大豆磷脂氮含量磷含量测定方法与注意事项

大豆磷脂磷含量测定状态：黄色或黄棕色半固体，吸湿性强。标准规定：以无水物计算，本品含磷（P）不得少于2.7%。检验过程：对照品溶液的制备：精密称取经105°C干燥至恒重的磷酸二氢钾对照品43.9mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml,置另一50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀（每1ml相当于0.04mgP）。供试品溶液的制备：取本品约0.15g,精密称定，置凯氏烧瓶中，加硫酸20ml与硝酸50ml,缓缓加热至溶液呈淡黄色，小心滴加过氧化氢溶液，使溶液褪色，继续加热30分钟，冷却后，用水定量转移至100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。测定法：精密量取对照品溶液与供试品溶液各2ml,分别置50ml量瓶中，各依次加入钼酸铵硫酸试液4ml,亚硫酸钠试液2ml与新鲜配制的对苯二酚溶液（取对苯二酚0.5g，加水适量使溶解，加硫酸1滴，用水稀释至100ml）2ml,加水稀释至刻度，摇匀，暗处放置40分钟，照紫外-可见分光光度法（《中国药典》2010年版二部附录WA）,在620nm的波长处分别测定吸光度，计算含磷量。钼酸铵硫酸试液：1・25g钼酸铵，加硫酸7・5ml,用水稀释到50ml（可保存2周）对苯二酚溶液：取对苯二酚0・25g加水适量使溶解，加硫酸1滴，用水稀释至50ml（现配）亚硫酸钠试液：2g无水亚硫酸钠用水稀释到10ml（现配）计算：X100%A供试品XM对照品XP/KH2PO4X稀释倍数X对照品含量X100%A对照品XM供试品X（l-干燥失重％）式中：A供——供试品溶液吸收度；供试品A对照品——对照品溶液吸收度；对照品M供试品——供试品重量（g）；供试品M对照品—对照品重量（g）；P——磷的原子量（30.97）；KHPo——磷酸二氢钾分子量（136.09）；24公式推导：基本原理A=ECLA供 = EC供磷L = m供磷/V = m供磷A对 = EC对磷L = m对磷/V = m对磷M供*（1-干燥失重％）*含量*（2/100）M对*M供*（1-干燥失重％）*含量*（2/100）X100％X100％A供XM对XP/KH2Po”X(10/50)X(2/50)XX100％X100％A对XM供X(1-干燥失重%)X(2/100)A供XM对XP/K^Po”X对照品含量X0.4A对XM供X（1-干燥失重%）、.，Y- ■、'八.，I[/—r-.T,注意事项：1.不加石棉网可快些，要逐渐调大火，防止酸液损伤电炉丝和溶液沸腾过于剧烈。2•溶液有时会变黑渐渐沸腾，最后硝酸挥发约剩20ml硫酸，显淡黄或白色，约烧6小时。3.最后加过氧化氢约1~3滴管即能透明。那英杰406293109大豆磷脂氮含量测定检验方法：取本品约O.lg，精密称定，照氮测定法(《中国药典》2010年版二部附录WD第二法)测定。标准规定：本品含氮量应为1.5〜2.0%。第二法(半微量法)连接蒸馏装置(药典)，A瓶中加水适量与甲基红指示液数滴，加稀硫酸使成酸性，加玻璃珠或沸石数粒，从D漏斗加水约50m1,关闭G夹，开放冷凝水，煮沸A瓶中的水，当蒸气从冷凝管尖端冷凝而出时，移去火源，关H夹，使C瓶中的水反抽到B瓶，开G夹，放出B瓶中的水，关B瓶及G夹，将冷凝管尖端插入约50ml水中，使水自冷凝管尖端反抽至C瓶，再抽至B瓶，如上法放去。如此将仪器洗涤2〜3次。