通路中，IKKα和IKKβ是选择性需求的。2021/5/99背景5NF-κB信号通路激活对肿瘤发生发展的影响1.

NF-κB信号通路激活对肿瘤发生发展的促进作用。

※NF-κB所致的GADD45α和γ（生长抑制DNA损伤基因）联合表达下调是很多肿瘤细胞逃逸凋亡机制的关键步骤。

※NF-κB还可上调CyclinD1（CCNDI）等基因的表达,促进细胞生长。

※NF-κB激活对肿瘤的转移具有明显的促进作用。2.NF-κB信号通路激活对肿瘤发生发展的抑制作用。

※RelA(p65)亚基在p53-介导的凋亡过程中具有重要作用2021/5/910很多胞外刺激信号都可以引起NF-κB信号通路的激活,如：促炎症细胞因子TNF-α、白介素IL-1,细菌脂多糖(LPS),T细胞及B细胞有丝分裂原,病毒双链RNA以及各种物理和化学压力等。虽然这些胞外刺激所产生的胞内早期信号途径各不相同，但一般认为,大多数此类胞外刺激起始的信号传递反应将最终激活IKK复合物。在这个传递过程中，衔接蛋白起着重要的作用。二.IKK复合物的上游信号2021/5/911在很多NF-κB信号通路中，许多的信号中间物都是共有的，特别是IKK复合物的上游信号。不同的信号通路可利用一些共有的信号元件激活和抑制通路。TRAFs——TNF受体相关因子IKK复合物的上游信号衔接蛋白

RIPs——受体作用蛋白

TAK1——TGFβ-激活性激酶1IKK复合物的激酶

NIK——NF-κB诱导激酶2021/5/9121.TRAFs——TNF受体相关因子

▲TNF受体相关因子TRAFs家族成员是一大类胞内接头蛋白，能直接或间接与多种TNF和IL-1/Toll-like受体家族成员结合。介导多种下游信号通路的信号传导，其中包括NF-κB信号通路。从而影响细胞的生存、增殖、分化和死亡，并参与多个生物学过程的调控。

▲在几乎所用的NF-κB信号通路中，TRAFs都是关键的信号中间物。☆

TRAF蛋白家族：

TRAF蛋白家族一共有7个成员，分别是TRAF1、TRAF2、TRAF3、TRAF4、TRAF5、TRAF6、TRAF7。

2021/5/913TRAF蛋白质在结构上具有很高的同源性，同源性一般大于30%，其特征性的结构是所有成员在羧基端都有一个C-末端TRAF结构域，即包括一个卷曲螺旋结构，介导同型和异型蛋白之间的相互作用。另外，TRAF2-7的N-末端存在一个RING指结构，其可以作为E3泛素连接酶起作用，即将泛素转移到目的蛋白上。RING指结构后还有5到7个锌指结构域TRAF蛋白的结构2021/5/914TRAFS的功能1通过TRADD，TRAF2和TNF-α的受体TNFR1结合，向下传递信号，激活IKK。在此过程中，其RING指区域作为E3连接酶是必须的。但是其具体作用机制还需要深入研究。

在TNFR1信号通路中，单一的敲除TRAF2或TRAF5，NF-κB信号通路的激活仍会出现。但是双敲除TRAF2和TRAF5，则会造成NF-κB信号通路中，IKK复合物的激活出现缺陷。因此，在TNFR1信号通路中，需要TRAF2和TRAF5的共同作用。2021/5/915在Toll-like／IL-1信号通路中，TRAF6可与受体复合物发生作用，激活IKK。但是，TRAF6的E3连接酶作用机制也是需要进一步证明的。

因此，在NF-κB信号通路中，TRAF2、TRAF5和TRAF6在激活IKK复合物方面起着重要的作用。22021/5/916

另外，TRAF蛋白家族成员中，TRAF3也是较广泛的研究成员。

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TRAF3是既可以介导NF-κB经典信号通路，也可以介导非经典信号通路。在经典信号通路中，其可以与受体直接作用激活IKK复合物。而在非经典信号通路中，TRAF3通过NIK（NF-κB诱导激酶）激活IKKα，从而激活信号通路。

★在一些情况下，TRAF3可以诱导NIK的泛素化和降解，抑制信号通路的激活。但是这时候，其他TRAF家族成员可以介导TRAF3的降解，结果造成NIK的积累和活化，促进非经典信号通路正向激活。

