季花药培养-公开课

季花药培养-公开课第一页，共26页。1、细胞分裂素和生长素使用顺序不同，结果不同:使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素先使用细胞分裂素，后使用生长素同时使用有利于细胞分裂，但细胞不分化细胞既分裂也分化分化频率加快第二页，共26页。生长素>细胞分裂素：生长素=细胞分裂素：

生长素<细胞分裂素：2、细胞分裂素和生长素使用比例不同，发育方向不同利于根的分化和抑制芽的形成促进愈伤组织的生长有利于芽的分化、抑制根的形成第三页，共26页。大自然为我们创造了千姿百态的植物，许多植物都会开出鲜艳、芳香的花朵。月季牡丹导入新课第四页，共26页。百合第五页，共26页。你知道这些绚丽、芬芳的鲜花用人工方法是怎样产生的吗？花药

花药是花丝顶端膨大呈囊状的部分，是雄蕊产生花粉的主要部分。第六页，共26页。花药培养采用植物组织培养技术，把发育到一定阶段的花药，通过无菌操作技术，接种在人工培养基上，以改变花药内花粉粒的发育程序，诱导其分化，形成细胞团，进而形成愈伤组织，随后使愈伤组织分化成完整的植株的技术。什么是花药培养呢？第七页，共26页。课题2月季的花药培养第八页，共26页。花的结构第九页，共26页。阅读：P37-38被子植物的花粉发育重点掌握：被子植物花粉的发育过程第十页，共26页。花丝花药：囊状结构，内有很多花粉2、由花粉母细胞（即小孢子母细胞）花粉，即：单倍体的生殖细胞。（一）被子植物的花粉发育1、雄蕊一、基础知识减数分裂3、阶段：四分体时期、单核期、双核期第十一页，共26页。4、过程：减数分裂有丝分裂第十二页，共26页。花粉：是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。1花粉母细胞4个小孢子减数分裂有丝分裂4个花粉管细胞核4个生殖细胞核有丝分裂8个精子过程总结：注意：精子和营养核的基因型相同。第十三页，共26页。阅读：P38产生花粉植株的两种途径重点掌握：花药培养产生花粉植株的两种途径第十四页，共26页。（二）产生花粉植株的两种途径①②移栽花药中的花粉胚状体脱分化愈伤组织花药中的花粉脱分化分化

丛芽再分化

丛芽诱导生根体细胞胚（胚状体）：在组织培养过程中，某些细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，它的发育过程也与合子胚类似，胚芽、胚根、胚轴等结构完整，就像一颗种子。这两种途径之间没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及浓度配比。第十五页，共26页。1、材料的选择不同植物的诱导成功率不同.

同一植物的不同生理状况也对诱导成功率有直接的影响.(三)、影响花药培养的主要因素——材料的选择与培养基的组成从花药看：从花粉看：从花蕾看：此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等对诱导成功率有一定影响。月季的初花期（五月初到五月中旬）单核期（一般来说，细胞核从中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高）完全未开放的第十六页，共26页。选择哪个做材料？第十七页，共26页。答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。思考为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？第十八页，共26页。二、实验操作（一）材料的选取（二）材料的消毒（三）接种和培养第十九页，共26页。阅读教材P39-40回答以下问题：1.如何确定花粉是否处于适宜的发育期。2.确定花粉发育时期的最常用方法是？如果某些花粉细胞核不易着色，需要采用什么方法？能将花粉细胞核染成什么颜色？3.为什么要彻底除去花丝？4.是否一直需要光照？5.什么时候把植株移栽到新的培养基上？6.为什么还要进一步的鉴定和筛选？第二十页，共26页。（一）材料的选取1.选择花药一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。2.最常用的方法：醋酸洋红法（将染色体染成红色）

焙花青—铬矾法。某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青—铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。第二十一页，共26页。（二）材料的消毒5、无菌水冲洗3～5次

花药的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态1、花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒2、无菌水清洗3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4分钟（质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）第二十二页，共26页。（三）接种和培养1、灭菌后花蕾，要在

下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。3、通常每瓶接种花药

，温度控制在

左右，

。幼小植株形成后才

。2、在剥离花药时，要尽量

（否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底

，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。无菌条件不损伤花药去除花丝7-10个25℃不需要光照需要光照4、一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。5、对培养出来的幼苗进一步的鉴定和筛选。第二十三页，共26页。植物组织培养技术与花药培养技术的比较项目植物组织培养花药培养技术相同点不同点1、离体培养的外植体为体细胞。2、有丝分裂的过程，染色体数量不变。1、花粉是生殖细胞，得到的单倍体植株，弱小且高度不育。2、秋水仙素处理，染色体加倍，恢复正常的染色体数，为纯种。离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织（或胚状体），再分化（或分化）成丛芽，诱导出根，然后进行移栽。第二十四页，共26页。基础知识实验操作被子植物的花粉发育花粉双核期其