还原糖的鉴定

还原糖的鉴定第1页，共14页，2023年，2月20日，星期四显微镜的使用1、安放；2、对光；3、调焦；4、观察。第2页，共14页，2023年，2月20日，星期四实验一:生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定

一、实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。、可溶性还原糖＋斐林试剂砖红色沉淀、脂肪＋苏丹III橘黄色脂肪＋苏丹IV红色3、蛋白质＋双缩脲试剂紫色反应第3页，共14页，2023年，2月20日，星期四二、实验材料：鉴定的有机物适宜材料选用的材料可溶性还原糖脂肪蛋白质含糖量较高、颜色为白色或近于白色的植物组织富含脂肪的种子富含蛋白质的生物组织苹果汁花生种子豆浆第4页，共14页，2023年，2月20日，星期四深入原理

1.可溶性还原糖的鉴定原理：

生物组织中常见的可溶性糖有葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖。前三种糖分子中都含有游离的具有还原性的半缩醛羟基，因此叫还原性糖，而蔗糖的分子中没有，因此叫非还原性糖。

斐林试剂与可溶性还原糖在加热的条件下，生成砖红色的Cu2O沉淀。如用沸水浴加热，Cu2O沉淀颗粒较大，呈现砖红色；如用酒精灯直接加热，Cu2O沉淀颗粒较小，呈现黄色。第5页，共14页，2023年，2月20日，星期四深入原理

2.蛋白质的鉴定原理：

在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲（H2NCO－NH－CONH2）能与Cu2＋作用，可形成紫色或紫红色的络合物，这一反应称双缩脲反应。凡在本身结构中具有双缩脲基的化合物，都能进行双缩脲反应，这是特定的颜色反应。蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键(两个相邻的肽键与双缩脲结构相似)，因此又称为肽键反应。第6页，共14页，2023年，2月20日，星期四深入原理

3.脂肪的鉴定原理：苏丹染料在脂肪中的溶解度大于酒精中的溶解度，用苏丹染料的酒精溶液处理含有脂肪的生物组织时，酒精中的苏丹进入脂肪中，在脂肪中溶解、积累，并吸附在脂肪颗粒结构上，呈现出橘黄色（苏丹III

）或红色（苏丹IV）。第7页，共14页，2023年，2月20日，星期四脂肪细胞＋苏丹III第8页，共14页，2023年，2月20日，星期四

三、试剂：

1、斐林试剂

A液质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液B液质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液

2、双缩脲试剂A液质量浓度0.1g/mL的NaOH溶液B液质量浓度0.01g/mL的CuSO4溶液

3、苏丹III

0.1g苏丹III干粉，溶于100mL体积分数为95%的酒精中，待全部溶解后再使用。

第9页，共14页，2023年，2月20日，星期四四、实验步骤1、可溶性还原糖的鉴定制备生物组织样液取材、研磨、过滤取样取2ml组织样液注入试管注入试剂向试管中加入2ml刚配制的斐林试剂加热（煮沸2min），观察第10页，共14页，2023年，2月20日，星期四2、蛋白质的鉴定制备生物组织样液取材、研磨、过滤预备组织样液注入组织样液取一支试管注入黄豆组织样液2ml注入试剂A加入2ml双缩脲试剂B，摇匀观察颜色变化注入试剂B试剂A滴入3~4滴双缩脲第11页，共14页，2023年，2月20日，星期四3、脂肪的鉴定制备生物组织实验材料去种皮、削平面、切片染色滴2～3滴苏丹III染液染色2～3分钟去浮色在玻片上滴1～2滴体积分数为50％酒精溶液，洗去浮色制作临时装片放在显微镜下观察（先低倍镜后高倍镜）第12页，共14页，2023年，2月20日，星期四

五、注意事项：

1、合理安排，注意安全

2、苹果组织液必须临时制备，保存时间不能过长

3、双缩脲试剂B（CuSO4）不能多加

第13页，共14页，2023年，2月20日，星期四

六、讨论与探究：

1、你能否用鉴定可溶性还原糖的方法，对青菜叶、韭菜叶和甘蔗茎做相应的鉴定？