因此，不管在经典还是非经典信号通路中，TRAF蛋白在诱导IKK激活方面发挥着很重要的作用。2021/5/9172.RIPs——受体作用蛋白

☆RIPs是经典NF-κB信号途径中的关键的衔接蛋白。

☆RIPs既可以通过蛋白结合区域直接作用于信号通路的上游，也可以通过与NEMO结合激活IKK复合物。并且，在大多数的TRAF依赖型信号通路中，RIPs都被牵涉其中。

☆

RIP蛋白家族一共有7个成员，分别为RIP1-7。

☆RIP蛋白的结构特征是：都具有保守的丝氨酸/苏氨酸激酶区域。

2021/5/918RIP1☆RIP1具有一个死亡结构域，可以介导其他衔接蛋白和受体的死亡结构域之间的相互作用。☆RIP1不仅可以招募IKK复合物，其更重要的作用是激活IKK复合物。☆RIP1激酶区域对IKK的激活并不是必需的，一般的作用是集合一个信号复合物元件，通过NEMO的寡聚化，和IKK的自磷酸化，诱导IKK复合物的激活。☆RIP1只出现在NF-κB经典信号通路中，而对于CD40或LTβR介导的非经典信号通路中是不需要RIP1的。2021/5/919RIP2☆RIP2包括一个C-末端半胱天冬酶活性和招募区域（CARD），可介导受体和衔接蛋白之间的相互作用。这个CARD区域，也使RIP2在一个特殊的NF-κB信号通路中起着重要的作用，即抗原受体信号通路。在抗原受体信号通路中，有着显著的CARDS作用，由于，BCL10和CARD11属于CARD包含蛋白，在抗原受体信号通路中对于激活IKK有着决定性的作用。这个信号通路是需要RIP2。同样，细胞内结构识别受体NOD-LRR家族成员也属于CARD包含蛋白，也需要RIP2来激活IKKβ。☆与RIP1相似，RIP2的激酶区域对IKK的激活也不是必需的，在NF-κB经典信号通路中，RIP2与TAK1和TRAFS作用，直接诱导NEMO的泛素化，和下游信号通路激活。2021/5/920RIP3

在NF-κB信号通路中，RIP3由于和RIP1具有同型作用基序（RHIM），所以与RIP1具有同等功能。但是在信号通路中，RIP3的重要性远远比不上RIP1，因为当RIP3缺失时，大多数的NF-κB信号通路是正常的。在特殊情况下，RIP3可能影响和阻碍RIP1诱导的NF-κB信号通路的激活。RIP蛋白总结：①

RIP1（作为一个死亡结构域和NEMO的衔接蛋白）与RIP2（作为一个CARD到NEMO的衔接蛋白），在一些NF-κB经典信号通路中扮演着类似的角色。②通过与NEMO结合，RIP蛋白招募IKK复合物。通过NEMO的寡聚化或泛素化依赖机制直接介导IKK复合物的激活。2021/5/9213.TAK1/NIK——TGFβ-激活性激酶1/

NF-κB诱导激酶

TAK1和NIK作为IKK激酶出现在NF-κB信号通路中。其中，在经典信号通路中，TAK1被涉及。而在非经典信号通路中，NIK有诱导IKKα激活和P100磷酸化的作用。TAK1

TAK1一般在RIP蛋白激活IKK的信号通路中（例如：抗原受体和NOD-LRR信号通路），都要被涉及。但是其作用机制并不明确。主要表现在：①在不同的经典信号通路中，TAK1的基因被敲除，NF-κB信号通路的激活会出现不同程度的缺陷。②TAK1是否作为一个IKK-K直接或通过一个媒介激酶（如：MEKK3）介导IKK的激活，这是不清楚的。③通过许多相同的信号中间物，LTβR介导的IKK的激活是不需要TAK1的。因此，对于TAK1的作用机制我们还需要更深入的研究。2021/5/922NIK☆在RIP蛋白缺失的情况下，NIK主要负责激活NF-κB的非经典信号通路。NIK可直接磷酸化，激活IKKα。☆NIK受到结合的TRAF蛋白，CIAP1和CIAP2（E3连接酶）的调节，当TRAF蛋白，CIAP1和CIAP2发生降解时，可导致NIK的积累和IKKα的激活。小结①在NF-κB非经典信号通路中，TRAF和NIK可以不通过NEMO，充分激活IKKα，从而使信号通路激活。②在NF-κB经典信号通路中，TRAF和RIP蛋白，和TAK1都是必需的。2021/5/923