取供试品适量(约相当于含氮量1.0〜2.0mg),精密称定，置干燥的30〜50ml凯氏烧瓶中，加硫酸钾(或无水硫酸钠)0.3g与30%硫酸铜溶液5滴，再沿瓶壁滴加硫酸2.0ml；在凯氏烧瓶口放一小漏斗，并使烧瓶成45°斜置，用小火缓缓加热使溶液保持在沸点以下，等泡沸停止，逐步加大火力，沸腾至溶液成澄明的绿色后，除另有规定外，继续加热10分钟，放冷，加水2ml。取2%硼酸溶液10m1,置100ml锥形瓶中，加甲基红一溴甲酚绿混合指示液5滴，将冷凝管尖端插入液面下。然后，将凯氏烧瓶中内容物经由D漏斗转入C蒸馏瓶中，用水少量淋洗凯氏烧瓶及漏斗数次，再加入40%氢氧化钠溶液10ml,用少量水再洗漏斗数次，关G夹，加热A瓶进行蒸气蒸馏，至硼酸液开始由酒红色变为蓝绿色时起，继续蒸馏约10分钟后，将冷凝管尖端提出液面，使蒸气继续冲洗约1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏。馏出液用硫酸滴定液(0.005mol/L)滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色，并将滴定的结果用空白试验(空白和供试品所得馏出液的容积应基本相同，约70〜75ml)校正。每1ml硫酸滴定液(0.005mol/L)相当于0.1401mg的N。取用的供试品如在0.1g以上时，应适当增加硫酸的用量，使消解作用完全，并相应地增加40%氢氧化钠溶液的用量。计算：X100%(V供试品-V空白)X°.14°1XFX100%WX1000式中：V供试品——供试品消耗硫酸滴定液(0.005mol/L)的容积(ml)；供试品V空白——空白溶液消耗硫酸滴定液(0.005mol/L)的容积(ml)；空白W ——供试品重量(g)；F ——硫酸滴定液(0.005mol/L)的校正因子\Y*■、'八■，I[/—r-.r*注意事项：加稀硫酸防止水中有氨蒸出影响结果。验证容器是否洁净可用硼酸-指示剂混合液验证。3•开始小火泡沸2h左右。加漏斗堵口，防止硫酸烧干。大火2h左右，不时转动，使样品完全消化。冷却后为透明无色，加些水变浅绿，冷却后加入装置。4.连续做样时可把A瓶塞打开使蒸汽不冲出进样口，即可加样。冷凝水一定开大到使流出含氮水蒸气完全液化。流出液体70ml左右并且是凉的不烫可以直接滴定。(本人接50ml左右，对结果并无影响，不同样品可能不同)那英杰406293109氮测定法一、定义测定化合物中含氮元素量的分析方法称为氮测定法。二、原理将供试品置凯氏烧瓶中，加硫酸、硫酸钾(或无水硫酸钠)、无水硫酸铜，加热裂解，将氮变为铵盐，然后碱化反应进行蒸馏使氨释放，同时用硼酸溶液收集，再用硫酸滴定液滴定，以氮的量计算供试品的含量。三、测定步骤消化(或破坏)消化原理将一定量的样品与浓硫酸共热，则有机物中的碳和氢被浓硫酸氧化成CO2和H20,而氮则转变成NH3；HSO被还原为SO和H0。生成的CO、SO和HO由溶液中逸去，而NH则与过量的HSO结合成NHHSO或4 2 2 2 2 2 3 2 4 4 4(NH)SO保留在溶液中。424为了使有机物的破坏能迅速完全，通常采用升高温度和加入催化剂两种办法。在增高温度方面常加入不易挥发的无水碱金属硫酸盐(KSO或NaSO)以提高浓硫酸的沸点，阻止高温下浓硫酸的分解。在催化2424剂方面，常加入少量CuSO(无水)、HgO、CuO、Se、HSeO等催化剂，其中以CuSO最常用。4 2 3 4消化操作要求将供试品放入凯氏烧瓶中时，注意勿使供试品粘着瓶颈，如已沾着瓶颈，可在缓缓加硫酸时，用硫酸冲入。