对于NF-κB信号通路的激活，IKK是非常重要的。因此，了解IKK活性的调节已经成为掌握NF-κB信号通路激活的核心。

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1.IKK复合物

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2.IKK的激活

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3.IKK的酶作用底物三.IκB激酶的结构和激活方式2021/5/9241.IKK复合物

＊IKKα（又称IKK1），85kD＊IKKβ（又称IKK2），87kD＊NEMO（又称IKKγ），48kD

具有较高的序列同源性和相似的结构。在N-末端均含有蛋白激酶区,靠近中间区域的亮氨酸拉链区(LZ)及螺旋-环-螺旋(HLH)包括大段的卷曲螺旋(coiled-coil)及靠近C-末端的亮氨酸拉链区

虽然一些实验证明在IKK复合物中，可能会含有一些其他成分，,如IKK关联蛋白1(IKKAP1)、促分裂原活化蛋白激酶1(MEKK1)、NF-κB诱导激酶(NIK)及调节蛋白IKAP等，但是需要进一步的证明。IKK复合物的组成：2021/5/925IKK复合物各组分的作用IKKα：在经典的NF-κB信号途径中，IKKα并不是必需的。它在NF-κB受体活化因子(receptoractivatorofNF-κB,RANK)引起NF-κB活化转导途径及NF-κB活化变更途径中是必需的。IKKα的缺失可导致许多发育上的缺陷。IKKβ：IKKβ是促炎症反应因子刺激诱导NF-κB的激活的主要激酶。IKKβ缺陷的细胞对TNFα和IL-1等刺激不会

引起NF-κB的活化。IKKβ的活化是避免因局部缺血或

充血引起严重炎症反应而导致多组织功能丧失所必需的。NEMO：在经典的NF-κB信号通路中，NEMO是必需的。NEMO

可能通过与IKKβ和IKKα的直接作用而介导IKK复合物的组装,并且还能促进IκB蛋白与IKK激酶复合物的相互作用。2021/5/926IKK复合物的组装

IKKα、IKKβ和NEMO共同组成了IKK复合物——(NEMO2IKKα1IKKβ1)2。

IKKα和IKKβ可通过亮氨酸拉链区域形成二聚体，即IKKα：IKKβ异型二聚体。其实IKKα和IKKβ也具有其同型二聚体，但是在正常情况下很难存在。通过IKKC-末端的NBD区域，IKKα和IKKβ可与NEMO结合，结合的部位是第一个卷曲螺旋结构的47-80残基。其中，

IKKβ与NEMO结合的亲和力要高于IKKα。2021/5/927

虽然，IKK复合物的核心构成只包括IKKα/

IKKβ/NEMO，但是其中还有两个很重要的特征需要我们注意：①

激酶伴侣蛋白HSP-90/Cdc37。研究证明，伴侣蛋白HSP-90是与IKK复合物结合的，同时伴侣蛋白HSP-90的抑制物会抑制IKK复合物的激活，因此，可以说IKK复合物的激活是需要HSP-90的。由于HSP-90还与NF-κB信号通路中的其他激酶结合，Cdc37已经渐渐取代了HSP-90在IKK复合物的激活中发挥作用。②

ELKS（转录激活因子ETS样蛋白）。其作为一个IKK复合物的调节成分。但是其对IKK复合物的重要性还需要进一步证明。2021/5/9282.IKK的激活★IKK复合物的激活首先是需要IKK亚基的T环丝氨酸的磷酸化。但是目前这种磷酸化的机制并不明确。其中，IKKβ的磷酸化位点是丝氨酸177和181，IKKα的磷酸化位点是丝氨酸176和180。另外，激活的T环丝氨酸如果突变成谷氨酸则会产生IKK激活，而突变成丙氨酸则会取消信号应答。★

IKK复合物的激活中一个普遍的元素是：对TRAF家族成员的需要和诱导TRAF的寡聚化从而向下传递信号。这说明信号复合物的集合对于IKK的激活的重要性。★NEMO的C-末端区域介导IKK的激活。被RIP1介导的NEMO的可诱导的寡聚化被认为可以激活IKK，并且这一点已经得到了证明。但是，根据以上的发现，我们并不能得到IKK激活的具体机制。IKK激活需要的条件2021/5/929最近的一些发现为我们在研究IKK的激活的机制上提供了线索：①②③在酵母中，野生型的IKKβ表达的激酶活性被NEMO的共表达所提高，而那些T环被突变成谷氨酸的IKK，其活性也很高，但是其活性不会随着NEMO的共表达发生变化。说明：IKK的激酶活性被NEMO所提高，是通过IKK的T环磷酸化促进而发生的。研究发现，反式自磷酸化作为NEMO和IKK的一种本能的高次结构构成结果而发生，其展开的分子量近似激活的IKK。说明：反式自磷酸化可能是IKK激活的主要机制。IKK的NBD区域的丝氨酸残基的磷酸化，可以抑制IKK的活性，和阻止通过与NEMO的共表达而发挥作用的IKK活性的增加。说明：NBD/NEMO之间的作用对于NEMO介导的IKK激活很重要。IKK激活机制的探索

因此，我们可以知道在IKK激活中，反式自磷酸化是主要的作用机制。2021/5/930IKK激活途径可能是一个反馈调节的重要机制。接受刺激后，NEMO与IKK的结合区域被磷酸化，磷酸化位点为丝氨酸68。这个磷酸化可诱导NEMO二聚体的分离，和阻碍IKK与NEMO之间的相互作用，从而终止信号通路。这种构象的变化可被伴侣分子HSP-90或IKK复合物的磷酸化酶所识别，通过HSP-90或者NEMO在丝氨酸68的脱磷酸化的作用，可以使IKK复合物恢复活性。根据以上的研究发现，IKK的激活模型被提出。（见下页）

IKK激活的反馈调节2021/5/931IKK的激活模型

☆1.在静息状态下，(NEMO2IKKα1IKKβ1)复合物中，IKKs通过与NEMO相互作用而被抑制。

☆

2.在有刺激物的情况下，NEMO结合一个RIP蛋白（NEMO泛素化），使IKK的蛋白激酶区域暴露，诱导T环丝氨酸残基的反式自磷酸化或者由IKK-K磷酸化T环丝氨酸残基。

☆3.被激活的IKK可磷酸化下游的酶作用底物（如IκBs），从而激活NF-κB信号通路。被激活的IKK还可磷酸化IKKβ的丝氨酸740和NEMO的丝氨酸68,使得NEMO二聚体与IKK的分离,阻止激酶的反复激活。

☆4.Cdc37/HSP-90（伴侣分子）和PP2A/PP2Cβ（磷酸化酶）可以介导IKK复合物的重组。2021/5/932小结

①在NF-κB信号通路中，寡聚化的出现是一个共有的主题。

☆

TRAF蛋白的寡聚化使其可以顺利向NF-κB信号通路下游传递信号。

☆

RIP蛋白的寡聚化在NF-κB经典信号通路中是必需的。其与NEMO相互作用诱导IKK复合物的积聚。

☆

NEMO的寡聚化/泛素化在激活NF-κB信号通路中也是很重要的。同时，NEMO的泛素化在DNA损伤反应中也很重要。2021/5/933②一个复杂的NF-κB信号通路中，对于IKK的激活，是需要上游信号元件的寡聚化和泛素化。但是，在非经典信号通路中，RIP介导的NEMO的寡聚化不会发生，IKKα是通过NIKS直接介导T环磷酸化所激活的。IKKα对于NEMO的低亲和力也促使NIK进入IKKα的T环发挥作用，而不是IKKβ。③

IKK的激活是一个短暂事件，其从属于反馈调节机制。

☆多数的反馈调节机制作用于上游信号元件，其中作用最显著的是脱泛素化酶A20和CYLD。

☆IKK的C-末端NBD的磷酸化也是一种重要的反馈调节环的元件。

☆蛋白磷酸酶2A（PP2A），也可以通过转移T环磷酸化来阻碍IKK的激活。2021/5/9343.IKK的酶作用底物★

自由的IκB家族成员：

①IKKα、IKKβ可磷酸化IκBα丝氨酸32、36和IκBβ的丝氨酸19、23。其中，作为IKK的酶作用底物，IκBα要优于IκBβ。大多数情况下，IκBβ降解速度比IκBα慢。②IKKα可以磷酸化P100的丝氨酸672。★与NF-κB结合的IκBα：