(2)破坏时有部分硫酸蒸发及分解出有毒气体，故须在毒气柜中进行，以免中毒。使凯氏烧瓶成45。斜置，可防止在加热过程中供试品液飞溅的损失，防止瓶外的杂质掉入瓶内。切勿将烧瓶口朝向自己或他人，以防加热炮沸时溅出伤人。在凯氏烧瓶口放一小漏斗，有回流冷凝的作用，防止硫酸的挥发。开始加热时，应用直火缓缓加热，使溶液的温度保持在沸点以下，防止突然高温时，造成泡沫冲出而遭损失。等泡沸停止，强热至沸腾，俟溶液成澄明的绿色后，除另有规定外，继续加热至规定时间，放冷。有必要时(如瓶壁上部有黑色残渣)，可轻轻转动或摇动烧瓶，时供试品能充分与硫酸接触，以保证破坏完全。蒸馏1•蒸馏原理于消化后已冷却的NHHSO或(NH)SO溶液中，加入浓NaOH溶液并加热，可使NH再游离出来。TOC\o"1-5"\h\z4 4 42 4 3NHHSO+NaOH—NHf+NaHSO+HO4 4 3 4 2△或 (NH)SO+2NaOH—2NHf+NaSO+2HO42 4 3 2 4 2△一般采用通入水蒸气加热的办法使NH逸出，将逸出的NH吸收在HBO溶液中。3 3 3NH+HBO—NHBO+HO3 3 3 4 2 22.蒸馏操作要求破坏完成以后的溶液，放冷有白色固体析出，于尚未完全凝固时，缓缓加适量纯化水溶解，放冷至室温。在碱化前，先将蒸馏装置清洗好，安装好，并检查不得漏气。若用水蒸气蒸馏时，蒸汽发生器已沸腾。冷凝管的尖端应插入吸收液面下2/3处，使吸收完全，防止倒吸现象。将足够量的氢氧化钠溶液注意使沿瓶壁缓缓流至瓶底，自成一液层，以减少酸碱作用范围，待全部装置妥善后，再使其与酸液混合，否则会因强酸强碱中和时产生大量的热而使氨逸出损失。5）在常量法直接蒸时，加锌粒是为防止过热后出现爆沸，为止爆剂，但必须在加入碱液后，再加入锌粒，以免锌粒与硫酸作用而很快消耗掉。（6）在半微量法中，在发生水蒸气的圆底烧瓶中加甲基红指示液数滴，加稀硫酸使成酸性，是为防止水中含有氨等挥发性碱性物质随水蒸气带入蒸馏器中，从而进入吸收液影响结果。注意一定不能使用盐酸等挥发性酸调酸性，防止挥发性酸进入蒸馏器内中和碱液，或进入吸收液影响结果。（7）安装时，圆底烧瓶的蒸气出口应低于蒸馏器的蒸气入口，使蒸气带起的小水滴再回流到圆底烧瓶中，防止进入蒸馏器的夹层中降低蒸馏温度。（8）圆底烧瓶中加玻璃珠或沸石数粒，以防止产生爆沸现象。（9）蒸馏开始不可太快，以免蒸出的氨未及吸收而逸失。（10）加热的火力应稳定，不能忽大忽小，否则会发生倒吸现象。（11）蒸馏至规定接受体积时，先将冷凝管尖端提出液面，使蒸气冲洗约1分钟，用水淋洗尖端后，再停止蒸馏。（12）本法应同时作空白试验，并将滴定的结果用空白试验校正。（三）滴定然后用硫酸滴定液直接滴定，其反应式为：2NHBO+HSO+2H0—（NH）SO+2HBO224242433在这里h3bo3起着固定氨的作用。由于h3bo3的酸性极弱，它的存在并不干扰滴定。四、 不需有机破坏的含氮药物某些含氮药物（如吡拉西坦中含有酰胺结构），可直接加入氢氧化钠，加热水解生成低级胺、氨，蒸馏出来，用硼酸溶液吸收，以硫酸滴定液滴定。五、 注意事项1•供试品取量应适宜，常量法约相当于含氮量25〜30mg，半微量法约相当于含氮量1〜2mg，供试品取量太多或太少，都将影响测定结果。2•取用的供试品如在0.1g以上时，应适当增加硫酸的用量，使消解作用完全，并相应地增加40%氢氧化钠溶液的用量。样品裂解时，用直火加热时间不可过长，加入硫酸盐的量不可过多，以防硫酸铵分解。因强酸、强碱中和时会发生大量的热，使