是一种更好的IKK的酶作用底物。2021/5/935

IκB蛋白的主要作用是掩盖NF-κB的核定位信号，阻止其入核，及其与DNA的结合，使NF-κB以非活化形式存在于细胞的胞质中

。因此，对于研究NF-κB信号通路来说，IκB蛋白的研究很重要。

★典型的IκB蛋白——IκBα,IκBε和IκBβ

★前体IκB蛋白——p100和p105

★非典型的IκB蛋白——IκBζ和Bcl-3四.IκB蛋白的作用2021/5/936IκBαIκBβIκBε1.典型的IκB蛋白

三种经典的IκB蛋白，它们有其各自唯一的功能特征。另外，在应激反应引起的经典NF-κB信号通路中，这三种类型的IκB蛋白都是必需的。

在三种经典的IκB蛋白中，IκBα是NF-κB活化过程中最强的负反馈因子,保证NF-κB活化的迅速发生和关闭;而IκBβ和IκBε则能缓冲系统活化的波动趋势从而使NF-κB保持一个相对较长的响应时间。IκBα、IκBβ专一性抑制含有RelA和c-Rel的二聚体。2021/5/937IκB蛋白家族最广泛的研究成员：IκBα★IκBα是IκB蛋白家族最经典的成员。★在NF-κB信号通路中，IκBα可以与最普遍的NF-κB二聚体P65：P50结合，防止其入核及与DNA结合。因此，在IκBα缺失的情况下，已激活的NF-κB信号通路的终止是显著推迟的。★IκBα与P65:P50异源二聚体结合后，只掩饰P65的核定位序列（NLS），而P50的NLS则暴露。P50的NLS与IκBα的核导出序列（NES）结合，使IκBα与NF-κB二聚体的复合物在细胞质和细胞核之间穿梭运动。★当经典信号通路激活的时候，IκBα迅速降解，释放出多个NF-κB二聚体。★在非经典信号通路中，IκBα一般不是必需的。2021/5/938IκBε和IκBβ☆

IκBε的表达最初是在造血细胞中发现的，与IκBα相比，其降解和再合成具有明显的延迟现象。它的降解依赖于IKK复合物，它的表达受到NF-κB的调节。☆

IκBβ的功能目前还没有确定，它的缺失并不能显著影响NF-κB信号通路。最近的研究表明，IκBβ可能在细胞核中起调节NF-κB二聚体与κB位点结合的作用。但是这一结果需要进一步验证。2021/5/9392.前体IκB蛋白——p100和p105p105

☆p105作为一个IκB蛋白，可以被已激活的IKK复合物诱导降解。

☆p105通过20s蛋白酶体加工处理后形成p50，在此过程中，发生在翻译阶段。不需要SCFβ-TRCP。

☆另外，p105基因3’端也可以编码一个独立的调节因子IκBγ。

SCF复合物（Skp1、Cdc53/Cullin和F-box蛋白质）是泛素-蛋白酶系E3中的组成之一。β-TRCP（β-transducinrepeat-containingprotein，转导重复相容蛋白）作为F盒蛋白的一员，特异识别磷酸化的IκB和β-catenin，介导后者经泛素-蛋白酶复合体途径降解。

2021/5/940p100

☆

p100主要出现在非经典通路中，在其加工过程中需要IKKα和SCFβ-TRCP，最后被降解成p52。因此，p100加工处理成p52的过程是一个包括磷酸化和泛素化的受调控的过程。

☆

p100是RelB的唯一调节因子，因为包含RelB的NF-κB二聚体只结合p100。

☆

p100也可以作为传统的IκB蛋白，调节p65包含的IKKα下游复合物的活性。同时，其也可以限制p65的NF-κB活性，起反馈调节的作用。因此，p100可以对NF-κB的活性有正向和反向的调节。2021/5/941因此，p100对于NF-κB信号通路的调节是很重要的。①P100具有选择性调节特殊的NF-κB复合物的功能。②p100作为IκB蛋白，在特殊的NF-κB信号通路的下游区域发挥作用。③p100具有特殊NF-κB二聚体的基础活性的调节功能。P100加工处理成p52的过程P100：RelB异源二聚体IKKαSCFβ-TRCP导致P100的泛素化使P100磷酸化，磷酸化位点:丝氨酸866、870、872形成P52：RelB异源二聚体，从而激活NF-κB信号通路。2021/5/9423.非典型的IκB蛋白——IκBζ和Bcl-3Bcl-3☆

Bcl-3伴随着p50和p52构成的同型和异型二聚体在细胞核中被发现的。☆

p50同型二聚体可以与目标DNA的κB位点结合，从而抑制NF-κB信号通路。Bcl-3有两种作用方式：①可以通过从κB位点转移p50同型二聚体的方式，介导转录抑制物的释放，κB位点暴露，从而激活NF-κB信号通路。②也可以稳定p50同型二聚体，和阻止p65、p50或者其它含有TAD的二聚体进入κB位点的方式，抑制信号通路。☆CyclinD1是一种Bcl-3调节基因。☆去泛素化酶CYLD，可以通过阻止Bcl-3在细胞核积累，及其与p50，p52同型二聚体的共激活作用，来反向调节Bcl-3功能。☆

Bcl-3也可以通过在正常或者癌细胞中增强Hdm2基因的表达，来调节p53。2021/5/943IκBζ☆

IκBζ与Bcl-3较为相似，与其他的IκB蛋白只有较弱的同源性。☆

IκBζ在IL-1和TLR4诱导的NF-κB反应中表达上调，并且其表达主要集中在细胞核中。☆

NF-κB激活的通路中，IκBζ可以被诱导表达。其一旦表达，会直接和p50同型二聚体结合。可以说，IκBζ是作为p50同型二聚体的一个共激活因子起作用的。☆IκBζ也可以反向调节包含p65的NF-κB复合物。

因此，可以说，IκBζ也可以选择性的抑制和激活NF-κB信号通路。2021/5/944小结

通过对IκB蛋白的深入讨论，我们感觉，仅仅把IκB蛋白作为NF-κB信号通路的抑制因子已经不太恰当了，因为IκB蛋白也可以作为NF-κB信号通路的辅助因素，选择性的与各种NF-κB二聚体发生作用。尤其是非典型的IκB蛋白，这种作用更加明显。所以说，对于经典的IκB蛋白的作用主要是与NF-κB二聚体结合，阻止其入核，与DNA结合，从而抑制NF-κB信号通路。而对于非典型的IκB蛋白来说，其可以选择性的激活或者抑制NF-κB信号通路。2021/5/945

随着NF-κB信号通路的深入研究，人们渐渐将重点转移到NF-κB的转录调节是怎么样开始和终止的。

1.

共激活因子的调节

2.NF-κB信号通路的终止五.NF-κB的转录调节作用2021/5/9461.共激活因子的调节现以P65：P50为例，来说明NF-κB的转录调节。NF-κB转录调节中的激酶：①PKA（蛋白激酶A），存在在一个带有细胞溶质NF-κB：IκB的复合物中，随着IκB的降解，其在细胞质中磷酸化P65，磷酸化位点是丝氨酸276。这个磷酸化可以促进P65和转录辅助激活因子CBP（-cAMP反应元件结合蛋白）/P300的相互作用。②MSK1和MSK2（分裂素和压力激活激酶），可在细胞核中磷酸化P65的丝氨酸276.MSK1、MSK2与PKA享有共同的酶作用底物，即特异性的P65。但是其具体作用机制还需要进一步证明。2021/5/947P65的磷酸化调节

①PKA在细胞质中磷酸化P65的丝氨酸276。

MSK1和MSK2在细胞核中磷酸化P65的丝氨酸276。②IKKα和IKKβ可磷酸化P65的丝氨酸536。③P65的丝氨酸529可以被CK2（蛋白激酶）诱导磷酸化。④PKCζ能磷酸化P65的丝氨酸311。由此看来，P65的磷酸化位点主要发生在两个区域：一个是RHD的二聚体化的功能域（包括丝氨酸276和311），一个是C-末端TAD区域（包括丝氨酸529和536）。这些磷酸化中的每一种都可能有助于通过诱导构象变化促进CBP/P300与P65的结合。从而完成P65的激活。2021/5/948P65的乙酰化调节

P65的乙酰化发生在细胞核中，可能被CBP/P300和结合的HATS（组蛋白乙酰转移酶）诱导，乙酰化的位点是P65的赖氨酸310。P65的乙酰化使其和IκBα的结合作用大大减弱，促进转录活性。但是其在核内可以被HADC3（组蛋白去乙酰化酶）脱去乙酰基，从而促进P65和IκBα的有效结合，形成的复合物在CRMI（核质运输蛋白）的协助下被排出核外，终止转录活性。因此，P65的乙酰化可增强目的基因转录活性。2021/5/949

P65的乙酰化需要两个基本条件：①

P65的磷酸化对于赖氨酸310的乙酰化是必需的。丝氨酸276磷酸化的缺乏或过表达具有催化活性的PKAC，会阻碍赖氨酸310的乙酰化。丝氨酸536的磷酸化也可以显著增加赖氨酸310的乙酰化。②

IKKα通过SMRT的磷酸化促进赖氨酸310乙酰化，导致HDAC3从SMRT辅阻碍物复合物的转移。另外，IKKα还可